2017年大连理工大学化工与环境生命学部(化工)880生物化学及生物化学实验考研导师圈点必考题汇编
● 摘要
一、名词解释
1． 嘧啶核苷酸的从头合成途径（de novo pyridine nucleotide synthesis）。
【答案】嘧啶核苷酸的从头合成途径是以谷氨酰胺、天冬氨酸、
成嘧啶核苷酸，是嘧啶核苷酸合成的主要方式。
2． 重组修复（recombinationrepair ）。
【答案】重组修复是指先复制后修复的损伤修复方式。在损伤位点下游重新启动DNA 合成，在子链DNA 上留 下一段缺口，然后通过同源重组将与子链DNA 序列一致的母链DNA 上的同源片段交换到子链DNA 的缺口处，填补子链缺口，再由DNA 聚合酶和连接酶填补母链上的缺口。重组修复可以克服DNA 损伤对复制的障碍，得到一分子正常的子代DNA 和一分子保留了损伤的子代DNA ，经过多轮复制后损伤DNA 在子代DNA 中所占比 例越来越小。
3． 同功蛋白质。
【答案】同功蛋白质是指不同种属来源的执行同种生物学功能的蛋白质。它们的分子组成基本相同，但有差异。同功蛋白质的氨基酸组成可区分为两部分：一部分是不变的氨基酸顺序，它决定蛋白质的空间结构与功能，各种同功蛋白质的不变氨基酸顺序完全一致; 另一部分是可变的氨基酸顺序，这部分是同功蛋白质的种属差异的体现。
4． 鞘糖脂（glycosphingolipid ）。
【答案】鞘糖脂是指单糖或寡糖的糖链与神经酰胺上的轻基以糖苷键相连而形成的化合物，主要包括脑苷脂和神经节苷脂。
5． 卫星DNA （satdliteDNA ）。
【答案】是指真核细胞染色体DNA 经氯化铯密度梯度离心，其高度重复序列因组成不同而在主带旁自成一条或数条条带
6． 活化能（）。
【答案】（由动力学推导出来的）活化能是指化学反应中，由反应物分子到达活化分子所需的最小能量。
7． 位点特异性重组（site-specific recombination）。
【答案】位点特异性重组是指发生在DNA 特异性位点上的重组。
小分子为原料，从头合
8． ACP 。
【答案】ACP 即酰基载体蛋白，是一种低相对分子质量的蛋白质，组成脂肪酸合成酶复合体的一部分，并且在脂肪酸生物合成时作为酰基的载体，酰基以硫酯的形式结合在4-磷酸泛酰疏基乙胺的巯基上，后者的磷酸基团又与酰基载体蛋白的丝氨酸残基酯化。
9． cAMP
【答案】CAMP
即环化腺苷酸，是细胞内的第二信使，由于某些激素或其他信号分子刺激，激活腺苷酸环化酶催化A TP 环化而形成。
10．铁硫蛋白。
【答案】铁硫蛋白又称铁硫中心，是含铁原子和硫原子的一' 类金属蛋白质。Fe —S 在呼吸链中多与黄素酶或Cytb 结合成复合物存在，其中铁作为单电子传递体可逆地进行氧化还原反应。
二、问答题
11．在脂酸β氧化循环和糖的三羧酸循环中有哪些类似的反应顺序?
【答案】脂酸β一氧化循环的第一步类似于三羧酸循环中琥珀酸转变为延胡索酸，都是脱氢反应。第二步类似于延胡索酸转变为苹果酸，都是加水反应。第三步类似于苹果酸转变为草酰乙酸，都是脱氢反应。脱氢、加水、脱氢是细胞内有机化合物氧化的常见方式之一。
12．三联体密码子共有几个？它们代表几种氨基酸？这些密码在全生物界是否完全统一？
1个氨基酸密码子【答案】三联体密码子共有64个，其中61个密码子代表20种氨基酸，（AUG ）
兼作起始密 码子，3个（UAA ，UAG 和UGA ）为终止密码子，这些密码子在生物界统一，但并非绝对通用，有例外情况。
13．在什么样的条件下，你预期HGPRT （次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶）有缺陷的细胞会影响到嘧啶核苷酸的生物合成？你如何估计动物体或人体内嘧啶核苷酸生物合成的速率？
【答案】HGPRT （次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶）有缺陷的细胞将会发生底物的积累，包括磷酸核糖焦磷 酸（PRPP ）。在PRPP 的水平尚没有饱和乳清酸（orotate ）-磷酸核糖基转移酶时，这将提高嘧啶核苷酸的合成。 计算乳清酸参入到核苷酸库或核酸中的能力可用来测定人体内嘧啶核苷酸从头合成生物合成的速率。
14．假定你决定从一种新的生物Streptococcus bartelium体内纯化核糖核酸酶，你选择盐析作为纯化的第一步，随着你JJnA 硫酸铵到细胞裂解物之中，进行分级分离。如果你添加的盐浓度是0.5mol/L、lmol/L、1.5mol/L、2mol/L、和2.5mol/L，你如何确定你要的蛋白质在哪一级分离沉淀之中？
如果你选择离子交换层析作为纯化核糖核酸酶的第二步，同样需要确定哪一部分含有目标蛋白。你会使用哪一种离子交换树脂? 为什么? 你如何从交换树脂中洗脱下你的目标蛋白？
你将纯化的蛋白质走SDS-PAGE ，在考马斯亮蓝染色以后，你看到一条单一的
种蛋白质是一种核糖体蛋白，于是你决定再进行一次蛋白质染色，这一次你发现了一条小的条带。这一次染色方法是什么？为什么
会多显示出新的条带，你如何分离这两种蛋白质？ 大小的大条带。为了确定它是不是核糖核酸酶，你决定将条带切下，然后测序。然而，你吃惊的发现，这
【答案】（1）在纯化蛋白质过程中，首先需要建立一种测定活性的方法。测定核糖核酸酶活性的方法是利用其将RNA 降解成单个核苷酸的活性。使用放射性标记的NTP ，可转录出带放射性标记的RNA 。以此作为核糖核酸酶的底物，将其与含有酶的部分保温，然后用TCA 沉淀，再使用特定的滤膜过滤，通过测定流过滤膜的带有同位素标记的核苷酸的放射性，可测定出纯化物中酶活性的高低。
（2）既然核糖核酸酶的底物是磷酸核糖骨架带负电荷的RNA , 核糖核酸酶本身很可能带正电荷。因此，可考虑阳离子交换树脂来纯化核糖核酸酶。在低盐浓度下上柱，以吸附核糖核酸酶，然后用高盐缓冲液洗脱出核糖核酸酶。
（3）考马斯亮蓝染色的灵敏度仅能检测出含有大约lOOng 的条带，而银染的灵敏度达10ng 。所以使用考马斯亮蓝染色看不到的条带有可能通过银染看到。
为了将的核糖体蛋白与的核糖核酸酶分开，可使用凝胶过滤层析。的核糖核酸酶应该先流出来。
15．一种茶碱的类似物aminophyline 经常被用来与肾上腺素一起治疗急性哮喘，试分析其中的生化机理。
【答案】茶碱的类似物aminophyline 经常被用来与肾上腺素一起治疗急性哮喘，是因为它与茶碱一样，能够抑制专门水解cAMP 的磷酸二酯酶的活性。cAMP 作为肾上腺素的第二信使，当它的水解受到抑制的时候，它的作用时间就延长了。因此aminophyline 与肾上腺素混合使用无疑会延长或增强肾上腺素的作用。
16．以不同浓度的丙酮酸为底物，测定乳酸脱氢酶酶促反应速度得到以下一些数据（见表）:
表
（1）计算乳酸脱氢酶在该反应条件下的
（2）当丙酮酸浓度为
（3）当丙酮酸浓度为
【答案】⑴值。 时，反应速度V 是多少？ 时，如果酶浓度加倍时，V 会是多大？