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2017年大连大学分子生物学复试仿真模拟三套题

  摘要

一、名词解释

1. 顺式作用元件

【答案】顺式作用元件是指与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别并结合的特异DNA 序列,包括启动子、上游启动子元件、增强子、沉默子等。

2. Nonsence mutation

【答案】无义突变。无义突变是指由于结构基因中某个碱基的替换,使得原来编码某一氨基酸的密码子突变为终 止密码子UAA 、UGA 、UAG 中的一种,致使肽链的合成提前终止,肽链缩短,产生无活性的多肽片段的突变。

3. 等电聚焦

【答案】

等电聚焦 是指利用蛋白质分子或其他两性分子的等电点的不同,在一个稳定的、连续的、线性pH 梯度中进行蛋白质的分离和分析的技术。

4. polysome

【答案】多核糖体。多核糖体是指蛋白质合成过程中结合在同一条mRNA 上的多个核糖体,能同时合成若干条蛋白质多肽链。

5. 蛋白质印迹法(Western blotting)

【答案】蛋白质印迹法是指将经过凝胶电泳分离的蛋白质转移到膜(如硝酸纤维素膜、尼龙膜等)上,再对转移 膜上的蛋白质进行检测的技术。转移可用电泳法等,检测常用与特定蛋ft 结合的标记抗体或配体,由此可判断特 定蛋白质的存在与否和分子质量大小等。

二、简答题

6. 什么是DNA 的T m 值? 它受哪些因素的影响?

【答案】(1)DNA 的T m 值即DNA 的解链温度,是指DNA 在加热变性过程中,紫外光吸收值达到最大值的50%的温度,或者说是核酸分子内50%的双螺旋结构被破坏时的温度。

(2)影响Tm 值的因素:

①DNA 的均一性

均质DNA 的熔解过程发生在一个较小的温度范围内,异质DNA 熔解过程发生在一个较宽的温度范围内,均一性高,则融解过程爆发的温度范围窄;

②DNA 分子中G-C 碱基对的含量

在pH7.0,0.165mo1/L的NaCl 中,DNA 的Tm 值与G-C 含量之间有正比关系,DNA 分子中

GC 含量高,则Tm 值大,两者的关系可表示为:Tm=69.3+0.41(%G+C)。测定Tm 值可推算DNA 中碱基的百分组成。

③DNA 溶液的离子强度

一般情况,离子强度较低的介质中,DNA 的解链温度较低,而且解链温度范围较宽。而在高离子强度时,DNA 的Tm 值较高,且解链发生在一个较小的温度范围内。

④DNA 溶液的pH 值

溶液的PH 值在5~9范围内,Tm 值变化不明显,当PH>11或PH<4时,Tm 值变化明显。 ⑤DNA 双链本身的长度

一定条件下(相对较短的核酸分子),Tm 值大小还与核酸分子的长度有关。

⑥变性剂

各种变性剂主要是干扰碱基堆积力和氢键的形成而降低Tm 值。Tm 值变化明显。核酸分子越长,Tm 值越大。

7. Watson-Crick 确立DNA 双螺旋模型,其依据有哪些?

【答案】Watson-Crick 确立DNA 双螺旋模型,其依据有:

(1)X 衍射数据:英国伦敦皇家学院的晶体衍射专家威尔金斯(Maurice Wikins)和科学家弗兰克林(Rosalind Franklin )用X 射线衍射法确定晶体内部原子间的排列和距离,结果显示DNA 分子很可能具有螺旋结构,宽度为20埃,这个结果为分析DNA 结构提供了重要的依据和证据。

(2)美国生物化学家查伽夫(Erwin ChargafF )发现,同一生物不同组织的DNA 碱基组成相同,一种生物DNA 碱基组成不随生物体的年龄、营养状态或者环境变化而改变,A 的数目总

C 的数目总是和G 的数目相等,A+G=C+T不同生物来源的DNA 碱基组成不是和T 的数目相等,

同,表现在A+T/G+C比值的不同。

8. 简述可诱导和可阻遏的基因调控方式的区别。

【答案】(1)可诱导调节是指一些基因在特殊的代谢物或化合物的作用下,由原来关闭的状态转变为工作状态,即在某些物质的诱导下使基因活化的机制。

在可诱导的系统中,操纵子只有在诱导物存在时才开放。存在诱导物时,它与阻遏物结合,使之变构不再与操纵子结合,从而开启操纵子。没有诱导物时,阻遏物结合在操纵子上阻止结构基因的转录。酶的诱导是分解途 径所特有的,诱导物就是酶的底物或者底物类似物。

(2)可阻遏调节是指一些基因平时都是开启的,处在产生蛋白质或酶的工作过程中,由于一些特殊代谢物 或化合物的积累而将其关闭,阻遏了基因的表达的机制。

在可阻遏系统中,操纵子被终产物所关闭。存在终产物时,它结合到阻遏物上,改变后者的构象,使其能结合到操纵子上,关闭操纵子。不存在终产物时,阻遏物不能结合到操纵子上,因此操纵子开放。酶的阻遏是合成代谢的特点。

9. 什么是操纵子(operon ) ? 大肠杆菌色氨酸操纵子的组成及调控特征。

【答案】(1)操纵子是指原核生物中由一个或多个相关基因以及转录翻译调控元件组成的基因表达单元。

(2)色氨酸操纵子的组成:

①启动子区(P 区);

②操纵区(0区);

③前导区(L 区);

④弱化子区(a 区);

⑤结构基因:

(3)色氨酸的调控特征:Trp 操纵子通过两套调控系统控制色氨酸生物合成酶,它的产生取决于细胞内色氨酸的浓度。第一个调控系统称为阻遏系统,第二个调控系统称为弱化系统(衰减系统),当丰富和一个茎环式终止结构形成时,衰减作用使得转录提前终止,导致RNA 聚合酶从DNA 上脱落下来。

10.链霉素为什么能够抑制蛋白质的合成?

【答案】链霉素是一种碱性三糖,可以多种方式抑制原核生物核糖体。

(1) 能干扰与核糖体的结合,从而阻止蛋白质合成的正确起始;

(2)也会导致mRNA 的错读。

11.什么是蛋白质组学?什么是转录组学?简述这两个领域里最主要的研究手段。

【答案】(1)蛋白质组学是指在蛋白质组水平上研究蛋白质的特征,包括蛋白质的表达水平、翻译与修饰、蛋白质与蛋白质的相互作用等,由此获得关于疾病发生、发展及细胞代谢等过程整体认识的学科。目前常用的蛋白质组学研究手段有:

①质谱分析技术(MS );

②蛋白质芯片技术。

(2)转录组学是指研究生物细胞中转录组的发生和变化规律的科学。目前用于转录组数的研究方法主要有:

①基于杂交技术的芯片技术,包括CDNA 芯片和寡聚核苷酸芯片;

②基于序列分析的基因表达系列分析SAGE ;

③大规模平行信号测序系统MPSS 。

三、论述题

12.基因克隆中蓝白斑筛选的两个分子生物学原理是什么?

【答案】蓝白斑筛选是根据载体的遗传特征筛选的一种方法。

现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA 的短区段,其中有

的调控序列和前146个氨基酸的编码信息,称为半乳糖苷酶基因(),编码的多肽称为多肽,该多肽没有半乳