2018年浙江大学生物系统工程与食品科学学院830生物化学与分子生物学之现代分子生物学考研基础五套测试题
● 摘要
一、名词解释
1． Transcriptome
【答案】转录组。转录组是指一个活细胞所能转录出的所有niRNA ，即基因组DNA 转录的基因总和。研究转录组的一个重要方法是利用DNA 芯片技术检测机体中基因组的表达。
2． Attenuator
【答案】弱化子。弱化子是指当操纵子被阻遏时，RNA 合成终止，起终止转录信号作用的核苷酸序列。弱化子 对于基因活性的影响是通过影响前导序列mRNA 的结构而发挥作用的，其调节作用的是某种对应氨酰-tRNA 的浓度，典型例子是细菌中的色氨酸操纵子。
3． RNA 编辑（RNA editing）
【答案】RNA 编辑是指某些RNA ，特别是mRNA 前体的一种加工方式，如插入、删除或取代一些核苷酸残基，导致DNA 所编码的遗传信息发生改变，因为经过编辑的mRNA 序列发生了不同于模板DNA 的变化。
4． tmRNA
【答案】转移—信使RNA 。tmRNA 是指细菌体内一种修复翻译水平上受阻的遗传信息表达过程的反式翻译机制的核心分子，它兼具tRNA 和mRNA 的特点，在SmpB 蛋白的帮助下特异性识别携带mRNA 缺失体的核糖体，在核糖体蛋白S1的传递作用下结合在A 位点上，一方面延续被中断的mRNA 上的遗传信息，一方面终止蛋白质的合成，释放被束缚的核糖体和tRNA 进入新的翻译过程。
5． Intein
【答案】内含肽。内含肽是指存在于某些蛋白质前体肽链内部的一些肽段在转变为成熟蛋白质时，通过非酶促的转肽反应被切除，与其对应的是保留于成熟蛋白质中的外显肽。这些肽段具有核酸酶活性。
6． 核酶（ribozyme ）
【答案】核酶也称核糖酶、核酸类酶、酶RNA 、类酶RNA , 是指具有催化功能的RNA 分子，通过催化靶位点RNA 链中磷酸二酯键的断裂，特异性地剪切底物RNA 分子，从而阻断基因的表达。
7． 阻遏蛋白
【答案】阻遏蛋白是指一类在转录水平对基因表达产生负控作用的蛋白质，在一定条件下与DNA 结合，一般具有诱导和阻遏两种类型。
8． 等电聚焦
【答案】
等电聚焦是指利用蛋白质分子或其他两性分子的等电点的不同，在一个稳定的、连续的、线性pH 梯度中进行蛋白质的分离和分析的技术。
9． DNA 复性（DNA renaturation）
【答案】DNA 复性是指DNA 双螺旋变性后的两条互补单链重新恢复成双螺旋结构的过程。
10．操纵子
【答案】操纵子是指原核生物基因中，多个功能上相关的结构基因串联排列在基因组序列中，构成信息区，连同上游启动区和操纵基因区及下游转录终止区一起构成的基因表达单位。
11．Telomerase
【答案】端粒酶。端粒酶是指由蛋白质和RNA 两部分组成的一种反转录酶，其中RNA 作为模板序列，指导合成染色体末端的端粒DNA 的重复序列片段。
12．SD 序列（Shine Dalgamo sequence）
【答案】SD 序列是指存在于原核生物mRNA 起始密码子上游7〜12个核苷酸的富含嘌呤的保守片段，能与 16SrRNA3' 端富含嘧啶的区域进行反向互补，所以可将mRNA 的AUG 起始密码子置于核糖体的适当位置以便起始翻译作用。
二、简答题
13．简述酵母单、双杂交系统的基本原理与应用。
【答案】（1）酵母单杂交系统。
①基本原理
将已知的特定顺式作用元件构建到最基本启动子（Pmin ）的上游，把报告基因连接到Pmin 下游。然后将编 码待测转录因子的cDNA 与已知酵母转录激活结构域（AD ）融合表达载体导入酵母细胞，该基因产物如果能够 与顺式作用元件相结合，就能激活Pmin 启动子，使报告基因得到表达。
②应用
a. 用于检测已知DNΑ-蛋白质之间是否存在相互作用；
b. 用于分离结合于目的顺式调控元件或其他短DNA 结合位点蛋白的新基因；
c. 用于定位已经证实的具有相互作用的DNA 结合蛋白的DNA 结合结构域进一步准确定位与
DNA 结合的核苷酸序列。
（2）酵母双杂交系统。
①基本原理
把编码已知蛋白的DNA 序列连接到带有酵母转录调控因子DNA 结合结构域编码区（BD ）的表达载体上。导入酵母细胞中使之表达带有DNA 结合结构域的杂合蛋白，与报告基因上游的启动调控区相结合，准备作为“诱 饵”捕获与已知蛋白相互作用的基因产物。此时，若将已知的编码转录激活结构域（AD ）的DNA 分别与待筛 选的cDNA 文库中不同插入片段相连接，获得“猎物”载体，转化含有“诱饵”的酵母细胞，一旦酵母细胞中 表达的“诱饵”蛋白与“猎物”载体中表达的某个蛋白质发生相互作用，不同转录调控因子的AD 和BD 结构域 就会被牵引靠拢，激活报告基因表达。分离有报告基因活性的酵母细胞，得到所需要的“猎物”载体，就能得到 与已知蛋白相互作用的新基因。
②应用
a. 用于研究蛋白质之间的相互作用。
b. 用于发现新的蛋白质和蛋白质的新功能；
c. 用于在细胞体内研究抗原和抗体的相互作用；
d. 用于筛选药物的作用位点以及药物对蛋白质之间相互作用的影响；
e. 用于建立基因组蛋白连锁图。
14．tRNA 是如何转运活化的氨基酸至mRNA 模板上的？
【答案】（1）由于tRNA 的氨基酸臂上存在特定的识别密码可以为氨酰-A 合成酶所识别，在该酶的催化下， 将相应地氨基酸活化，形成氨酰tRNA （起始氨基酸为Met-tRNAf 或fMet-tRNAf ）。
（2）氨酰tRNA 结合GTP 的起始因子IF2-GTP （或延伸因子EF-Tu-GTT ）结合形成三元复合物。
（3）该氨酰tRNA 上的反密码子通过碱基互补配对的原则识别mRNA 上相应的密码子与起始复合物的P （A ）位点结合（只有第一个活化的氨基酸进入P 位点，链延伸过程中，氨酰tRNA 均进入A 位点），这样就将活化的 氨基酸至mRNA 模板上。
15．如果你是一家生物技术公司的CEO 或者负责技术的高层人员，有人向你推荐一种治疗癌症的特效药，寻 求与你们公司合作。你将在哪些方面对这种药物进行评价？
【答案】（1）安全性：需考察药物所用原材料、表达系统以及药品本身的安全性，必须做毒性实验和临床检验来 进一步确定其安全性；
（2）有效性：检测该药物靶向性是否够好，能否顺利的到达病灶，对癌细胞具有高效的特异性而对正常细 胞无毒害作用，疗效是否确切；
（3）稳定性：考察药物加工过程的稳定性、贮藏稳定性以及治疗效果稳定性；
（4）适用性：是否适用于不同生理状态和体质的人群。