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一、名词解释

1． 核苷酸的补救合成途径。

【答案】核苷酸的补救合成途径是指利用核酸降解或进食等从外界补充的含N 碱基或核苷合成新的核苷酸的途径。

2． 结合蛋白质。

【答案】结合蛋白质是指除含有氨基酸外还含有其他化学成分（如糖、脂肪、核酸、磷酸及色素等），保证蛋白质的正常生物学活性的蛋白质分子。例如：核蛋白、糖蛋白、脂蛋白、金属蛋白、黄素酶、磷蛋白等。

3． 必需氨基酸（essential amino acid）。

【答案】必需氨基酸是人体必需的，但自身无法合成只能依靠食物提供的氨基酸。人类的必需氨基酸有八种：Leu , lie , Val , Met , Ser , Thr , Trp , Phe , Lys 。

4． 糖原分解。

【答案】糖原分解是指糖原分解成葡萄糖或葡萄糖-1-磷酸的过程。

5． 亲和层析。

【答案】亲和层析是指利用蛋白质分子对其配体分子特有的识别和结合能力建立起来的分离纯化技术。把待纯化蛋白质的特异配体共价连接到载体上，将此载体装入层析柱，对蛋白质混合物进行柱层析时，待纯化的蛋白质与 配体特异结合，吸附在层析柱上，而其他的蛋白质不能被吸附，通过洗脱可以除去，最后用含游离配体的溶液或 用改变了 pH 或离子强度的溶液将与配体结合的蛋白质洗脱下来

6． 信号识别颗粒（signal recognition particle）。

【答案】信号识别颗粒是在真核细胞的胞质内存在的一种由小分子RNA （7S rRNA ）和6种不同蛋白质共同组 成的复合物，它能特异地识别和结合信号肽，并与核糖体结合，暂时阻断多肽链的合成，进而与内质网外膜上的 SRP 受体结合，信号肽就可插入内质网进入内腔，被内质网

SRP 与受体解离并进入新 的循环，内膜壁上的信号肽酶水解。而信号肽后继肽段也进入内质网内

腔，并开始继续合成多肽链。SRP 使分泌性蛋白及早进入细胞的膜性 结构，能够正确的折叠、进行必要的后期加工与修饰并顺利分泌出细胞。

7． 锌指结构（zinc finger）。

【答案】锌指结构是指基因表达调节蛋白的结构“模块”，组成与DNA 的结合区；由30个氨基酸组成，其中 含有2个Cys 和2个His 、或4个Cys ，4个氨基酸残基位置在正四面体四个角，锌离子位置相当在中心，锌离子和氨基酸之间形成配位键，使这段肽链成指状，故称锌指。

8． 暗反应（dark reaction）。

【答案】暗反应是光合作用不需要光的反应，实际上是C 固定的反应，由卡尔文循环组成。

二、问答题

9． 假定你决定从一种新的生物Streptococcus bartelium体内纯化核糖核酸酶，你选择盐析作为纯化的第一步，随着你JJnA 硫酸铵到细胞裂解物之中，进行分级分离。如果你添加的盐浓度是0.5mol/L、lmol/L、1.5mol/L、2mol/L、和2.5mol/L，你如何确定你要的蛋白质在哪一级分离沉淀之中？

如果你选择离子交换层析作为纯化核糖核酸酶的第二步，同样需要确定哪一部分含有目标蛋白。你会使用哪一种离子交换树脂? 为什么? 你如何从交换树脂中洗脱下你的目标蛋白？

你将纯化的蛋白质走SDS-PAGE ，在考马斯亮蓝染色以后，你看到一条单一的

种蛋白质是一种核糖体蛋白，于是你决定再进行一次蛋白质染色，这一次你发现了一条

小的条带。这一次染色方法是什么？为什么

会多显示出新的条带，你如何分离这两种蛋白质？

【答案】（1）在纯化蛋白质过程中，首先需要建立一种测定活性的方法。测定核糖核酸酶活性的方法是利用其将RNA 降解成单个核苷酸的活性。使用放射性标记的NTP ，可转录出带放射性标记的RNA 。以此作为核糖核酸酶的底物，将其与含有酶的部分保温，然后用TCA 沉淀，再使用特定的滤膜过滤，通过测定流过滤膜的带有同位素标记的核苷酸的放射性，可测定出纯化物中酶活性的高低。

（2）既然核糖核酸酶的底物是磷酸核糖骨架带负电荷的RNA , 核糖核酸酶本身很可能带正电荷。因此，可考虑阳离子交换树脂来纯化核糖核酸酶。在低盐浓度下上柱，以吸附核糖核酸酶，然后用高盐缓冲液洗脱出核糖核酸酶。

（3）考马斯亮蓝染色的灵敏度仅能检测出含有大约lOOng 的条带，而银染的灵敏度达10ng 。所以使用考马斯亮蓝染色看不到的条带有可能通过银染看到。

为了将的核糖体蛋白与的核糖核酸酶分开，可使用凝胶过滤层析。的核糖核酸酶应该先流出来。

10．通过光合作用把光能贮藏在葡萄糖中，计算光能利用率。

【答案】已知

葡萄糖

大小的大条带。为了确定它是不是核糖核酸酶，你决定将条带切下，然后测序。然而，你吃惊的发现，这

8个光量子。6个氧分子需6×8=48个光量子。形成1个氧分子需4个电子，以植物吸收700nm

光子所具有的能量为：

还原需能量：

光合作用光能利用率为

11．为什么凯氏定氮法只能粗略检测蛋白质含量? 请写出一种不増加设备的情况下就能排除杂氮的影响的方法？

【答案】凯氏定氮的原理是用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气馏出并被过量的酸液吸收，再以标准碱滴定，就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定 （16%）, 可由氮量计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定量方法。该方法是测定化合物或混合物中总氮量 的一种方法，并且受到滴定等因素的影响，所以只能粗略检测蛋白质含量。

排除杂氮影响，可以把待处理样品溶解，溶解后用三氯乙酸沉淀蛋白质，测定沉淀部分可以排除杂氮的影响。

12．称取25mg 蛋白酶配成25ml 溶液，取2ml 溶液测得含蛋白氮0.2mg ，另取0.1ml 溶液测酶活力，结果每小时可以水解酪蛋白产生1500g 酪氨酸，假定1个酶活力单位定义为每分钟产生氨酸的酶量，请计算：

（1）酶溶液的蛋白浓度及比活；

（2）每克纯酶制剂的总蛋白含量及总活力。

【答案】（1）蛋白质浓度_

比活力

（2）总蛋白

13．计算lmol 的九碳饱和一元羧酸在有氧条件下完全氧化可产生多少摩尔

否则不得分）

【答案】九碳饱和一元竣酸完全氧化时需经过活化为软脂酰化后剩下1分子丙酰丙酰

在的催化下生成琥珀酰

和产

生链完成完全氧化过程，产

生

14．在生物膜中脂类的作用是什么？ 消耗然后经过3次氧个

或然后进入三竣酸循环和呼吸_ __ （给出计算依据，酿的数

为

【答案】构成膜的主体；决定了膜的选择透过性；其运动决定膜的流动性；提供稳定膜蛋白