2017年黑龙江大学072分子生物学考研复试核心题库
● 摘要
一、名词解释
1. 锌指结构(zine finger motif)
【答案】锌指结构是指许多转录因子共有的DNA 结合结构域,具有很强的保守性,具有此结构的蛋白借肽链的弯曲使两个Cys 和两个His 与一个锌离子,或四个Cys 与一个锌离子形成形似手指状的三级结构。
2. 转录后加工(post-transcription processing)
【答案】转录后加工是指新合成的较大的前体RNA 分子,经过进一步的加工修饰,转变为具有生物学活性的、成熟的RNA 分子的过程,主要包括剪接、剪切和化学修饰。
3. MissenseMutation
【答案】错义突变。错义突变是指DNA 分子中碱基对的取代,使得mRNA 的某一密码子发生变化,由它所编码的氨基酸基变成另一种的氨基酸,使得多肽链中的氨基酸序列也相应的发生改变的突变。
4. 同源重组(homologous recombination)
【答案】同源重组是指发生在DNA 的同源序列之间的重组,真核生物的非姐妹染色单体的交换,细菌的转化、转导和接合,噬菌体的重组等都属于这种类型。同源重组要求较大的DNA 片段进行交换它们的序列相同或接近相同。
5. 移码突变(frameshi Kmutation)
【答案】移码突变是指由于单个碱基或者非三的整倍数的碱基的插入或缺失引起的从突变位点开始整个可读框的改变,从而产生完全不同的一系列氨基酸的突变。
二、简答题
6. 蛋白质实验原理与主要步骤。
【答案】(1)实验原理
利用与GST 融合蛋白质探针蛋白质亲和结合,从可溶性蛋白质库中纯化一个未知蛋白质,再
通过GST 与谷 胱甘肽偶联的琼脂糖球珠的结合收集相互作用蛋白质,从而分离出蛋白质复合物。
(2)主要步骤
① GST 融合蛋白先与下列蛋白溶液之一孵育(a. 单一明确的重组蛋白;b. 细胞裂解蛋白混合
; 液;c. 体外 翻译cDNA 表达得到的未知蛋白)
②混合液与谷胱甘肽琼脂糖球珠在4°C 反应2h ,离心得沉淀;
③沉淀加入2 X蛋白Loading Buffer煮沸,离心,取上清进行SDS-PAGE 电泳;
④考马氏亮兰对SDS-PAGE 胶进行染色,观察特异沉降的蛋白带,接着进行质谱分析确定沉降的蛋白;
⑤电泳后的胶做Western Blot来确定沉降的蛋白中是否有目的蛋白。
7. DNA 双螺旋结构是由谁提出来的? 简述其发现的主要实验依据及其在现代分子生物学发展史中的意义。
【答案】(1)Watson 和Crick 提出了DNA 双螺旋模型
(2)DNA 双螺旋模型的提出基于以下三个方面的发现:
①x 射线衍射实验数据表明DNA 是一种规则螺旋结构。
②DNA 分子密度测量表明这种螺旋结构由两条多核苷酸链组成。
③不论碱基的数目多少,G 的含量总是与C 一样,而A 与T 也是一样的。
(3)该模型的意义:
①确立了核酸作为信息分子的结构基础,确定了核酸是遗传的物质基础,为认识核酸与蛋白质的关系及其在生命中的作用奠定了基础。
②DNA 分子双螺旋结构模型在分子水平上阐述DNA 的理化性质,对促进分子生物学及分子遗传学的发展具有划时代意义。
③该模型将DNA 的结构与功能联系起来,对DNA 本身的复制机制、遗传信息的存储方式和遗传信息的表达、生物遗传稳定性和变异性等规律的阐明起了非常重要的作用:
8. 简述组蛋白都有哪些类型的修饰,其功能分别是什么?
【答案】组蛋白是染色体的结构蛋白。组蛋白的修饰作用只发生在细胞周期的特定时间和组蛋白的特定位点上,其修饰类型及相应的功能有:
(1)甲基化,可发生在组蛋白的Lys 和Arg 残基上,与基因激活或基因沉默有关;
(2)乙酞化,主要发生在核心组蛋白上,呈现多样性,在含有活性基因的DNA 结构域中,乙酞化程度更高,通过乙酸化/去乙酞化修饰调节基因转录水平,参与DNA 修复、拼接和复制,参与染色体组装以及细胞的信号传导,与某些疾病的形成密切相关;
(3)磷酸化,参与基因转录、DNA 修复、细胞凋亡及染色体浓缩等过程;
(4)泛素化,参与X 染色体的失活,影响组蛋白的甲基化和基因的转录;
(5)ADP 核糖基化等。
所有这些修饰作用都有一个共同的特点:降低组蛋白所携带的正电荷,直接或问接影响基因的转录活性。
9. 比较引起的非典和人禽流感,哪种病在流行上易于控制?为什么?
【答案】从非典和人禽流感的传播途径比较,非典在流行上易于控制。
(1)SARS 的传播途径有:
①近距离飞沬传播,患者咳出或喷出飞沫中含有病毒颗粒;
②通过直接或间接接触病人呼吸道分泌物而传播,病毒颗粒经口、鼻、眼黏膜侵入机体; ③ 经气溶胶传播,易感者可能因吸入悬浮在空气中含有
(2)人禽流感的传播途径有:
① 经飞沫在空气中传播,人因吸入飘浮于空气中的病禽咳嗽和鸣叫时喷射出的带有毒而感染;
②经过消化道感染,进食病禽的肉及其制品或接触到病禽类污染的水源、餐具等; ③ 经过损伤的皮肤和眼结膜感染病毒而发病。
因为禽类相对难以控制,所以不易用隔离的方法控制传染源,而且人禽流感病毒会在环境变化压力下进行病 毒重组,形成新的株系或致病型,使得控制传播更难。
10.细胞通过哪几种修复系统对DNA 损伤进行修复?
【答案】细胞可以通过错配修复、重组修复、切除修复、直接修复和SOS 反应等修复系统对DNA 损伤进行修复。
(1)错配修复
①当复制叉通过复制起始点,母链DNA 就被甲基化。
②一旦在DNA 复制过程中发生错配,细胞能够通过准确的错配修复系统将其识别,并加以校正。
DNA 子链中的错配几乎完全能被修正,充分反映了母链序列的重要性。
(2)切除修复
①碱基切除修复
a. 不同类型的糖苷水解酶特异性识别并切除受损核苷酸上的N-β糖苷键,在DNA 链上形成AP 位点;
b.AP 核酸内切酶把受损核苷酸的糖苷—磷酸键切开,并移去包括AP 位点核苷酸在内的小片段DNA ;
c. 再由DNA 聚合酶I 合成新的片段,DNA 连接酶连成新的被修复的DNA 链。
②核苷酸切除修复
a. 首先DNA 切割酶在己损伤的核苷酸5' 和3' 位分别切开磷酸糖苷键,产生一个核苷酸小片段; b. 移去小片段后由DNA 聚合酶I (原核)或
成修复。
(3)重组修复
,发生在复制之后。 重组修复又被称为“复制后修复”
①机体细胞对在复制起始时尚未修复的DNA 损伤部位可以先跳过该损伤部位完成全部链复制后再进行修复。
②先从同源DNA 母链上将相应核苷酸序列片段移至子链缺口。
的气溶胶所感染。 根据传播途径,采取隔离的方法即能有效地控制传染源,切断传播途径以防止非典蔓延。 病(真核)合成新的片段,并由DNA 连接酶完