2018年广东药科大学药学院706药学综合二之现代分子生物学考研强化五套模拟题
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一、名词解释
1． 拓扑异构酶（topoisomerase ）
【答案】拓扑异构酶是指能在闭环DNA 分子中改变两条链的环绕次数的酶，其作用机制是先切断DNA ，让DNA 绕过断裂点以后再封闭形成双螺旋或超螺旋DNA 。
2． 转录单位（transcription unit）
【答案】转录单位是指从转录起始位点到转录终正位点所对应的、作为RNA 聚合酶模板的基因序列范围，可以是单一基因，也可以是多个基因。一个转录单位就是从启动子到终止子的一段序列，是一段以一条单链RNA 分子为表达产物的DNA 片段，这是转录单位的重要特征。
3． 断裂基因
【答案】断裂基因是指在真核生物结构基因中，编码某一个蛋白质不同区域的各个外显子并不连续排列在一起， 而常常被长度不等的内含子所隔离，形成镶嵌排列的断裂方式。所以，真核基因常被称为断裂基因。
4． 聚合酶链式反应（polymerase chain reaction）
【答案】聚合酶链式反应，简写作PCR , 是指根据天然DNA 的复制机制在体外通过酶促反应有选择地大量扩增 （包括分离）一段目的基因的技术。利用两种寡核苷酸引物分别与特异性DNA 区段的正链和负链末端互补，经过模板DNA 变性，模板DN Α-引物的配对，在DNA 聚合酶作用下发生引物延伸反应，三个反应阶段后生成新的子代DNA 双链，经多次循环后得到大量目标DNA 片。
二、简答题
5． 为什么真核生物中转录与翻译无法偶联？
【答案】真核生物mRNA 是在细胞核内合成的，而翻译是在细胞质中进行的，因此，mRNA 只有被运送到细胞质部分，才能翻译生成蛋白质。真核生物的mRNA 开始合成时，是不成熟的hnRNA , 需要通过一系列加工过程以后才能成为成熟的mRNA 。这些过程包括内含子的剪接、端加帽子结构、
联。
端加尾等。由于RNA 转录后需要一系列的加工过程，因此，转录与翻译无法偶
6． 简述原核生物与真核生物mRNA 的主要差别。
【答案】（1）真核生物5’一端有帽子结构，大部分成熟的mRNA 还同时具有3’一多聚A 尾巴，原核一般没有;
（2）原核的mRNA 可以编码几个多肤，真核只能编码一个，原核生物以多顺反子的形式存在，真核以单顺反子形式存在;
（3）原核生物以AUG 作为起始密码，有时以GUG ，UUG 作为起始密码，真核几乎永远以AUG 作为起始密码;
（4）原核生物mRNA 半衰期短，真核生物的mRNA 半衰期长。
7． 简述叶绿体蛋白质的跨膜运转机制。
【答案】叶绿体定位信号肽一般有两部分：第一部分决定该蛋白质能否进人叶绿体基质，第二部分决定该蛋白质能否进人类囊体。叶绿体蛋白质的跨膜运转机制：
（1）胞质中游离核糖体上合成的叶绿体多肽。
（2）叶绿体多肽在脱离核糖体后折叠成具有三级结构的蛋白质分子。
（3）多肽上某些特定位点结合于只有叶绿体膜上才有的特异受体位点，产生跨膜通道，进入叶绿体基质。
（4）在位于叶绿体基质内的可溶性活性蛋白水解酶的作用下，叶绿体多肽的第一部分跨膜信号肽切除，并 在第二部分信号肽的引导下，跨过类囊体膜，进入类囊体。
（5）切除第二部分信号肽，成为成熟的叶绿体蛋白质。
8． 转座子与逆转座子转座机制的区别。
【答案】（1）转座子介导的转座是一段DNA 序列从原位上单独复制或断裂下来，环化后插入另一位点，并对其后的基因起调控作用。转座子的转座由转座酶催化; 转座的结果是原位不存在该转座子，转座不会增加其拷贝数。
（2）逆转座子介导的转座是以RNA 为中介，通过DN Α-RN Α-DNA 的方式进行，将在基因组内存在着通过DNA 转录为RNA 后，再经逆转录成为的cDNA 并插入到基因组的新位点上的因子。逆转座子的增殖以RNA 为中介，通过DN Α-RN Α-DNA 的方式选行，涉及反转录过程逆转座
过程的关键酶是反转录酶和整合酶; 转座的结果是原位点仍保留有转座子，转座会增加其拷贝数。
9． 链霉素为什么能够抑制蛋白质的合成？
【答案】链霉素是一种碱性三糖，可以多种方式抑制原核生物核糖体。
（1） 能干扰与核糖体的结合，从而阻止蛋白质合成的正确起始；
（2）也会导致mRNA 的错读。
10．真核mRNA 有哪些转录后修饰事件？详细叙述大部分真核mRNA 3'端的修饰过程。
【答案】（1）真核mRNA 转录后修饰事件有：
①5' 端形成特殊的帽子结构；
②在链的Y 端切断并加上多聚腺苷酸poly （A ）尾巴；
③通过拼接去除内含子转录而来的序列；
④链内部核苷被甲基化；
⑤发生RNA 编辑和再编码。
（2）大部分真核mRNA 31端的修饰过程：首先由核酸内切酶切开mRNA 3'端的特定部位，然后由poly （A ） 合成酶催化多聚腺哲酸反应，加入poly （A ）尾巴。加poly （A ）位点上游10~35个核苷酸处有AAUAAA 序列，下 游约50核苷酸处有富含GU 序列，这两处序列是剪切和加poly （A ）所需的信号。首先由剪切和聚腺苷化特异因 子（CPSF ）结合到上游富含AAUAAA 序列，剪除刺激因子（CSF ）与下游富含GU 序列作用，剪除因子（CF ） I 、II 相继与之结合，使其更趋稳定。在剪除之前，poly （A ）聚合酶结合到复合物上，使剪切后游离的能迅速 腺苷酸化。
11．简述RNA 的种类及其生物学功能。
【答案】生物体内主要有3种RNA
（1）信使RNA （mRNA ）
mRNA 的功能是作为蛋白质翻译的模板，编码特定的蛋白质序列。也就是将DNA 上的遗传信息精确尤误地传录下来，以其上的碱基川如宇决定蛋白质的氨基酸顺序，完成基因表过程中的遗传信包传递过程。
（2）转运RNA （tRNA ）
tRNA 能特异性解读mRNA 中的遗传信总，并将相应的氨基酸依次准确地搬运到核糖体上，连结起来形成多胧链
（3）核糖体RNA （rRNA ）
rRNA 是组成核糖体的主要成分，而核糖体为蛋白质的合成提供场所。
12．如果一个基因与肿瘤的发生有关，如果设计实验以判断该基因是癌基因还是肿瘤抑制基因？
【答案】（1）检测该基因所表达蛋白在肿瘤组织中和正常细胞中的表达量。如果和正常组织相比，在癌细胞中该蛋白表达量很低甚至没有，该基因很可能是肿瘤抑制基因；如果先比之下癌组织中该蛋白高表达，则该基因是癌基因。
（2）进一步实验：敲除该基因在正常细胞系中的表达或抑制该基因表达，观察细胞转化的效果，与肿瘤组织进行比较分析。如果该基因被抑制以后，细胞分裂性增强，可初步确定该基因为肿瘤抑制基因；若减弱分裂则确定是癌基因。
三、论述题
13．试述PCR 扩增的原理和过程。
【答案】PCR 技术是一种在体外快速扩增特定基因或DNA 序列的方法。
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