题目：山茱萸总皂苷提取纯化及其体外抗氧化性研究

山茱萸为山茱萸科山茱萸属植物山茱萸的干燥成熟果肉，主要分布在北温带、亚热带的高山地区。据《本草纲目》记载：山茱萸“能壮元气、秘精，气味酸、平、无毒。主治心下邪气寒热，温中，逐寒湿痹，去三虫，以服强身”。现代医学研究证明，山茱萸能增强机体免疫能力，有抗炎、降血糖、抗失血性休克、抑制血小板凝集作用，还具有抗菌、抗氧化、抗癌等作用。
总皂苷是山茱萸中的主要活性成分之一，大量研究表明，皂苷具有祛痰、止咳、抑菌、抗癌、解热等多种生物活性。因此，其提取、纯化工艺和生理活性的研究显得尤为重要。本试验以山茱萸肉为原料，研究了水浸法、乙醇溶剂浸提法、超声波法提取山茱萸总皂苷的最佳工艺参数；研究了利用HPD-100大孔吸附树脂纯化山茱萸总皂苷的工艺；研究了山茱萸总皂苷的体外抗氧化作用。结果表明：
1.水浸法提取山茱萸总皂苷的最佳工艺参数为浸提温度70℃ ，浸提时间3h，料液比1:12，提取一次。
2.乙醇溶剂回流法提取山茱萸总皂苷的最佳工艺参数为提取温度70℃，乙醇浓度60%，料液比1:20，提取时间1h，提取一次。
3.超声波辅助提取山茱萸总皂苷的最佳工艺参数为超声功率250W，提取时间20min，乙醇浓度60%，料液比1:16。
4.HPD-100型大孔吸附树脂对纯化山茱萸总皂苷表现出了较佳的性能(静态饱和吸附量：113.75mg/g干树脂，洗脱率：92.10% )；动态吸附的参数：原上样液的浓度为7～9mg/mL，原上样液以2BV/h的流速上柱，上样液的pH值调至6.0～7.0较为适宜；动态洗脱的参数：先用蒸馏水洗去糖类等水溶性杂质，然后用50%乙醇进行洗脱，收集50%乙醇洗脱部分；50%乙醇洗脱剂的用量为250mL，洗脱流速控制在1～2BV/h较为适宜；经纯化后固形物中总皂苷的含量明显比纯化前固形物中总皂苷的含量多，且精制度达242.9%，说明HPD-100大孔吸附树脂纯化山茱萸总皂苷的效果良好。
5.山茱萸总皂苷对超氧阴离子自由基的清除作用较好，在所选浓度范围之内，随着浓度的升高，清除率逐渐增大，最大清除率达86.5%，强于Vc对超氧阴离子自由基的清除作用。
6.山茱萸总皂苷和Vc对羟基自由基都有较好的清除作用，随着山茱萸总皂苷浓度的增大，对羟基自由基的清除作用逐渐增强。在所选浓度范围内，山茱萸总皂苷的IC50为0.2mg/mL左右，Vc的IC50为0.8mg/mL左右，说明山茱萸总皂苷对羟基自由基的清除作用大于Vc。
7.山茱萸总皂苷和Vc对烷基自由基的清除作用均随二者浓度的升高而增大，Vc的IC50在0.8 mg/mL左右，对烷基自由基最大清除率为68.7%，而山茱萸总皂苷的IC50在1.6mg/mL左右，对烷基自由基的最大清除率仅为52.8%，说明二者对烷基自由基都有一定的清除作用，而山茱萸总皂苷对烷基自由基的清除作用低于Vc。
8.山茱萸总皂苷和Vc对DPPH自由基都有较为明显的清除作用。Vc的IC50为0.1mg/mL左右，山茱萸总皂苷的IC50为0.2mg/mL，但在高浓度时山茱萸总皂苷对DPPH自由基的清除能力和Vc相当，总体上看山茱萸总皂苷对DPPH自由基的清除能力低于Vc。