2018年浙江大学830生物化学与分子生物学(各50%)之现代分子生物学考研强化五套模拟题
● 摘要
一、名词解释
1． 双向电泳
【答案】双向电泳是指将样品进行电泳后，在它的直角方向再进行一次电泳，为了不同的目的而采用不同的组合 方式的分离方法，目前双向电泳大多是指第一向为等电聚焦，平衡后，第二向为SDS 电泳。
2． 移码突变（frameshi Kmutation）
【答案】移码突变是指由于单个碱基或者非三的整倍数的碱基的插入或缺失引起的从突变位点开始整个可读框的改变，从而产生完全不同的一系列氨基酸的突变。
3． 无义突变（nonsensemutation ）
【答案】无义突变是指在DNA 序列中任何导致氨基酸的三联体密码子转变为终止密码子（UAG 、UGA 、U 从）的突变，它使蛋白质合成提前终止，合成无功能的或无意义的多肽。
4． Molecular Bescons
【答案】分子信标。分子信标是指一种具有自身配对区的DNA 寡核苷酸分子探针，利用荧光标记探针的碱基配对原理，通过观察探针荧光显示或淬灭的现象，确定目的基因的分子标记。
5． 转录单位（transcription unit）
【答案】转录单位是指从转录起始位点到转录终正位点所对应的、作为RNA 聚合酶模板的基因序列范围，可以是单一基因，也可以是多个基因。一个转录单位就是从启动子到终止子的一段序列，是一段以一条单链RNA 分子为表达产物的DNA 片段，这是转录单位的重要特征。
6．
【答案】即荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization ），是指一种利用非放射性的劳光信号对原位杂交样本进行检测的技术。它将荧光信号的高灵敏度、安全性，荧光信号的直观性和原位杂交的高准确性结合
起来，通过荧光标记的DNA 探针与待测样本的DNA 进行原位杂交，在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数，从而对染色体或基因异常的细胞、组织样本进行检测和诊断，为各种基因相关疾病的分型、预前和预后提供准确的依据。
7． DNA Fingerprint
DNA 指纹是指由于限制性酶切位点的改变或DNA 序列中重复序列等原【答案】DNA 指纹。
因，以及一些DNA 遗传标记的差异性，生物个体DNA 表现的个体间的差异，这些个体差异反映了个体的身份。利用DNA 指纹鉴定个体差异的技术为DNA fingerprinting，用于亲子鉴定。
8． 操纵子
【答案】操纵子是指原核生物基因中，多个功能上相关的结构基因串联排列在基因组序列中，构成信息区，连同上游启动区和操纵基因区及下游转录终止区一起构成的基因表达单位。
9． SDS 电泳（SDS-PAGE ）
【答案】SDS 电泳（SDS-PAGE ）是指根据SDS 和还原试剂将蛋白质分子解聚后亚基的大小，在恒定pH （碱性） 缓冲系统中分离的方法，主要用于测定蛋白质亚基分子质量。
10．Nonsence mutation
【答案】无义突变。无义突变是指由于结构基因中某个碱基的替换，使得原来编码某一氨基酸的密码子突变为终 止密码子UAA 、UGA 、UAG 中的一种，致使肽链的合成提前终止，肽链缩短，产生无活性的多肽片段的突变。
11．DNA 解链温度（melting temperature, T m ）
【答案】DNA 解链温度是指DNA 变性过程中单链达到一半时的温度或DNA 变性过程中紫外吸收达到最大增值一半时的温度。
12．基因组学
【答案】基因组学是指研究生物基因组和如何利用基因的一门科学，研究目标是认识基因组的结构、功能及进化， 弄清基因组包含的遗传物质的全部信息及相互关系。
二、简答题
13．蛋白质实验原理与主要步骤。
【答案】（1）实验原理
利用与GST 融合蛋白质探针蛋白质亲和结合，从可溶性蛋白质库中纯化一个未知蛋白质，再
通过GST 与谷 胱甘肽偶联的琼脂糖球珠的结合收集相互作用蛋白质，从而分离出蛋白质复合物。
（2）主要步骤
① GST 融合蛋白先与下列蛋白溶液之一孵育（a. 单一明确的重组蛋白；b. 细胞裂解蛋白混合液；c. 体外 翻译cDNA 表达得到的未知蛋白）；
②混合液与谷胱甘肽琼脂糖球珠在4°C 反应2h ，离心得沉淀；
③沉淀加入2 X蛋白Loading Buffer煮沸，离心，取上清进行SDS-PAGE 电泳；
④考马氏亮兰对SDS-PAGE 胶进行染色，观察特异沉降的蛋白带，接着进行质谱分析确定沉
降的蛋白；
⑤电泳后的胶做Western Blot来确定沉降的蛋白中是否有目的蛋白。
14．不同人感染HIV 和HBV 在人体潜伏的实践存在很大差异，有哪些原因？
【答案】潜伏期是指病原体侵入机体到开始出现症状和体征之间的这段时期。
（1）艾滋病潜伏期一般是1〜14年，平均6年，有的病原携带者甚至长达20年。不同个体的潜伏期之所以 存在如此大的差异，主要与患者的体征、年龄、感染途径、感染病毒的剂量及种类等因素有关。
①抵抗力、免疫功能强的个体，潜伏期相对较长；
②一般儿童潜伏期平均为1.2年，成年人8〜9年，，老年人则介于其间；
③经性接触感染的病毒剂量较小，潜伏期相对较长，经输血感染的病毒剂量较大，潜伏期相对较短；
④ 不同的种类的艾滋病病毒造成的艾滋病潜伏期不同，
如
16〜19年之久。
（2）HBV 潜伏期一般是50〜150天，平均60〜90天，最短的2周，最长的可达9个月，称长潜伏期肝炎。 肝炎的潜伏期长短也取决于病毒感染数量、感染途径及机体状态：经血感染的病毒剂量大，潜伏期较短；抵抗力、 免疫功能强的个体，潜伏期较长。
15．类固醇激素对个体基因表达的调节存在组织特异性，在不同的组织中激活不同基因的表达，请分析出现 这种现象的可能原因是什么？
【答案】许多类固醇激素以及一般代谢性激素的调控作用都是通过起始基因转录而实现的。靶细胞具有专一的细胞质受体，可与激素形成复合物，导致三维结构甚至化学性质的变化。经修饰的受体与激素复合物通过核膜进入 细胞核内，并与染色质的特定区域相结合，导致基因转录的起始或关闭。类固醇激素在不同的组织中有不同的类 固醇激素受体，不同的受体所识别的HRE （激素应答因子）也因而不同，所以能够表达不同的基因，即在不同 的组织中类固醇激素受体的表达也有组成特异性。
16．说出免疫共沉淀造成的艾滋病潜伏期长达实验的原理与过程，比较酵母双杂交技术和免疫共沉淀技术在研究蛋
白质相互作用方面的优缺点。 【答案】（1）免疫共沉淀
①优点
a. 参与相互作用蛋白是天然状态；
b. 蛋白的相互作用是在自然状态下进行的；
c. 分离得到的蛋白复合物是天然状态的。
②缺点
a. 灵敏度不高，检测不到低亲和力和瞬时的蛋白质-蛋白质相互作用；