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一、名词解释

1．

【答案】即荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization ），是指一种利用非放射性的劳光信号对原位杂交样本进行检测的技术。它将荧光信号的高灵敏度、安全性，荧光信号的直观性和原位杂交的高准确性结合

起来，通过荧光标记的DNA 探针与待测样本的DNA 进行原位杂交，在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数，从而对染色体或基因异常的细胞、组织样本进行检测和诊断，为各种基因相关疾病的分型、预前和预后提供准确的依据。

2． 重组修复

【答案】重组修复是指遗传信息有缺损的子代DNA 分子从同源DNA 的母链上将相应的核苷酸序列移至缺口处，再合成新的序列来填补母链的空缺的修复过程，因为发生在DNA 复制之后，又称复制后修复。

3． Attenuator

【答案】弱化子。弱化子是指当操纵子被阻遏时，RNA 合成终止，起终止转录信号作用的核苷酸序列。弱化子 对于基因活性的影响是通过影响前导序列mRNA 的结构而发挥作用的，其调节作用的是某种对应氨酰-tRNA 的浓度，典型例子是细菌中的色氨酸操纵子。

4． Blue-white screening

【答案】蓝白斑筛选。蓝白斑筛选是指基于半乳糖苷酶系统的一种重组子筛选方法。其基本原理是很多载体都

携带一段来自大肠杆菌的

序列的宿主细胞。宿主经上述质粒转化后，

整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补

活性蛋白质。由

互补而产生的操纵子DNA 区段，

其中有半乳糖苷酶基因的调控序列和前146个氨基酸的编码信息，这种载体适用于可编码半乳糖苷酶C 端部分 基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完，产生完整 细菌在诱导剂的作用下，在生色底物存在时产生易于识别的蓝色菌落。而当外源DNA 插入到质粒的多克隆位点后，几乎不可避免地导致无互补能力的氨基端片段，使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。

二、简答题

5． 简述代谢物对基因表达调控的两种方式。

【答案】基因表达调控由调控机制的不同而分为正调控和负调控。

（1）在正调控系统中，调节基因的产物是激活蛋白，起着激活结构基因转录的作用。

根据作用效果不同，正调控系统分为：

①正控诱导：效应物（诱导物）存在时，激活蛋白处于活性状态，结构基因转录；

②正控阻遏：效应物存在时，激活蛋白处于无活性状态，结构基因不转录。

（2）在负转录调控系统中，调节基因的产物是阻遏蛋白，其作用部位是操作区，起着阻止结构基因转录的作用。根据作用效果不同，负调控系统分为：

①负控诱导：阻遏蛋白不与效应物（诱导物）结合时，结构基因不转录；

②负控阻遏：阻遏蛋白与效应物结合时，结构基因不转录。

6． 请你谈一谈对“RNA 世界”假说的认识。

【答案】“RNA世界”假说是由美国哈夫大学学者W. Gilbert （吉尔伯特）1986年提出的。该假说认为RNA 可能是生命起源中最初初相生命大分子，初期的自我复制系统可能由RNA 单独构成。在40亿年前的太古代，地球上某些地方已经诞生了 RNA 自我复制系统一一 “RNA世界”，之后RNA 不但能与无机物合成，而且能与原始 地球上出现的蛋白质互相作用，迎来它们的共生

RNA 时代一 “RNA—蛋白质世界”，逐渐形成原始生命。接着以RAN 为模板合成DNA 和蛋白质，

又将大多数催化功能交给具有更高活性的蛋白质，将遗传物质传递功能交给了在化学性上更稳定的DNA 。

7． 细胞通过哪几种修复系统对DNA 损伤进行修复?

【答案】细胞可以通过错配修复、重组修复、切除修复、直接修复和SOS 反应等修复系统对DNA 损伤进行修复。

（1）错配修复

①当复制叉通过复制起始点，母链DNA 就被甲基化。

②一旦在DNA 复制过程中发生错配，细胞能够通过准确的错配修复系统将其识别，并加以校正。

DNA 子链中的错配几乎完全能被修正，充分反映了母链序列的重要性。

（2）切除修复

①碱基切除修复

a. 不同类型的糖苷水解酶特异性识别并切除受损核苷酸上的N-β糖苷键，在DNA 链上形成AP 位点;

b.AP 核酸内切酶把受损核苷酸的糖苷—磷酸键切开，并移去包括AP 位点核苷酸在内的小片段DNA ;

c. 再由DNA 聚合酶I 合成新的片段，DNA 连接酶连成新的被修复的DNA 链。

②核苷酸切除修复

a. 首先DNA 切割酶在己损伤的核苷酸5' 和3' 位分别切开磷酸糖苷键，产生一个核苷酸小片段; b. 移去小片段后由DNA 聚合酶I （原核）或

成修复。

（3）重组修复

重组修复又被称为“复制后修复”，发生在复制之后。

①机体细胞对在复制起始时尚未修复的DNA 损伤部位可以先跳过该损伤部位完成全部链复制后再进行修复。

②先从同源DNA 母链上将相应核苷酸序列片段移至子链缺口。

③再用新合成的序列补上母链空缺。

（4）DNA 的直接修复

直接修复是把损伤的碱基回复到原来状态的一种修复，最普遍的是利用光进行修复。

（5）SOS 反应

SOS 反应是细胞DNA 受到损伤或复制系统受到抑制的紧急情况下，细胞为求生存而产生的一种应急措施。SOS 反应包括

①诱导DNA 损伤修复;

②诱变效应;

③细胞分裂的抑制;

④溶原性细菌释放噬菌体等。

8． 试述结合各种基因组学方法和已有数据还能进一步探索哪些生物学问题。

【答案】（1）以全基因组测序为目标的结构基因组学和以基因功能鉴定为目标的功能基因组学，有助于人们在基因组学、蛋白质组学、分子细胞生物学以及生物体水平上探宄生命现象，对疾病机理的阐明以及疾病的防治有重要应用意义。

（2）根据同源性方法将人类基因组与模式生物基因组进行比较，有助于分析人类基因的功能，也有助于区别人类和其他生物的本质差异，进而探索遗传的奥秘。

9． 简述σ因子的作用。

【答案】σ因子作为所有RNA 聚合酶的辅助因子起作用，主要负责模板链的选择和转录的起始，它是酶的别构效应物，使酶专一性识别模板链上的启动子，可以极大地提高RNA 聚合酶对启

动子区DNA 序列的亲和力，还能极大地降低RNA 聚合酶与模板DNA 上非特异性位点的亲和力。

10．增强子的作用有哪些?

【答案】（1）增强效应十分明显。

（2）增强效应与位置和取向无关。

（3）大多为重复序列。

（4）增强效应一般具有组织或细胞特异性。

（真核）合成新的片段，并由DNA 连接酶完