2018年暨南大学第一临床医学院306西医综合之生物化学考研基础五套测试题
● 摘要
一、名词解释
1.
【答案】是米氏常数,是指米氏酶反应速率达到最大值一半的时候底物的浓度,它可以用来反映底物与酶的亲和力。
2. 亲和层析、离子交换层析。
【答案】亲和层析是指利用共价连接有特异配体的层析介质分离蛋白质混合物中能特异结合配体的目的蛋白或其他分子的层析技术。
离子交换层析是指使用带有固定的带电基团的聚合树脂或凝胶层析柱分离离子化合物的层析方法。
3. 复制子(replicon )。
【答案】复制子是指能够独立的从复制起点到复制终点所包含的DNA 序列进行复制的基因组单位。
4. 嘌呤核苷酸的补救途径(salvage purine nucleotide synthesis)。
【答案】嘌呤核苷酸的补救途径是指当从头合成途径受阻时,可以利用体内已有的嘌呤碱或嘌呤核苷合成嘌呤核苷酸,是更经济的合成方式。
5.
易化扩散
【答案】易化扩散又称促进扩散,是指物质从高浓度到低浓度由载体蛋白(即转运蛋白)介导的跨膜扩散,是自然发生的,不需要加入能量,是一种被动转运。
6. 酶的活性中心。
【答案】酶的活性中心酶分子中氨基酸残基的侧链有不同的化学组成,其中一些与酶的活性密切相关的化学基团称做酶的必需基团(essential group )。这些必需基团在一级结构上可能相距很远,但在空间结构上彼此靠近,组 成具有特定空间结构的区域,能和底物特异结合并将底物转化为产物。这一区域称为酶的活性中心(active center) 或活性部位(active site)。
7. 肉毒碱穿梭系统(carnitine shuttle system)
【答案】肉毒碱穿梭系统是指长链脂酰CoA 通过与极性肉碱结合成脂酸一肉碱的形式从胞质中转运到线粒体内的循环穿梭系统,从而使活化的脂酸在线粒体内进一步氧化。
8. 移码突变(frame-shiftmutation )。
【答案】移码突变是指由于碱基的缺失或插入突变导致三联体密码的阅读方式改变,造成蛋白质氨基酸排列顺序发生改变,从而翻译出完全不同的蛋白质的突变。
二、问答题
9. 八肽有AA 组成为Asp 、Ser 、Gly 、Ala 、Met 、Phe 、Lys2。
(1)FDNB 与之反应再酸水解,得DNP-Ala 。
(2)胰凝乳蛋白酶消化后分出一个四肽,其组成为Asp ,Gly ,Lys 和Met , 此四肽与FDNB 反应生产DNP-Gly 。
(3)胰蛋白酶消化八肽后,得到组成为Lys 、Ala 、Ser 及Phe 、Lys 、Gly 的两个三肽及一个二肽,此二肽被处理游离出Asp 。请写出八肽的顺序及推理过程。
中间的肽段序列为
二肽被处理后游【答案】由结果(1)可得知此肽的N 端是Ala ; 由结果(2)可知C
端四肽分别是由结果(3)可知N
端的三肽序列为
离出自由天冬氨酸,
这提示了这二肽的顺序为整的八肽顺序为
:而且没有碱性残基。因此,整个肽链的完
各化学试剂和酶试剂在多肽链上的作用位点如图所示:
图
10.有A 、B 、C 三种不同蛋白质,在pH7进行电泳,结果如图所示。若在pH7用中性盐沉淀这三种蛋白质,哪种蛋白质首先沉淀?哪种次之?哪种最后?
图
【答案】从电泳结果可知pH7时蛋白质C 带的电荷最多,蛋白质B 其次,蛋白质A 最少。pH7用中性盐沉淀时,电荷带得最少的首先沉淀,所以蛋白质A 首先沉淀,其次是蛋白质B ,最后是蛋白质C 。
11.原则上说来肾上腺素的生理效应可以通过将cAMP 加入到靶细胞来模拟。但实际上,cAMP 加入到完整的靶细胞后,仅仅能诱发很小的生理效应。然而当加入cAMP 的衍生物双丁酰cAMP 时,其生理效应十分明显,为什么?
【答案】cAMP 是一种高度极性的小分子,很难通过细胞膜,进入细胞内发挥作用。而它的衍生物双丁酰cAMP 由于引入了疏水的烷基使得它能够轻易的通过细胞膜进入细胞内发挥第二信
使的作用。
12.将核酸完全水解后可以得到哪些组分?DNA 和RNA 的水解产物有什么不同?
【答案】核酸完全水解后可得到碱基、戊糖、磷酸三种组分。DNA 和RNA 的水解产物如戊糖、嘧啶碱基不同:DNA
含脱氧核糖,RNA 含核糖;DNA 的碱基是A 、G 、C 和T , 而RNA 是A 、G 、C 和U 。
13.(1)嘌呤霉素为什么能进入核糖体的A 部位?
(2)嘌呤霉素为什么能中断蛋白质的合成?
(3)为什么说嘌呤霉素的应用证实了核糖体A 部位和P 部位的作用?
【答案】(1
)嘌呤霉素的结构与氨酰
核糖体的A 部位上,
阻止了正常的氨酰
(2)
嘌呤霉素上的上的的结构(尤其是进入到A 部位。 氨基一样,经肽基转移酶的作用,也能与位于P )很相似,能结合到部位的肽基上的竣基形成肽键,形成一种羧基端为嘌呤霉素的肽链。这种肽酰-嘌呤霉素很容易从核糖体上解离下来,从而 中断肽链的合成。
(3)
当
结合部位。
14.在体外进行DNA 复制实验时,如果将大肠杆菌DNA 聚合酶I 与T7 DNA保温20min 以后,加入大量T3 DNA。如果改用大肠杆菌DNA 聚合酶III 取代大肠杆菌DNA 聚合酶I 进行上述实验,则得到的主要是T7 DNA。请解释原因。
【答案】大肠杆菌DNA 聚合酶I 和DNA 聚合酶III 的进行性不同,前者只有后者高达500000 nt。进行性低意味着DNA 聚合酶I 在催化DNA 复制过程中很容易与模板解离,进行性高则意味着DNA 聚合酶III 可以 在模板上连续合成更长的DNA 。使用DNA 聚合酶I 进行实验时,因为它的进行性低,合成一小段DNA 以后, 就与原来的T7 DNA模板解离,在加入大量的T3 DNA以后,DNA 聚合酶I 很难与原来的模板结合,反而更容易与量多的T3 DNA结合,复制T3 DNA,于是被合成的DNA 主要是T3 DNA; 使用DNA 聚合酶III 进行实验时, 因为它的进行性极高,故在有限的时间内,DNA 聚合酶III 几乎不会离开原来的模板T7 DNA,即使加入的T3 DNA 量再多,对原来的T7DNA 复制也没有影响,因此最后合成的DNA 主要是T7DNA 。
15.有一蛋白质,在某组织内含量很低,很难分离提纯,现已知其相对分子质量,并从其他实验室要来该蛋白质的抗体,问用哪些实验方法可以初步证实组织内的确含有该蛋白质?
【答案】先根据这种蛋白质的分子质量,选用一定浓度的聚丙烯酰胺作用分离胶,用SDS-PAGE 分离从该组织中提取到的蛋白质。然后,用蛋白质印迹技术,转移到特定类型的薄膜上,最后用酶联抗体进行检测,观察一种分子质量的蛋白质条带是否呈阳性反应。如果呈阳性反
在A 部位时(在移位之前),嘌呤霉素不能与核糖体结合,
而当结合部位,P
部位是在P 部位时,嘌呤霉素能够与核糖体结合。这就表明A
部位是
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