● 摘要
本实验基于声动力学疗法对肿瘤细胞的增殖活性存在两种抑制作用模式（直接杀伤和诱导凋亡）的研究基础之上，采用频率为1.34MHz，强度为3W/cm2高频聚焦超声激活血卟啉处理S180腹水型肿瘤细胞，在处理后的不同时间段取材，并通过免疫细胞化学等方法检测在超声激活血卟啉的杀伤和诱导凋亡的协同作用下，与肿瘤细胞增殖活性、凋亡调节、基因复制能力、转录活性、蛋白质合成等密切相关的几种核内蛋白质和关键酶的表达随取材时间的动态变化，利用专业图像分析软件和统计学软件对它们表达的变化进行分析处理，得到差异显著性分析结果并给予生物学意义上的合理解释。不同的检测指标的变化也间接的反映了声动力学疗法对肿瘤细胞核内基因表达活动的影响。总之，本实验研究进一步为声动学疗法抑癌机制的阐明，积累科学的数据和有益的资料。通过实验得到如下结果：
1.分子生物学研究表明，核仁组成区嗜银蛋白是与具有转录活性rRNA基因相结合的一类高度磷酸
化的酸性非组蛋白，该蛋白表达量的强弱和形态学的变化可以间接反映细胞内rDNA转录活性的
水平、以及核仁组成区结构和功能的变化。实验结果表明：SDT疗法对嗜银蛋白表达有明显的
抑制作用，使肿瘤细胞的增殖活性受到显著的抑制。
2.增殖细胞核抗原(PCNA) 是DNA聚合酶δ的辅助蛋白,是真核生物细胞DNA合成所必需的核蛋白,其
合成和表达与细胞的增殖状态有关。此外，该蛋白还在DNA修复过程中起到重要的作用。实验
结果表明，SDT疗法对肿瘤细胞的增殖细胞核抗原表达的具有显著抑制作用，可直接影响到肿
瘤细胞核内DNA的合成、复制、修复过程，从而进一步抑制了肿瘤细胞的增殖活性。
3.突变型 p53蛋白不仅丧失了野生型p53蛋白对细胞增殖、细胞周期进程的负调控能力以及抑制
细胞恶性转化、促进细胞凋亡的作用，而且还干扰了野生型p53亚基的正常功能，并获得细胞
转化能力，具有癌蛋白的生物功能。实验结果表明，SDT疗法对S180腹水型肿瘤细胞中突变型
p53蛋白的表达有明显的抑制作用，进而使其促癌功能的发挥受到了抑制。
4.在多种人类细胞中都发现有c-myc的高度表达,它能促进细胞增殖,抑制细胞分化。近年研究表
明, c-myc还参与细胞凋亡的调控. c-myc是调控细胞的周期的主要基因, 能调节细胞增殖和死
亡两个截然相反的过程。信号传递系统激活后,如果培养体系中有足够的生长因子持续作用,则
细胞增殖并分裂;否则便通过细胞凋亡机制诱导细胞发生死亡。实验结果表明：SDT疗法可S180
腹水型肿瘤细胞中c-myc蛋白的表达受到抑制，其表达量的变化可能会进一步诱导肿瘤细胞发
生凋亡。
5.c-jun和c-fos是一类与肿瘤细胞多种癌基因转录活动密切相关的核转录因子，c-fos、 c-jun
在多数肿瘤细胞中高度表达，二者通过亮氨酸拉链结构结合形成同源或异源二聚体,构成转录
调控蛋白AP-1, 作用于靶基因调控序列中的AP-1结合位点,调节靶基因的表达,对细胞的增殖和
分化起重要的调控作用。研究结果表明：SDT疗法对二者的表达有明显的抑制作用，表达量的
下降可导致其对相关癌基因的转录活动的调节作用受到严重影响，从而影响到癌细胞旺盛的增
殖活动。
6.端粒作为细胞生长有丝分裂的时钟，在细胞生长、衰老、凋亡中起着重要的作用，而端粒酶是
一种反转录酶对于维持和平衡细胞中端粒的长度，修复断裂的染色体末端，起着非常重要的作
用。多数肿瘤细胞中端粒酶活性较高，因此肿瘤细胞获得了较强的增殖能力。实验结果表明：
SDT疗法使端粒酶活性受到显著抑制，使受损的癌细胞的染色体无法进行有效的修复，加快了
其死亡的进程。
7.DNA 拓扑异构酶II是一类具有调节DNA三维结构的核酶，它直接参与或影响细胞DNA的复制、修
复、转录、翻译和有丝分裂的生命过程。同时，它也是众多抗癌药物的靶位点，通过抑制该酶
的作用，改变核酸的构型，并使之发生断裂，进而促进癌细胞死亡。实验结果表明：SDT疗法
对DNA 拓扑异构酶IIα的活性具有显著的抑制作用，从而抑制其对受损癌细胞中DNA的复制、修
复、转录、翻译的调节功能的发挥，加速和促进了受损癌细胞的死亡或凋亡的过程。
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