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一、名词解释

1． 拓扑异构酶（topoisomerase ）

【答案】拓扑异构酶是指能在闭环DNA 分子中改变两条链的环绕次数的酶，其作用机制是先切断DNA ，让DNA 绕过断裂点以后再封闭形成双螺旋或超螺旋DNA 。

2． Intein

【答案】内含肽。内含肽是指存在于某些蛋白质前体肽链内部的一些肽段在转变为成熟蛋白质时，通过非酶促的转肽反应被切除，与其对应的是保留于成熟蛋白质中的外显肽。这些肽段具有核酸酶活性。

3． SDS 电泳（SDS-PAGE ）

【答案】SDS 电泳（SDS-PAGE ）是指根据SDS 和还原试剂将蛋白质分子解聚后亚基的大小，在恒定pH （碱性） 缓冲系统中分离的方法，主要用于测定蛋白质亚基分子质量。

4． Transcriptome

【答案】转录组。转录组是指一个活细胞所能转录出的所有niRNA ，即基因组DNA 转录的基因总和。研究转录组的一个重要方法是利用DNA 芯片技术检测机体中基因组的表达。

5．

【答案】核开关。核开关是指一类通过结合小分子代谢物调控基因表达的mRNA 元件，它位于特定的mRNA 区域，可以不依赖于任何蛋白质因子而直接结合小分子代谢物，继而发生构象重排，影响mRNA 活性。

6． 移码突变（frameshi Kmutation）

【答案】移码突变是指由于单个碱基或者非三的整倍数的碱基的插入或缺失引起的从突变位点开始整个可读框的改变，从而产生完全不同的一系列氨基酸的突变。

7． 蛋白质组（proteome ）

【答案】蛋白质组是指一种生物或一个细胞、组织所表达的全套蛋ft 质（protein ）, 即包括一种细胞乃至一种生 物所表达的全部蛋白质。

8． 核酶（ribozyme ）

【答案】核酶也称核糖酶、核酸类酶、酶RNA 、类酶RNA , 是指具有催化功能的RNA 分子，通过催化靶位点RNA 链中磷酸二酯键的断裂，特异性地剪切底物RNA 分子，从而阻断基因的表达。

9． MissenseMutation

【答案】错义突变。错义突变是指DNA 分子中碱基对的取代，使得mRNA 的某一密码子发生变化，由它所编码的氨基酸基变成另一种的氨基酸，使得多肽链中的氨基酸序列也相应的发生改变的突变。

10．编码链（coding strand）

【答案】编码链是指DNA 双链中含编码蛋白质序列的那条链，与模板链互补，也称有义链（sensestrand ）或正链。其序列与信使核糖核酸相同，只是信使核糖核酸中的U （尿嘧啶）组成与编码链中的T （胸腺嘧啶）组成相区别。

二、简答题

11．说出免疫共沉淀实验的原理与过程，比较酵母双杂交技术和免疫共沉淀技术在研究蛋

白质相互作用方面的优缺点。 【答案】（1）免疫共沉淀

①优点

a. 参与相互作用蛋白是天然状态；

b. 蛋白的相互作用是在自然状态下进行的；

c. 分离得到的蛋白复合物是天然状态的。

②缺点

a. 灵敏度不高，检测不到低亲和力和瞬时的蛋白质-蛋白质相互作用；

b. 相互作用的蛋白质需要第三者来连接；

c. 方法存在冒险性，必须根据实验预测结果选择检测抗体，若预测不正确，实验就得不到结果。

（2）酵母双杂交系统

①优点

a. 不用纯化蛋白质等繁琐步骤；

b. 结果真实性高，其在活细胞中进行；

c. 检测灵敏度高，可检测存在于蛋白质之间的微弱的和瞬时作用；

d. 可分析不同部位、不同细胞蛋白，可采用不同组织、器官、细胞类型和分化时期材料构建cDNA 文库来进行分析。

②缺点

a. 其蛋白间的相互作用定位于细胞核内，而许多蛋白间的相互作用依赖于翻译后加工如糖基化、二硫键形成等不能在核内无法进行；

b. 某些辅助蛋白限制了某些细胞外蛋白和细胞膜受体蛋白等的研究；

c. 存在着“假阳性”。

12．生物体存在大量的mRNA 前体的选择性剪切过程。什么是选择性剪接，有几种方式?

【答案】（1）选择性剪接是指在mRNA 前体的剪接过程中，参加剪接的外显子可以不按其线性次序剪接，内含子也可以不被切除而保留，即一个外显子或内含子是否出现在成熟mRNA 中是可以选择的一种剪接方式。此外，不同的启动子或不同的poly A加尾位点的选择，也可看作选择性剪接。

（2）选择性剪接的方式主要有4种:

①拼接产物缺失一个或几个外显子;

②拼接产物保留一个或几个内含子作为外显子的编码序列;

③外显子中存在5' 拼接点或3' 拼接点，从而部分缺失该外显子;

④内含子中存在5' 拼接点或3' 拼接点，从而使部分内含子变为编码序列。

13．哪些种类抗生素只能特异性地作用于原核生物核糖体？哪些只作用于真核生物核糖体？哪些既能抑制原 核生物核糖体，也能抑制真核生物核糖体？

【答案】抗生素对蛋白质合成的抑制作用可能是阻止mRNA 与核糖体的结合，或阻止A Α-tRNA 与核糖体结合, 或干扰A Α-tRNA 与核糖体结合而产生错读等。但不同的抗生素作用的对象并不完全相同：

（1）只能特异性地作用于原核生物核糖体的抗生素

卡那霉素、青霉素、四环素、氯霉素、和红霉素只与原核细胞核糖体发生作用，从而阻遏原核生物蛋白质的合成，抑制细菌生长；

（2）只能特异性地作用于真核生物核糖体的抗生素

放线菌酮核白喉毒素只作用于真核生物核糖体；

（3）既能抑制原核生物核糖体，也能抑制真核生物核糖体的抗生素

潮霉素、链霉素、蓖麻霉素和嘌呤霉素既能与原核细胞核糖体结合，又能与真核生物核糖体结合，妨碍细胞 内蛋白质合成，影响细胞生长。

表 不同抗生素的靶标以及所产生的后果