2018年山东省医学科学院中西医结合基础306西医综合之生物化学考研基础五套测试题
● 摘要
一、名词解释
1． 等电聚焦电泳。
【答案】等电聚焦电泳（IFE , isoelectric focusing electrophoresis）是指利用一种特殊的缓冲液（两性电解质）
在聚丙烯酰胺凝胶内制造一个pH 梯度的电泳方法，电泳时每种蛋白质迀移到它的等电点（pI ）处，即梯度中的某一pH 时，由于表面静电荷为零而停止泳动。
2． 协同运输。
【答案】协同运输是一类靠间接提供能量完成的主动运输方式。物质跨膜运动所需要的能量来自膜两侧离子浓度梯度。
3． DNA
变性
功能发生降低或消失。
4． 亮氨酸拉链。
【答案】亮氨酸拉链是反式作用因子DNA 结合结构域中的一种基序结构，由约35个氨基酸残基形成的两性卷
曲螺旋形螺旋。疏水侧链位于一侧，解离基团位于另一侧，每两圈螺旋有
螺旋而与DNA 结合起作一个亮氨酸，单体通过疏水侧链二聚化，形成拉链。该结构借助N
端
用，这种结构称为亮氨酸拉链结构。
5． 透析（dialysis ）。
【答案】透析是指利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。
6． 发卡结构。
【答案】发卡结构是指单链RNA 分子在分子内部形成部分双螺旋的结构，这种部分双螺旋的结构类似于发卡。
7． 多酶复合体。
【答案】多酶复合体是指多种酶靠非共价键相互嵌合、催化连续反应的体系。
第 2 页，共 32 页 【答案】DNA 变性是指DNA 双链解链，分离成两条单链的现象，不破坏一级结构，而生物
8．
【答案】是指核酸分子在发生热变性的时候，有一半双螺旋被破坏时候的温度。
二、问答题
9． 假设用对葡萄糖的任意一个或几个碳原子进行标记，当用酵母从葡萄糖发酵生产乙醇时，的放射性最高而乙醇的放射性最低？
和乙醛，后者经乙醇脱氢酶催化转
与）生成乙醇。
欲使
葡萄糖的
）
转变为另外两个碳原子
（采用什么方法标记可使得【答案】根据糖酵解反应过程，
丙酮酸氧化脱竣产生变成乙醇，即丙酮酸羧基碳原子
（的放射性最高而乙醇的放射性最低，
则要葡萄糖的
标记尽可能地转移到丙酮酸
与原子经酵解可代谢为丙酮酸羧基碳原子，因此标记这两个碳原子可达到目的。
10．如何让一个超螺旋的环状病毒DNA 分子处于松弛态? 线形双链DNA 能否形成超螺旋？
【答案】内切核酸酶作用于超螺旋的环状病毒DNA 分子，在其中的一条链上产生“缺刻”（nick ）, 释放张力，则超螺旋转变为松弛态，线形DNA 分子只有当两端都被固定时，才能产生超螺旋。
11．简述反转录酶及其性质，为什么说反转录酶是一种重要的工具酶？
【答案】反转录酶发现自逆病毒（反转录病毒）。这类病毒属正链RNA 病毒，在其生活周期中须经一种自身携 带的酶反转录酶（亦称逆转录酶），把RNA 基因组反转录成DNA 。然后这种病毒的双链DNA 形式整合到寄主 染色体上，经转录形成子代RNA （亦是mRNA ）。反转录酶有三种酶的活性：
（1）以RNA 为模板合成互补DNA 的DNA 聚合酶活性；
（2）以DNA 为模板合成DNA 的DNA 聚合酶活性；
（3）去掉RNA-DNA 杂合双链中RNA 链的RNaseH 活性。
由于大多数真核细胞产生的mRNA 都有多聚腺苷酸尾巴polyA , 这些mRNA 在寡聚胸腺嘧啶核苷酸oligodT 的引导下经反转录酶的作用产生cDNA ; 因此可以做成真核细胞的cDNA 文库。故反转录酶是一种重要的工具酶。
12．用AgN03对在10ml 含有l.Omg/ml蛋白质的纯酶溶液进行全抑制，需用
该酶的最低相对分子质量。
【答案】10ml 酶液中含纯蛋白质
：设该酶最低分子质量为2,
则
所以，
该酶的最低分子质量为
13．有一个lO.Og 的糖原样品，经过甲基化和水解后能产生6mmol 的2，
（1
）出现在分支点上的葡萄糖残基的百分数。
（2）每个支链上葡萄糖残基的平均数。
第 3 页，共 32 页 求 甲基葡萄糖。求：
（3）产生了多少毫摩尔的2, 3, 6-三-0-甲基葡萄糖？
（4）如果此糖原的相对分子质量是
【答案】（1）2
，
甲基葡萄糖即它所含葡萄糖残基数是多少？ 分支点上的葡萄糖。lO.Og
糖原样品中
（2）
因为分支点上葡萄糖残基的百分数为9.72%，也就是说100个葡萄糖残基中有9.72个葡萄糖残基是在分支点上，有一个分支点就有一个支链，所以每个支链上葡萄糖残基的平均数为：100/9.72=10.3。
（3）先分析一下糖原经甲基化和水解后会产生多少种产物。糖原的每一个自由羟基可用硫酸二甲酯甲基化，水解后分支点的葡萄糖产生2, 3-二-0-甲基葡萄糖；非还原末端产生2, 3, 4, 6-四-0-甲基葡萄糖；还原末端转化为1, 2, 3, 6-四-0-甲基葡萄糖，但在糖苷键水解时，
在
基形成2, 3, 6-三-0-甲基葡萄糖。
lO.Og 糖原其葡萄糖残基的总量为
：
其中分支点的葡萄糖产生2, 3-二-0-甲基葡萄糖为6mmol 。此外，因为每n 个分支点残基就有n+1个非还原末端残基，但是像糖原这样高相对分子质量的化合物，在n+1与n 个残基间的差别是毫无意义的。所以可假设分支点的物质的量一非还原末端的物质的量。非还原末端产生2, 3, 4, 6-四-0-甲基葡萄糖亦为6mmol 。2, 3，6-三-0-甲基葡萄糖的物质的量为：61.7-2×6=49.7（mmol ）
14．假如你从某一动物组织提取一份总RNA 样品，可采用一些什么方法检测它的质量（完整性）、纯度和浓度？并说明判断依据。
【答案】通过琼脂糖凝胶电泳结合EB 染色，观察RNA 的三条特征带是否都出现，以此判断样品RNA 的完整性。如果抽提过程中出现RNase 降解或机械损伤，那么RNA 三条带将不完整。可以根据EB 染色的深浅结合A26〇的吸光值综合判断浓度，因为EB 嵌入量和260nm 处的吸光值都与RNA 分子的多少成正比。RNA
制品的纯度通过
比值在, 若比值偏低，则有可能被污染。
15．在体外无细胞复制体系中，如果用
【答案】将添加在RNA
引物的的比值来判断，RNA 纯制品的上的甲基以甲醇形式脱落（其他甲基以稳定的醚存在），这样就形成2, 3, 6-三-0-甲基葡萄糖；相连的葡萄糖残分支分支点上葡萄糖残基的百分数为
点上的葡萄糖残基的质量为162X6=972（mg ）,
出现在取代ATP ; 对DNA 复制会有什么影响？ 端，导致末端终止，使DNA 复制受阻，因为
无法对下一个核苷酸的磷酸亲核进攻。
16．1-软脂酰-2-硬脂酰-3-月桂酰甘油与磷脂酸的混合物在苯中与等体积的水震荡，让两相分开后，问哪种脂质在水相中的浓度高？为什么？
【答案】磷脂酸在水相中的浓度高。因为磷脂酸分子中有极性端和非极性端，是两亲化合物，而且在水中形成稳定的微团。而三酰基甘油分子中没有极性端，不能形成微团。
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