2017年滨州医学院现代分子生物学复试仿真模拟三套题
● 摘要
一、名词解释
1. polysome
【答案】多核糖体。多核糖体是指蛋白质合成过程中结合在同一条mRNA 上的多个核糖体,能同时合成若干条蛋白质多肽链。
2. Telomerase
【答案】端粒酶。端粒酶是指由蛋白质和RNA 两部分组成的一种反转录酶,其中RNA 作为模板序列,指导合成染色体末端的端粒DNA 的重复序列片段。
3. 移码突变(frameshi Kmutation)
【答案】移码突变是指由于单个碱基或者非三的整倍数的碱基的插入或缺失引起的从突变位点开始整个可读框的改变,从而产生完全不同的一系列氨基酸的突变。
4. 聚合酶链式反应(polymerase chain reaction)
【答案】聚合酶链式反应,简写作PCR , 是指根据天然DNA 的复制机制在体外通过酶促反应有选择地大量扩增 (包括分离)一段目的基因的技术。利用两种寡核苷酸引物分别与特异性DNA 区段的正链和负链末端互补,经过模板DNA 变性,模板DN Α-引物的配对,在DNA 聚合酶作用下发生引物延伸反应,三个反应阶段后生成新的子代DNA 双链,经多次循环后得到大量目标DNA 片。
5. 核酸分子杂交(hybridization )
【答案】核酸分子杂交是指应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA (或RNA )片段,按碱基互 补关系形成杂交双链分子的一项实验技术,杂交双链可以在DNA 与DNA 链之间,也可在RNA 与DNA 链之间 形成。
二、简答题
6. tRNA 是如何转运活化的氨基酸至mRNA 模板上的?
【答案】(1)由于tRNA 的氨基酸臂上存在特定的识别密码可以为氨酰-A 合成酶所识别,在该酶的催化下, 将相应地氨基酸活化,形成氨酰tRNA (起始氨基酸为Met-tRNAf 或fMet-tRNAf )。
(2)氨酰tRNA 结合GTP 的起始因子IF2-GTP (或延伸因子EF-Tu-GTT )结合形成三元复合物。
(3)该氨酰tRNA 上的反密码子通过碱基互补配对的原则识别mRNA 上相应的密码子与起
始复合物的P (A )位点结合(只有第一个活化的氨基酸进入P 位点,链延伸过程中,氨酰tRNA 均进入A 位点),这样就将活化的 氨基酸至mRNA 模板上。
7. 什么是Pribnow box?它的保守序列是什么?
【答案】(1)Pribnow box (TATA box )是原核生物中,转录起始位点上游的一个由5~6个核苷酸组成的共有序列,是RNA 聚合酶中σ因子的结合位点,其中央大约位于起点上游10bp 处,所以又称为-10区。
(2)Pribnow box的保守序列是TATAAT 。
8. 简述双向电泳研究蛋白质组的优缺点。
【答案】(1)优点: ①双向电泳技术,特别是固相pH 梯度等电聚焦为第一向的双向电泳技术是当前分辨率最高,信息 量最大的电泳技术。目前,一次双向电泳最高可达11000个蛋白点的分辨率;
②双向电泳能将组织和细胞中成千上万种蛋白高分辨,高灵敏的分离以满足随后的质谱分析,结合质谱鉴定 技术可査明大型蛋白复合物各组分,与其他生物技术相结合,可以快速准确地发现和鉴定新的蛋白质。
(2)缺点:
①低拷贝蛋白质的鉴定受限;
②极酸或极碱蛋白的分离比较困难; ③分子质量极大或极小蛋白的分离较难;
④难溶蛋白的检测比较困难;
⑤由于蛋白多样性的存在,很难确定一张正常状态的图谱作为病理状态的对照;
⑥重复性仍然不理想;
⑦得到高质量的双向凝胶电泳需要精湛的技术。
9. 有几种终止密码子?它们的序列和别名是什么?
【答案】(1)有三种终止密码子。
(2)它们的序列为UAA 、UGA 和UAG , 别名分别为赭石密码、琥珀密码和蛋白石密码。
10.阐述逆转录转座子与逆转录病毒的异同。
【答案】(1)相同点:都是以RNA 中介反转录为DNA , 将DNA 整合到靶基因姐上,有长末端重复序列(LTR )。
(2)不同点:逆转录转座子在插入位点上形成短的正向重复序列,由于缺乏外壳蛋白基因,不能形成病毒颗粒,不会在细胞间发生转移,其中的非病毒超家族不能编码转座酶;逆转录病毒的转录以tRNA 为引物,DNA 整合到宿主染色体上的位点是随机的。
11.简述真核细胞rRNA 、tRNA 和mRNA 转录使用的聚合酶及各RNA 前体(precursor )加工的基本过程。
【答案】(1)RNA 聚合酶(RNApolymerase )是指催化以DNA 为模板(template 、三磷酸核糖核普为底物、通过磷酸二酯键而聚合的合成RNA 的酶。RNA 聚合酶(RNApolymerase )的作用是转录RNA 。
(2)真核生物的RNA 聚合酶分三类:
①RNA 聚合酶I 存在于核仁中,转录rRNA
②RNA 聚合酶II 存在于核质中,转录mRNA , 需要“TATA ”框。
③RNA 聚合酶III 存在于核质中,转录tRNA ,以及有些重复序列,如Alu 顺序可能也由这种酶转录。
(2) RNA 前体(precursor )加工:
①rRNA 加工的过程
a. 在端切除非编码的序列,生成41S 中间产物;
b.41SRNA 再被切割为两段,一段为32S ,另一段为20S ;
c.32S RNA 进一步被剪切成 28S rRNA 和 5.8S rRNA;
d.20S RNA 被剪切生成 18S rRNA。
②tRNA 的加工过程
a. 内含子的剪接;
b.3' 端添加CCA ;
c. 核苷酸修饰。
③mRNA 的加工过程
a.5' 端形成帽子结构;
b. 在链的3' 端切断并加上多聚腺苷酸(polyA )尾;
c. 通过拼接除去由内含子转录来的序列;
d. 链内部核苷被甲基化。
三、论述题
12.信号转导中第二信使指的是什么?试举两个例子说明第二信使在细胞内的主要作用。
【答案】(1)第二信使是指受体被激活后在细胞内产生的介导信号转导通路的活性物质,它们是信号得以正常地 逐级下传所不可或缺的,如cAMP 、cGMP 、二酰甘油(DG
)、三磷酸肌醇
等均为第二信使。第二信使至少有两个基本特性:
①是第一信使同其膜受体结合后最早在细胞膜内侧或胞浆中出现、仅在细胞内部起作用的信号分子;
②能启动或调节细胞内稍晚出现的反应信号应答。
(2)例子一:cAMP 活化糖原憐酸化。
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