2018年天津中医药大学神经病学306西医综合之生物化学考研核心题库
● 摘要
一、名词解释
1.
【答案】是指在标准条件下(一般定为0.18mol/L阳离子浓度,400核苷酸长的片段)测得的复性率达0.5时的Cot 值
2. 溶原性细菌
【答案】溶原性细菌是指温和噬菌体的基因与宿主菌染色体基因组整合,带有前噬菌体的细菌。
3. 同源重组(homologous recombination)。
【答案】同源重组是指在两个DNA 分子的同源序列之间直接进行交换的一种重组形式。同源重组不依赖于序列 的特异性,只依赖于序列的同源性。
4. 流体镶嵌模型。
【答案】流动镶嵌模型是针对生物膜的结构提出的一种模型。在这个模型中,生物膜被描述成镶嵌有蛋白质的流体脂双层,脂双层在结构和功能上都表现出不对称性。有的蛋白质“镶”在脂双层表面,有的则部分或全部嵌入其内部,有的则横跨整个膜。另外,脂和膜蛋白都可以进行侧向扩散。
5. 胆汁盐。
【答案】胆汁盐(胆汁酸)是胆固醇主要排泄形式,胆固醇先转化为活化的中间体胆酰CoA ,然后再与甘氨酸(或牛磺酸)结合成甘氨(牛磺)胆酸,它们分泌到肠中,有助于脂质的消化和吸收。
6. (己糖单磷酸途径)。
【答案】
(己糖单磷酸途径)即磷酸戊糖途径,是葡萄糖
和5-磷酸核
途径是细分解代谢的一条旁路。6-磷酸葡萄糖酶促氧化分解,产生5-磷酸核酮糖、胞产生还原力
的主要途径, 酮糖经过一系列非氧化还原反应,重新转变为6-磷酸葡萄糖或其他糖酵解中间物。为核酸代谢提供磷酸戊糖,同时是细胞内各种单糖互相转变的重要途径。
7. 泛肽途径。
【答案】泛肽途径又称碱性系统,是指生物体内广泛存在的细胞内的蛋白降解系统,主要降解短寿命蛋白质和反常蛋白。
8. 亮氨酸拉链。
【答案】亮氨酸拉链是反式作用因子DNA 结合结构域中的一种基序结构,由约35个氨基酸残基形成的两性卷 曲螺旋形螺旋。疏水侧链位于一侧,解离基团位于另一侧,每两圈螺旋有
螺旋而与DNA 结合起作一个亮氨酸,单体通过疏水侧链二聚化,形成拉链。该结构借助N 端
用,这种结构称为亮氨酸拉链结构。
二、问答题
9. 外源基因导入动物细胞有哪些常用方法?
【答案】常用的方法有:(1)磷酸钙共沉淀法,用沉淀磷酸离子和DNA , 沉积在细胞质膜上的DNA 被细胞吸收,可能是通过吞嗤作用;(2) DEAD 葡聚糖(DE-AE-dextron )或聚阳离子(polycation )法,它能结合DNA 并促使细胞吸收;(3)脂质体(liposome )法,利用类脂经超声波、机械搅拌等处理,形成双脂层小囊泡, 将DNA 溶液包裹在内,它通过与细胞质膜融合而使DNA 进入细胞;(4)脂质转染法,用人工合成的阳离子类 脂与DNA 形成复合性,借助类脂穿过质膜而将DNA 导入细胞内;(5)电穿孔法,在脉冲高压电场作用下质膜 瞬间被击穿,DNA 得以进入细胞,细胞膜随即修复正常;(6)显微注射法,对哺乳动物受精卵等较大的细胞,导入外源DNA 可以用显微注射法,即在显微镜下,用极细的玻璃注射器针头
枪射击动物的表皮、肌肉和 乳房等获得成功的例子也有报道。
在以上诸方法中,磷酸钙共沉淀法成本低、操作方便,但效率低;脂质转染法和电穿孑1法,前者需要昂贵的试剂,后者需要特殊的仪器,但效率高,现在较常用。显微注射法效率极高,还可直接将DNA 送入核内,但 需要昂贵仪器,且技术复杂不易掌握。
10.Matthew Meselson和Franklin Stahl为了验证DNA 复制的半保留复制,设计了一个非常巧妙的实验:将大肠杆菌先放到含有
子几乎都是的培养基中连续培养15代,以使细胞内的DNA 上的N 原的培养基上继续培养数代。分别分离各代细胞的DNA ,
的培养基中培养的大然后将大肠杆菌改放在插入细胞内并注入DNA 溶液;(7)基因枪(genegun )法,在动物转基因中使用相对较少,用基因再使用CsCl 密度梯度离心方法分析各代DNA ,并比较各代细胞DNA 在离心管中的相对位置。最终确定了DNA 复制的确遵循半保留规则。如果修改 验方案:将本来在
肠杆菌细胞,直接改放在的培养基中继续培养数代,同样抽取各代细胞中的DNA ,通过密度
,梯度法离心分析各代DNA 在离心管中的相对位置那么实验结果能否证明DNA 的 半保留复制?
【答案】不能。因为DNA 母链是高度甲基化的,而新生链甲基化程度较低,或者还没有来得及甲基化,如果直 接将大肠杆菌从为培养基改放在的培养基上培养,则子链的DNA 会因的参入,浮力密度会提高,但原来的母链因为甲基化,其相对密度会比未甲基化的DNA 高,
两种因素作用正好抵消,使得不同代数的DNA 不容易分开。
11.海藻糖是一种非还原性二糖,没有变旋现象,不能生成脎,也不能用溴水氧化成糖酸,用酸水解只生成葡萄糖,可以用-葡萄糖苷酶水解,但不能用
甲基
葡萄糖,证明海藻糖由葡萄糖苷酶水解,甲基化后水解生葡萄糖组成。海藻糖是一种非还
糖苷键。甲基成两分子2, 3, 4, 6-四葡萄糖,试推测海藻糖的结构。 【答案】用酸水解海藻糖只生成糖苷键相连。可用
葡萄糖苷
化后水解生成两分子2, 3, 4, 6-
四
藻糖的结构是原性二糖,没有变旋现象,不能生成脎,也不能用溴水氧化成糖酸,说明它的两个单糖基通过1, 1-酶水解,但不能用葡萄糖苷酶水解,说明是甲基_葡萄糖,说明其葡萄糖是吡喃型。根据以上推测可知海吡喃葡萄糖,如图所示。
吡喃葡萄糖a (1-1
)
图
12.在酶活力测定中,如何保证测定的是酶反应初速度?
【答案】在酶活力测定中,为保证测定的是酶反应初速度,通常以底物浓度的变化在起始浓度的5%以内的速率为初速度。底物浓度太低时,以下的底物浓度变化在实验上不易测准,所以在测定酶活力时,往往使底物浓度足够大,这样整个酶反应对底物来说是零级反应,而对酶来说却是一级反应。
13.—般来说DNA 稳定,而RNA 不稳定,DNA 稳定有什么生物学意义,RNA 不稳定又有什么意义?
【答案】DNA 带有遗传信息,需要稳定保留;mRNA 是合成蛋白质的信息载体,但它只是在合成蛋白质时需要,如果它稳定长期存在,那么即使不需要这种蛋白质的时候也会继续合成,这样不但浪费能量也会造成各种疾病,因此大多数蛋白质是短命的(分钟级);当需要更多蛋白质的时候是通过合成更多mRNA 来实现的。
14.大肠杆菌既可以通过光复活系统,也可以通过核苷酸切除修复系统来修复由紫外线照射产生的嘧啶二聚体,如何通过实验区分这两种机制?
【答案】切除修复需要将嘧啶二聚体切除掉,换上正常的胸苷酸,而光复活机制是通过光复
活酶直接破坏嘧啶二聚体的环丁烷环而修复嘧啶二聚体。因此可以用标记的胸苷追踪修复过程,如果出现在修复后的DNA 分子上,则修复的方式是切除修复,否则就是光复活机制。
15.什么是生物膜?研宄生物膜有何重要意义?
【答案】(1)生物膜是细胞质膜和细胞内膜系统的总称,生物膜是由极性脂和蛋白质组成的
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