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一、名词解释

1． 简单扩散。

【答案】简单扩散是指不需要消耗代谢能量，小分子物质利用膜两侧的电化学势梯度而通过膜的运输方式。

2． 异促效应。

【答案】异促效应是指非底物分子的调节物对别构酶的调节作用。

3． Edman 降解法（gdmandegradation ）。

【答案】Edman 降解法，又称苯异硫氰酸酯法，是指从肽链的游离的

的序列的过程。末端测定氨基酸残基末端氨基酸被苯异硫氰酸酯（PITC ）修饰，然后从肽链上分离修饰的氨基酸，再用乙酸乙酯抽提后，可用层析等方法鉴定。余下一条缺少一个氨基酸残基的完整的肽链再进行下一轮降解鉴定循环。

4． 单纯蛋白质（simpleprotein ）。

【答案】单纯蛋白质是指只由氨基酸组成，不含氨基酸以外的其他化学成分的蛋白质分子，例如：核糖核酸酶、肌动蛋白等。

5． 分子杂交（hybridization ）。

【答案】杂交分子是指当两条不同来源的DNA （或RNA ）链或DNA 链与RNA 链之间存在互补顺序时，在一定条件下可以发生互补配对形成的双螺旋分子，形成杂交分子的过程称为分子杂交。

6． 质粒（plasmid ）。

【答案】质粒是一种在细菌染色体以外的遗传单元，一般由环形双链DNA 构成，其大小从1 至

7． 生物转化作用。

【答案】生物转化作用是指机体将体内的非营养物质（激素、神经递质、药物、毒物等及肠管内细菌的腐败产物）在肝脏进行氧化、还原、水解和结合反应，使这些物质生物活性或毒性降低甚至消除的过程。

8． 底物水平磷酸化。

【答案】底物水平磷酸化是指在底物被氧化的过程中，底物分子内部能量重新分布产生高能磷酸键（或高能硫酯键），由此高能键提供能量使ADP （或GDP ）磷酸化生成ATP （或GTP ）的过程。

二、问答题

9． 假定你使用脂肪细胞来研宄. 肾上腺素受体（GPCR ），此受体通过cAMP 和PKA 激活对激素敏感的脂肪酶，导致在需要能量的情况下脂肪酸的释放。当你将哺乳动物脂肪细胞与肾上腺素接触8h ，期间你每隔一段时间就测定一下游离脂肪酸的浓度。正如预期的那样，到3h 的时候，脂肪细胞产生游离的脂肪酸，以后的2h 产率开始下降，最后在剩余的时间里达到稳定的状态。解释导致脂肪酸产生波动的原因？

【答案】在长时间与肾上腺素接触以后，GPCR 对激素产生脱敏。GPCR 在细胞液部分的Ser/Thi•受到PKA （许多GPCR 下游的效应物）和BARK （—种对肾上腺素受体特异性的激酶）的作用，被磷酸化修饰。

随后抑制蛋白与这些磷酸化的位点结合，阻断受体的激活。此外抑制蛋白导致脱敏的受体被内吞，进入细胞内的一种被称为内体的囊泡。于是，产生脂肪酸的细胞因为受体的失活和内在化，导致脂肪酸的产率下降，但进入内体的受体可以去磷酸化，并重新回到质膜上，再次被激活。当受体的脱敏和再激活达到平衡的时候，脂肪酸的释放将达到相对稳定的状态。

10．在体外无细胞复制体系中，如果用

【答案】将添加在RNA 引物的

无法对下一个核苷酸的磷酸亲核进攻。

11．简述乳酸循环形成的原因及其生理意义。

【答案】乳酸循环又称Cori 循环，其形成是由肝脏和肌肉组织中酶的特点所致。

（1）肝内糖异生很活跃，有葡萄糖-6-磷酸酶可水解GIc-6-P 而释出葡萄糖，而肌肉组织中除糖异生的活性很低外，又无葡萄糖-6-磷酸酶，因此肌肉组织内生成的乳酸既不能异生成糖，更不能释放出葡萄糖。

（2）乳酸循环的生理意义在于避免损失乳酸（能源物质）以及防止因乳酸堆积而引起酸中毒。

12．任举一个例子来说明蛋白质三级结构决定于它的氨基酸顺序。

【答案】蛋白质的一级结构决定蛋白质的高级结构这一原则目前基本上仍是正确的，但是是有条件的。例如同样一条肽链，在存在变性剂的条件下是松散的。现在所说的蛋白质的三级结构取决于它的氨基酸序列是指在生理条件下，蛋白质的一级结构和其三级结构之间的特定的对应关系。典型的例子是核糖核酸酶S 的变性与复性试验。核糖核酸酶S 三级结构的形成与维持还有赖于多肽链内4个二硫键的形成。在含有巯基乙醇的8mol/L的尿素溶液中还原二硫键，使核糖核酸

取代ATP ; 对DNA 复制会有什么影响？ 端，导致末端终止，使DNA 复制受阻，因为

酶S 变性失活；然后透析除去尿素和巯基乙醇，在有氧和痕量疏基乙醇的水溶液中，变性核糖核酸酶S 伸展的肽键自动折叠，重建的二硫键配对完全正确，酶活性几乎恢复到原来的水平。这个试验出色的证明了蛋白质的功能取决于特定的天然构象，而规定其构象所需要的信息包含在它的氨基酸序列中。当前有相当多的蛋白质工程的例子可以说明，肽链中某些残基的突变可以引起突变蛋白的构象改变。

13．下图是一个带有单链末端的双链DNA 分子，分别写出用大肠杆菌DNA 聚合酶

理后得到 的延伸产物并简单解释原因。

【答案】大肠杆菌DNA 聚合酶III 处理后的产物为：

端粒酶处理后的产物为：

DNA 聚合酶III 跟大多数其他DNA 聚合酶一样，需要模板和引物，所以从下面一条链的端开始延伸

DNA 链；端粒酶本身由蛋白质和RNA 两种组分组成，其中RNA 部分的一段可以作为模板，因此端粒酶可以在DNA 的凸出末端添加DNA 序列。

14．别嘌呤醇为什么可用于治疗“痛风症”？

【答案】“痛风症”基本的生化特征为高尿酸血症。由于尿酸的溶解度很低，尿酸以钠盐或钾盐的形式沉积于软 组织、软骨及关节等处，形成尿酸结石及关节炎（尿酸盐结晶沉积于关节腔内引起的关节炎为痛风性关节炎）； 尿酸盐也可沉积于肾脏成为肾结石。

治疗“痛风症”的药物别嘌呤酸是次黄嘌呤的类似物，可与次黄嘌呤竞争与黄嘌呤氧化酶的结合，别嘌呤醇 氧化的产物是别黄嘌呤，后者的结构又与黄嘌呤相似，可牢固地与黄嘌呤氧化酶的活性中心结合，从而抑制该酶的活性，使次黄嘌呤转变为尿酸的量减少，使尿酸结石不能形成，以达到治疗之目的。

15．（1）柠檬酸是影响细胞内某些代谢途径的重要信号分子。当肝脏细胞内的柠檬酸水平升高时，它能调节 糖的分解代谢和脂肪酸的生物合成。请你解释柠檬酸水平的升高是怎样调节这些代谢反

14应，进而影响糖转变成脂 肪酸的合成？（2）葡萄糖能为脂肪酸的合成提供碳原子。C 标记葡或端粒酶处

萄糖什么部位的碳才能使新合成的软脂酸的 碳原子全都含有放射性标记？（回答问题时只考虑柠檬酸合成后立即被转运到胞液中这种情况。）

【答案】（1）当肝脏细胞内的柠檬酸水平升高时，表明细胞含有较高的能量水平（同时表明NADH 的水平也是 高的）将糖以三酰甘油的形式储存。于是柠檬酸以及ATP 即可作为糖酵解途径憐酸果糖激酶的别构抑制剂，抑制该酶的活性，

导致葡萄糖

以及甘油醛磷酸进入磷酸戊糖途径，

产生磷酸，后者进入糖酵解生成丙酮酸，丙酮酸进入线粒体氧化生成乙酰CoA ,

后者可用于脂肪酸的合成，进而为脂肪的合成做好准备。柠檬酸是乙酰CoA 羧化酶的激活剂，有