题目：棘托竹荪菌盖多糖分离制备及生物活性研究

棘托竹荪（Dictyophora echinovolvata Zang, Zheng et Hu）属于担子菌亚门、腹菌纲、鬼笔目、鬼笔科、竹荪属，自古以来就是珍贵的药食两用真菌。棘托竹荪具有抗炎、抑制癌细胞发展、降低高血压和胆固醇、调节免疫作用、抗氧化和良好的抑菌作用。
多糖是重要的具有生物学活性的天然高分子化合物之一，在自然界分布极为广泛，具有可同核酸与蛋白质相比拟的信息功能。目前对棘托竹荪菌盖多糖（DEVP）的研究很少，而且不够深入。本论文对DEVP进行了较系统的研究，包括提取条件优化、分离纯化、抗氧化活性、抑菌活性等方面。
研究结果如下：
1)      棘托竹荪菌盖多糖提取条件研究
采用热水浸提、乙醇沉淀的方法提取获得了棘托竹荪菌盖多糖。
选取提取温度、料液比、提取时间、提取次数4个因素分别进行单因素实验，在单因素实验基础上，选择提取温度、料液比、提取时间及提取次数进行四因素三水平的Box-Behnken实验（BBD），对此4个影响因子的实验组和进行优化。得出棘托竹荪菌盖多糖的最优提取条件为提取温度为95℃，料液比为1∶39， 提取次数为3次，提取时间为3.5h。
选用优化的实验数据，进行验证，结果表明实验值与模型的预测值基本一致，表明最优实验条件是切实可行的。
2)      棘托竹荪菌盖多糖分离纯化
根据响应优化实验结果，采用热水浸提、乙醇沉淀、Sevage法脱蛋白、脱色、透析等方法提取获得了棘托竹荪菌盖精制多糖。
采用DEAE-52纤维素柱层析对DEVP精制品进行初步分离，得到DEVP-A、DEVP-B、DEVP-C、DEVP-D、DEVP-E五个组分。五个组分再经葡聚糖凝胶柱层析进一步分离，得到DEVP-1和DEVP-2两个均一多糖。
采用比旋光度法纯度鉴定验证DEVP-1和DEVP-2为均一多糖组分。
3)      棘突竹荪菌盖多糖抗氧化活性
运用化学方法测定的棘托竹荪菌盖多糖的体外抗氧化活性。测定结果表明，棘托竹荪菌盖多糖具有明显的还原能力，对超氧阴离子自由基、（DPPH•）有机自由基、羟自由基均表现良好的清除能力，随着多糖浓度的增加，还原能力及三种自由基的清除能力也相应增加，且在一定的浓度范围内，呈现一定的量效关系，尤其对羟自由基的清除方面，表现更为优异。总之，棘托竹荪多糖具有良好的还原能力和自由基清除能力，是一种抗氧化活性很高的物质。
4)      棘托竹荪菌盖多糖抑菌活性
采用滤纸片法，选取酵母菌、青霉菌、金黄色葡萄球菌、蜡状芽孢杆菌和大肠杆菌为实验菌，对棘托竹荪菌盖精制多糖DEVP-A、DEVP-B、DEVP-C、DEVP-D、DEVP-E等棘托竹荪菌盖多糖相关组分测定与评价其抑菌效力。
测定结果表明，棘托竹荪菌盖精制多糖、DEVP-A、DEVP-B、DEVP-C、DEVP-D、DEVP-E等都表现出一定的抑菌效力，对酵母菌、青霉菌、白色葡萄球菌、蜡状芽孢杆菌和大肠杆菌均有一定的抑制作用，且抑菌圈直径随着多糖浓度的增加而增大。在浓度为100mg/mL时，抑菌圈直径平均值为8mm左右。