2018年上海中医药大学体育中心306西医综合之生物化学考研强化五套模拟题
● 摘要
一、名词解释
1． DNA 二级结构。
【答案】DNA 的二级结构是指两条DNA 单链通过碱基互补配对的原则，所形成的双螺旋结构。
2． 超二级结构。
【答案】
超二级结构是指二级结构的基本结构单位（螺旋、折叠等）相互聚集，形成有规律的二级结构的聚集体。超二级结构主要涉及螺旋、折叠等在空间上是如何聚集在一起的问题。已知的超二级结构有3种基本组合形式
：
螺旋的聚集体
折叠的聚集体
3． 后随链（lagging strand）。
【答案】后随链是指DNA 半不连续复制过程中，延伸方向与复制叉前进方向相反、由合成的一系列短的DNA 片段（冈崎片段）连接而成的新生链。
4． 亲和层析。
【答案】亲和层析是指利用蛋白质分子对其配体分子特有的识别和结合能力建立起来的分离纯化技术。把待纯化蛋白质的特异配体共价连接到载体上，将此载体装入层析柱，对蛋白质混合物进行柱层析时，待纯化的蛋白质与 配体特异结合，吸附在层析柱上，而其他的蛋白质不能被吸附，通过洗脱可以除去，最后用含游离配体的溶液或 用改变了 pH 或离子强度的溶液将与配体结合的蛋白质洗脱下来
5．
【答案】是指在标准条件下（一般定为0.18mol/L阳离子浓度，400核苷酸长的片段）测得的复性率达0.5时的Cot 值
6． 酶的必需基团。
【答案】酶的必需基团是指与酶活性有关的基团。酶的分子中存在着许多功能基团，
例如
等，但并不是这些基团都与酶活性有关。
7． 盐溶。
【答案】盐溶是指加入少量中性盐而使蛋白质溶解度增加的现象。中性盐对蛋白质的溶解度
第 2 页，共 30 页 ，
螺旋和
折叠的聚集体
有显著影响，在盐浓度较低时，由于静电作用，使蛋白质分子外围聚集了一些带相反电荷的离子，从而加强了蛋白质和水的作用，减弱了蛋白质分子间的作用，故增加了蛋白质的溶解度。
8． DNA 聚合酶（DNA polymerase）。
【答案】DNA 聚合酶是指以DNA 为模板，催化核苷酸残基加到已存在的聚核苷酸
某些DNA 聚合酶具有外切核酸酶的活性，可用来校正新合成的核苷酸的序列。
二、问答题
9 蛋白质和氨基酸分解代谢所产生的氨有哪些出路？在动物体内和植物．、微生物体内有何不同？
【答案】
由蛋白质和氨基酸分解代谢所产生的
物体内，
用的
既是废物，又是氮源。在植物和某些微生贮存于体的能力，但重新利
作为氮源而贮存占很重要的地位，主要是生成谷氨酰氨和天冬酰胺将内，再用于嘌呤、嘧啶、氨基酸的生物合成。人和动物也有上述重新利用仅占代谢中所产生的游离的少部分。游离氨是有毒物质，脱氨作用所产生的氨在动物体内不能大量积存，绝大部分是向体外排泄。各种动物排氨的方式不同，有的动物如鱼类可直接排氨，有的动物则要把氨转变成其他形式的含氮化合物再排出体外，如鸟类排尿酸，人和其他哺乳动物在肝脏中经鸟氨酸循环将氨转变成尿素后再排出体外。
10．试指出下列每种酶具有哪种类型的专一性？
（1）脲酶（只催化尿素
（2）
果糖苷）；
（3）酯酶（作用于的水解反应）；
（4）L-氨基酸氧化酶（只作用于L-氨基酸，而不能作用于D-氨基酸）；
（5）反丁烯二酸水合酶[只作用于反丁烯二酸（延胡索酸），而不能作用于顺丁烯二酸（马来酸）];
（6）甘油激酶（催化甘油磷酸化，生成甘油-1-磷酸）。
【答案】（1）绝对专一性。
（2）相对专一性（族专一性）。
（3）相对专一性（键专一性）。
（4）立体专一性（旋光异构专一性）。
（5）立体专一性（顺反异构专一性）。
（6）立体专一性（识别从化学角度看完全对称的两个基团）。
.
葡萄糖苷酶（只作用的水解，但不能作用于）； 葡萄糖形成的各种糖苷，但不能作用于其他的糖苷，如
第 3 页，共 30 页
11．凝胶过滤和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳这两种分离蛋白质的方法均建筑在分子大小的基础上，而且两种方法均采用交联的多聚物作为支持介质，为什么在凝胶过滤时，相对分子质量小的蛋白质有较长的保留时间，而在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳时，它又“跑”得最快？
【答案】凝胶过滤常用的是葡聚糖凝胶（Sephadex ），这凝胶颗粒的交联介质排阻相对分子质量较大的蛋白质，仅允许相对分子质量较小的蛋白质进入颗粒内部，所以相对分子质量较大的蛋白质只能在凝胶颗粒之间的空隙中通过。这意味着它通过柱的体积为床体积减去凝胶颗粒本身所占的体积。而相对分子质量小的蛋白质必须通过所有的床体积才能流出，所以，相对分子质量小的蛋白质比相对分子质量大的蛋白质有较长的保留时间。而SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳时，其凝胶介质并不存在像Sephadex 那样的颗粒之间的空隙。所以，所有的蛋白质分子必须全部通过这交链介质而移动。蛋白质的相对分子质量越小，通过这介质就越快，移动得越迅速。
12．假定你决定从一种新的生物Streptococcus bartelium体内纯化核糖核酸酶，你选择盐析作为纯化的第一步，随着你JJnA 硫酸铵到细胞裂解物之中，进行分级分离。如果你添加的盐浓度是0.5mol/L、lmol/L、1.5mol/L、2mol/L、和2.5mol/L，你如何确定你要的蛋白质在哪一级分离沉淀之中？
如果你选择离子交换层析作为纯化核糖核酸酶的第二步，同样需要确定哪一部分含有目标蛋白。你会使用哪一种离子交换树脂? 为什么? 你如何从交换树脂中洗脱下你的目标蛋白？
你将纯化的蛋白质走SDS-PAGE ，在考马斯亮蓝染色以后，你看到一条单一的
种蛋白质是一种核糖体蛋白，于是你决定再进行一次蛋白质染色，这一次你发现了一条
小的条带。这一次染色方法是什么？为什么
会多显示出新的条带，你如何分离这两种蛋白质？
【答案】（1）在纯化蛋白质过程中，首先需要建立一种测定活性的方法。测定核糖核酸酶活性的方法是利用其将RNA 降解成单个核苷酸的活性。使用放射性标记的NTP ，可转录出带放射性标记的RNA 。以此作为核糖核酸酶的底物，将其与含有酶的部分保温，然后用TCA 沉淀，再使用特定的滤膜过滤，通过测定流过滤膜的带有同位素标记的核苷酸的放射性，可测定出纯化物中酶活性的高低。
（2）既然核糖核酸酶的底物是磷酸核糖骨架带负电荷的RNA , 核糖核酸酶本身很可能带正电荷。因此，可考虑阳离子交换树脂来纯化核糖核酸酶。在低盐浓度下上柱，以吸附核糖核酸酶，然后用高盐缓冲液洗脱出核糖核酸酶。
（3）考马斯亮蓝染色的灵敏度仅能检测出含有大约lOOng 的条带，而银染的灵敏度达10ng 。所以使用考马斯亮蓝染色看不到的条带有可能通过银染看到。
为了将的核糖体蛋白与的核糖核酸酶分开，可使用凝胶过滤层析。的核糖核酸酶应该先流出来。
第 4 页，共 30 页 大小的大条带。为了确定它是不是核糖核酸酶，你决定将条带切下，然后测序。然而，你吃惊的发现，这
相关内容
相关标签