2017年天津大学生命科学学院905细胞生物学基础之现代分子生物学考研仿真模拟题
● 摘要
一、名词解释
1． 感受态细胞（competent cell）
【答案】感受态细胞是指受体细胞经过一些特殊方法（如CaCL 等化学试剂）的处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许外源DNA 的载体分子通过的细胞。
2． Edman 降解（Edman degradation）
【答案】Edman 降解是指由P. Edman于1950年首先提出来的，最初用于N 端氨基酸残基分析，现在用于肽端 氨基酸序列测定的实验技术，
其原理是异硫氰酸苯酯能与多肽或蛋白质的游离一末端氨基的反应，切下与之反应的那个氨基酸残基，这样蛋白质或多肽链就减少了一个残基，而且在它的N 端又暴露出一个新的游 离的α-末端氨基，又可参加第二轮反应，如此重复，就可以测出n 个残基的顺序。
3． 无义突变（nonsensemutation ）
【答案】无义突变是指在DNA 序列中任何导致氨基酸的三联体密码子转变为终止密码子（UAG 、UGA 、U 从）的突变，它使蛋白质合成提前终止，合成无功能的或无意义的多肽。
4． Intein
【答案】内含肽。内含肽是指存在于某些蛋白质前体肽链内部的一些肽段在转变为成熟蛋白质时，通过非酶促的转肽反应被切除，与其对应的是保留于成熟蛋白质中的外显肽。这些肽段具有核酸酶活性。
5． polysome
【答案】多核糖体。多核糖体是指蛋白质合成过程中结合在同一条mRNA 上的多个核糖体，能同时合成若干条蛋白质多肽链。
6． Nonsence mutation
【答案】无义突变。无义突变是指由于结构基因中某个碱基的替换，使得原来编码某一氨基酸的密码子突变为终 止密码子UAA 、UGA 、UAG 中的一种，致使肽链的合成提前终止，肽链缩短，产生无活性的多肽片段的突变。
7． 内含子（intron ）与外显子（exon ）
，只转录，在【答案】内含子（intron ）是指真核基因中的非编码序列，又称插入序列（IVS ）
前体mRNA 加工时被剪切掉;
外显子（exon ）是指真核基因中的编码序列，是一个基因表达为多肤链的部分。
8． 双向电泳
【答案】双向电泳是指将样品进行电泳后，在它的直角方向再进行一次电泳，为了不同的目的而采用不同的组合 方式的分离方法，目前双向电泳大多是指第一向为等电聚焦，平衡后，第二向为SDS 电泳。
9． 基因超家族
【答案】基因超家族是指一组由于序列的同源性通过序列比对可以彼此匹配而相关的基因。判定同源的主要标准是核苷酸残基的保守性，并参考功能的相似性。
10．阻遏蛋白
【答案】阻遏蛋白是指一类在转录水平对基因表达产生负控作用的蛋白质，在一定条件下与DNA 结合，一般具有诱导和阻遏两种类型。
二、简答题
11．什么是信号肽？它在序列组成上有哪些特点？有什么功能？
【答案】（1）信号肽是指存在于蛋白多肽链上的在起始密码子之后能启动蛋白质运转的一段多肽序列。该序列常 常位于蛋白质的氨基末端，长度一般在13〜36个残基之间。
（2）信号肽在序列组成上的特点有：
①一般带有10〜15个疏水氨基酸；
②常常在靠近该序列N-端疏水氨基酸区上游带有1个或数个带正电荷的氨基酸；
③在其C-末端靠近蛋白酶切割位点处常常带有数个极性氨基酸，离切割位点最近的那个氨基酸往往带有很短的侧链（丙氨酸或甘氨酸）。
（3）信号肽的功能
根据信号肽假说，当分泌蛋白的翻译进行到50-70个氨基酸残基之后，信号肽开始从核糖体的大亚基露出， 被糙面内质网膜上的受体识别，并与之相结合。信号肽过膜后被内质网腔的信号肽酶水解，正在合成的新生肽随 之通过蛋白孔道穿越疏水的双层磷脂。一旦核糖体移到mRNA 的终止密码子，蛋白质合成即告完成，翻译体系 解散，膜上的蛋白孔道消失，核糖体重新处于自由状态。
因此信号肽的功能是负责把蛋白质引导到细胞内不同膜结构的亚细胞器内。
12．Watson-Crick 确立DNA 双螺旋模型，其依据有哪些?
【答案】Watson-Crick 确立DNA 双螺旋模型，其依据有:
（1）X 衍射数据:英国伦敦皇家学院的晶体衍射专家威尔金斯（Maurice Wikins）和科学家弗兰克林（Rosalind Franklin ）用X 射线衍射法确定晶体内部原子间的排列和距离，结果显示DNA 分子很可能具有螺旋结构，宽度为20埃，这个结果为分析DNA 结构提供了重要的依据和证据。
（2）美国生物化学家查伽夫（Erwin ChargafF ）发现，同一生物不同组织的DNA 碱基组成相同，一种生物DNA 碱基组成不随生物体的年龄、营养状态或者环境变化而改变，A 的数目总
C 的数目总是和G 的数目相等，A+G=C+T不同生物来源的DNA 碱基组成不是和T 的数目相等，
同，表现在A+T/G+C比值的不同。
13．解释下列非编码RNA （non-codingRNA ）名词:
（1）核仁小RNA （small nucleolar RNA, snoRNA ）;
（2）干扰小RNA （small interfering RNA, siRNA ）;
（3）微RNA （microRNA , miRNA ）
【答案】非编码RNA 是指不被翻译成蛋白质的RNA ，如tRNA , rRNA.snoRNA , siRNA , siRNA 等，这些RNA 不被翻译成蛋白质，但是参与蛋白质翻译过程。
（1）snoRNA 是一个与特性化的非编码RNA 相关的大家族，由内含子编码，已证明有多种功能:
①反义snoRNA 指导rRNA 核糖甲基化;
②snoRNA 与其它RNA 的处理和修饰有关，如核糖体和剪接体核小RNA , gRNA 等。
siRNA 是由Dicer （2）（RNAase III家族中对双链RNA 具有特异性的酶）加工而成，是siRISC 的主要成员，激发与之互补的目标mRNA 的沉默。siRNA 有如下特点:
①长度约在22nt 左右，是双链RNA ，依赖Dicer 酶的加工，是Dicer 的产物，所以具有Dicer 产物的特点;
②生成需要Argonaute 家族蛋白存在; 是RISC 组分;
③siRNA 合成是由双链的RNA 或RNA 前体形成的;
④siRNA 一般是人工体外合成的，通过转染进入人体内，是RNA 干涉的中间产物;
⑤植物体内也存在内源的siRNA ;
⑥在作用位置上，siRNA 可作用于mRNA 的任何部位，并与mRNA 完全互补;
⑦在作用方式上，siRNA 只能导致靶标基因的降解，即为转录水平后调控;
⑧siRNA 不参与生物生长，是RNAi 的产物，原始作用是抑制转座子活性和病毒感染。 （3）miRNA 是含有茎环结构的miRNA 前体，经过Dicer 加工之后的一类非编码的小RNA 分子。因之具有破坏目标特异性基因的转录产物或者诱导翻译抑制的功能, miRNA 被认为在调控发育过程中有重要作用。miRNA 的特点:
①广泛存在于真核生物中，是一组不编码蛋白质的短序列RNA ，它本身不具有开放阅读框架（ORF ）;
②通常的长度为20~24nt，但在3' 端可以有1~2个碱基的长度变化;
3' 端为轻基，③成熟的miRNA5' 端有一磷酸基团，这一特点使它与大多数寡核苷酸和功能RNA
的降解片段区别开来;
④多数miRNA 还具有高度保守性、时序性和组织特异性。