2018年兰州大学基础医学院306西医综合之生物化学考研核心题库
● 摘要
一、名词解释
1. 肽(peptide )。
【答案】肽是氨基酸的线性聚合物,常称肽链(peptidechain )。蛋白质是由一条或多条具有特定氨基酸序列的多肽链构成的大分子。
2. 转录后基因沉默(
【答案】转录后基因沉默(
上通过对靶标进行特异性降解而使基因失活。即双链
动物中则称为
物中一般称为转录后基因沉默
干扰)。 )是指在基因转录后的水平诱导的抑制基因表达的现象。在植
在真菌中的这种现象称为
阻抑。
3. 位点特异性重组(site-specific recombination)。
【答案】位点特异性重组是指发生在DNA 特异性位点上的重组。
4. 硝酸还原作用。
【答案】硝酸还原作用是指硝酸态氮在硝酸还原酶和亚硝酸还原酶催化下还原为氨的过程。
5. 质粒(plasmid )。
【答案】质粒是一种在细菌染色体以外的遗传单元,一般由环形双链DNA 构成,其大小从1 至
6. 调节酶。
【答案】调节酶是指位于一个或多个代谢途径内的一个关键部位的酶,它的活性根据代谢的需要被增加或降低。在多酶体系中某些酶因其本身活性受到严格的调节控制从而对代谢反应起调节作用。
7. 氢键(hydrogen bond)。
【答案】氢键是稳定蛋白质和DNA 二级结构的主要化学键。由电负性强的原子与氢形成的基团如N-H 和O-H 有很大的偶极矩,成键电子云分布偏向负电性大的原子,使正电荷的氢原子在外侧裸露。当带正电荷的氢原子遇到另一个电负性强的原子时,就产生静电引力,而形成氢键:X-H …Y 。
8. 多聚核糖体(polysome )。
【答案】多聚核糖体是指合成蛋白质时,多个甚至几十个核糖体串联附着在一条mRNA 分子上,形成的似念珠状结构。在一个mRNA 分子上同时结合多个核糖体形成的结构,形成多聚核糖体可以提高翻译的效率。
二、问答题
9. 什么是
【答案】编辑?有何意义? 编辑是指在水平上改变遗传信息的过程。具体说来,
指基因转录产生的分子中,由于核苷酸的缺失、插入或置换,基因转录物的序列不与基因编码序列互补,使翻译生成的蛋白质的氨基酸组成,不同于基因序列中的编码信息的现象。生物学意义:
(1)改变和补充遗传信息;
(2)
(3)
(4)
(5)的编排能增加基因产物的多样性; 编辑与生物细胞发育与分化有关,是基因表达调控的一种重要方式; 编辑还可能是基因产物获得新的结构和功能,有利于复杂的生物进化; 编辑很可能与学习、记忆有关。
10.酵母是一种单细胞真核生物,其细胞内某些化合物的浓度可以被人为地改变。预测下列几种物质浓度的变化对糖酵解有何影响?
(1)细胞里缺乏无机磷酸。
(2)无氧的条件下在无锌的培养基中生长。
(3)二羟丙酮磷酸被用去合成脂肪和磷脂。
【答案】(1)甘油醛3-磷酸脱氢酶催化的反应以无机磷酸为底物,缺乏甘油酸-1,3二磷酸将不能形成,糖酵解反应将“止步”于此。于是甘油醛-3-磷酸因为葡萄糖的持续氧化而堆积。在丙糖磷酸异构酶的催化下,甘油醛3-磷酸转变成二羟丙酮磷酸,在醛缩酶的催化下,甘油醛-3-磷酸与二羟丙酮磷酸缩合成果糖-1,6-二磷酸。于是,细胞最终出现甘油醛-3-磷酸、二羟丙酮磷酸和果糖-1,6-二磷酸堆积。
(2)酵母细胞在无氧的条件下通过酒精发酵再生
所以缺乏它将导致酒精发酵受到抑制,
于是酶的活性受到抑制,最终的结果与缺乏是一样的。
(3)二羟丙酮磷酸被其他代谢途径使用,将减少进入糖酵解的甘油醛-3磷酸的量,从而使糖酵解产生
的量减少。 由于锌是乙醇脱氢酶活性所必需的,甘油醛-3-磷酸脱氢不能再生。如果没有
11.假定你决定从一种新的生物Streptococcus bartelium体内纯化核糖核酸酶,你选择盐析作为纯化的第一步,随着你JJnA 硫酸铵到细胞裂解物之中,进行分级分离。如果你添加的盐浓度是0.5mol/L、lmol/L、1.5mol/L、2mol/L、和2.5mol/L,你如何确定你要的蛋白质在哪一级分离沉淀之中?
如果你选择离子交换层析作为纯化核糖核酸酶的第二步,同样需要确定哪一部分含有目标蛋白。你会使用哪一种离子交换树脂? 为什么? 你如何从交换树脂中洗脱下你的目标蛋白?
你将纯化的蛋白质走SDS-PAGE ,在考马斯亮蓝染色以后,你看到一条单一的
种蛋白质是一种核糖体蛋白,于是你决定再进行一次蛋白质染色,这一次你发现了一条
小的条带。这一次染色方法是什么?为什么
会多显示出新的条带,你如何分离这两种蛋白质?
【答案】(1)在纯化蛋白质过程中,首先需要建立一种测定活性的方法。测定核糖核酸酶活性的方法是利用其将RNA 降解成单个核苷酸的活性。使用放射性标记的NTP ,可转录出带放射性标记的RNA 。以此作为核糖核酸酶的底物,将其与含有酶的部分保温,然后用TCA 沉淀,再使用特定的滤膜过滤,通过测定流过滤膜的带有同位素标记的核苷酸的放射性,可测定出纯化物中酶活性的高低。
(2)既然核糖核酸酶的底物是磷酸核糖骨架带负电荷的RNA , 核糖核酸酶本身很可能带正电荷。因此,可考虑阳离子交换树脂来纯化核糖核酸酶。在低盐浓度下上柱,以吸附核糖核酸酶,然后用高盐缓冲液洗脱出核糖核酸酶。
(3)考马斯亮蓝染色的灵敏度仅能检测出含有大约lOOng 的条带,而银染的灵敏度达10ng 。所以使用考马斯亮蓝染色看不到的条带有可能通过银染看到。
为了将的核糖体蛋白与的核糖核酸酶分开,可使用凝胶过滤层析。的核糖核酸酶应该先流出来。
12.利用催化乙酰CoA 和丙二酸单酰CoA 合成软脂酸的纯酶制剂,在反应所需的所有辅因子存在的情况下,进行下列实验。
(1)假如乙酰CoA 以
酸将参入多少个
的形式供给,乙酰CoA 没有标记,问每分子
(2)假如丙二酸单酰软脂酸将参入多少个的形式供给,丙二酸单酰CoA 没有标记,问每分子软脂大小的大条带。为了确定它是不是核糖核酸酶,你决定将条带切下,然后测序。然而,你吃惊的发现,这【答案】(1)乙酰CoA 供给甲基末端的二碳片段,因为末端的甲基碳并不包括在脱水步骤中,这样所有的3H 都被保留,所以每分子软脂酸将参入3个
(2)每个丙二酸的参入将会保留一个所以每分子软脂酸将参入7个 另一个随着二碳单位的加入,在脱水步骤中失去,