2018年河北大学化学与环境科学学院878分子生物学(重点实验室)之现代分子生物学考研基础五套测试题
● 摘要
一、填空题
1． 同一种氨基酸密码具有两个或更多密码子的现象称为密码子的_____。
【答案】简并性
2． SDS-PAGE 中，凝胶的单体为_____，_____是交联剂。蛋白质结合SDS 后均带_____电荷，肽链越长迁移速度越_____。
【答案】丙烯酰胺；甲叉双丙烯酰胺；负；慢
3． 常见的转录活化域的特征性结构包括：带负电荷的螺旋结构，富含_____的结构和富含_____的结构。
【答案】谷氨酰胺；脯氨酸
【解析】转录激活域是由30〜100个氨基酸残基组成的。根据氨基酸组成特点，转录激活域又有酸性激活域、 谷氨酰胺富含区域及脯氨酸富含区域。
4． 2004年确定人类基因组含有_____碱基对和_____基因。
【答案】约30亿；约2.5万个
【解析】人类基因组计划于20世纪90年代启动，计划测定人类单倍体染色体组中约30亿碱基对序列，包括约3万个基因。
二、单项选择题
5． 有关蛋白质变性的描述中，正确的是（ ）。
A 蛋白质变性增加其溶解度
B. 蛋白质变性由肽链断裂而引起
C. 蛋白质变性是不可逆的
D. 蛋白质变性与溶液pH 无关
E. 蛋白质变性可使其生物活性丧失
【答案】E
6． 生物质谱所用的内肽酶是（ ）。
A.CPA
B.CPB
C.CPY
D.Trypsin
【答案】D
【解析】ABC 三项，CPA 、CPB 、CPY 是羧肽酶A 、羧肽酶B 、羧肽酶Y 。羧肽酶是一类肽链外切酶，它 能专一地从肽链的C 端开始逐个降解，释放出游离氨基酸，用于C 端氨基酸残基分析。D 项，Trypsin 是胰蛋白酶，是最常用的蛋白水解酶，专一性强，只断裂赖氨酸或精氨酸的羧基参与形成的肽键。用固相法测序时，用胰蛋白酶裂解得到的肽段可以通过双功能交联剂_对苯二异硫氰酸直接偶联到固相载体上。
7． 研究promoter DNA与蛋白质及RNA 聚合酶分子之间相互作用不适合的方法是（ ）。
A.DNA footprinting
B.DNA fingerprinting
C.gel mobility assay （gel shift assay）
D.run off transcription
【答案】B
【解析】A 项，DNAfootprinting 即DNA 足迹试验，蛋白结合在DNA 片段上，能保护结合部位不被DNase 破坏，这样蛋白质在DNA 片段上留下了“足迹”，在电泳凝胶的放射性自显影图片上，相应于蛋白质结合的部 位没有放射性标记条带。该技术主要用于检测DNA 和蛋白质的相互作用及结合的位置。
B 项，DNA fingerprinting 技术用于研究DNA 序列之间的相似性。
C 项，gel mobility assay （gel shift assay ）即凝胶阻滞试验，又称DNA 迁移率变化试验
在, 是一种体外研究DNA 与蛋白质相互作用的特殊的凝胶电泳技术。（DNAmobility shift assay）
凝胶电泳中，由于电场的作用，小分子DNA 片段比其结合了蛋白质的DNA 片段向阳极移动的速度快，因此，可标记短的双链DNA 片段，将其与蛋白质混合，对混合物进行凝胶电泳，若目的DNA 与特异性蛋白质结合，其向阳极移动的速度受到阻滞，对凝胶进行放射性自显影，就可找到DNA 结合蛋白。
D 项，runofftranscription 即延续转录，用于找出转录的5' 端起始，主要是RNA 聚合酶与模板的结合作用。
8． 假定一负超螺旋的L=20，T=23，W=-3。问大肠杆菌拓扑异构酶I 作用一次后的L 、T 、W 值分别是多少? （ ）
A.L=21 T=23 W=-2
B.L=22 T=23 W=-1
C.L=19 T=23 W=-4
D.L=18 T=23 W=-5
【答案】A
【解析】超螺旋的缠绕数与双螺旋的链间螺旋数的关系，用公式表示:L=T+W, 其中L 为连接数，是指环形DNA 分子两条链间交叉的次数，只要不发生断裂，L 是常数; T 为双螺旋的缠绕数，W 为超螺旋数，T 和W 是变量。大肠杆菌中拓扑异构酶工催化的结果是:切断一个链，超螺旋DNA
增加一个连接数，减少一个负超螺旋。
三、名词解释
9． 阻遏蛋白
【答案】阻遏蛋白是指一类在转录水平对基因表达产生负控作用的蛋白质，在一定条件下与DNA 结合，一般具有诱导和阻遏两种类型。
10．移码突变（frameshi Kmutation）
【答案】移码突变是指由于单个碱基或者非三的整倍数的碱基的插入或缺失引起的从突变位点开始整个可读框的改变，从而产生完全不同的一系列氨基酸的突变。
11．polysome
【答案】多核糖体。多核糖体是指蛋白质合成过程中结合在同一条mRNA 上的多个核糖体，能同时合成若干条蛋白质多肽链。
12．Molecular Bescons
【答案】分子信标。分子信标是指一种具有自身配对区的DNA 寡核苷酸分子探针，利用荧光标记探针的碱基配对原理，通过观察探针荧光显示或淬灭的现象，确定目的基因的分子标记。
四、论述题
13．说说蓝白斑筛选的分子机制。
【答案】蓝白斑筛选是一种基因工程常用的重组子筛选方法，是根据载体的遗传特征筛选重组子，其分子机制为
（1） 大肠杆菌丰乳糖苷酶可分成2部分即和C-段，的基因位于载体上并含
上。 有不影响其ORF 的多克隆位点（MCS ）, 而C-段的基因位于工程菌
无色化合物X-gal 切割成半乳糖和深蓝色的物质5-溴-4-靛蓝，产生蓝斑。
（3）在MCS 上插入新基因将会改变其ORF 而使得载体上的α-肽段不能与菌株中的C-段互补，而不能将 无色化合物X-gal 切割成半乳糖和深蓝色的物质5-溴-4-截蓝而产生白斑。
14．你对应用RACE 技术克隆cDNA 的末端和末端的原理有怎样的了解？
【答案】RACE 技术是用于从已知cDNA 片段扩增全长基因的方法，它根据已知序列设计基因片段内部特异引物，由该片段向外侧进行PCR 扩增得到目的序列。用于扩增
RACE ，用于扩增（1）5'RACE
①在反转录酶的作用下，以已知基因片段内部特异性引物起始cDNA 第一条链的合成。
（2）二者在同一菌株中表达时，菌株中的C-段与载体上的tx-肽段互补而具有酶活性，能将端的方法称为端的称为RACE 。