2018年三峡大学医学院306西医综合之生物化学考研基础五套测试题
● 摘要
一、名词解释
1.
复制叉
【答案】
复制叉是指 复制时,
在
链上通过解旋、解链和
解旋,
同时合成新的蛋白的结合等过程形成链。 的Y
型结构。在复制叉处作为模板的双链
2. 超滤法(ultrafiltration )。
【答案】超滤法是指应用正压或离心力使蛋白质溶液透过有一定截留分子量的超滤膜,达到浓缩蛋白质溶液目的的方法。
3. 组成型基因表达(constitutive gene expression)。
【答案】组成型基因表达是指管家基因表达。管家基因较少受环境因素影响,而是在个体各个生长阶段的大多数、 或几乎全部组织中持续表达,或变化很小。
4. 拮抗剂(antagonist )。
【答案】拮抗剂是指能与特定激素的受体结合,但并不能诱发靶细胞产生生物学效应的分子。
5. 高脂蛋白血症。
【答案】高脂蛋白血症是一种由于血中脂蛋白合成与清除混乱引起的疾病。血浆脂蛋白代谢
异常可包括参与脂蛋白代谢的关键酶,载脂蛋白或脂蛋白受体遗传缺陷,也可以由其他原因引起。
6. 变构作用。
【答案】蛋白质在行使其生物功能时空间结构往往发生一定的变化,从而改变分子的性质,这种现象称为变构现象,又称别构现象或变构作用。例如,血红蛋白表现其输氧功能时就是一个例子。
7.
是指在标准条件下(一般定为0.18mol/L阳离子浓度,400核苷酸长的片段)【答案】
测得的复性率达0.5时的Cot 值
8. 糖苷。
【答案】糖苷是指单糖半缩醛羟基与另一个分子(例如醇、糖、嘌呤或嘧啶)的羟基、胺基或巯基缩合形成的含糖衍生物。
二、问答题
9. 列表比较糖原合成与糖原分解的异同。
【答案】如表所示
表
10.假定你决定从一种新的生物Streptococcus bartelium体内纯化核糖核酸酶,你选择盐析作为纯化的第一步,随着你JJnA 硫酸铵到细胞裂解物之中,进行分级分离。如果你添加的盐浓度是0.5mol/L、lmol/L、1.5mol/L、2mol/L、和2.5mol/L,你如何确定你要的蛋白质在哪一级分离沉淀之中?
如果你选择离子交换层析作为纯化核糖核酸酶的第二步,同样需要确定哪一部分含有目标蛋白。你会使用哪一种离子交换树脂? 为什么? 你如何从交换树脂中洗脱下你的目标蛋白?
你将纯化的蛋白质走SDS-PAGE ,在考马斯亮蓝染色以后,你看到一条单一的
种蛋白质是一种核糖体蛋白,于是你决定再进行一次蛋白质染色,这一次你发现了一条
小的条带。这一次染色方法是什么?为什么
会多显示出新的条带,你如何分离这两种蛋白质?
【答案】(1)在纯化蛋白质过程中,首先需要建立一种测定活性的方法。测定核糖核酸酶活性的方法是利用其将RNA 降解成单个核苷酸的活性。使用放射性标记的NTP ,可转录出带放射性标记的RNA 。以此作为核糖核酸酶的底物,将其与含有酶的部分保温,然后用TCA 沉淀,再使用特定的滤膜过滤,通过测定流过滤膜的带有同位素标记的核苷酸的放射性,可测定出纯化物中酶活性的高低。
(2)既然核糖核酸酶的底物是磷酸核糖骨架带负电荷的RNA , 核糖核酸酶本身很可能带正电荷。因此,可考虑阳离子交换树脂来纯化核糖核酸酶。在低盐浓度下上柱,以吸附核糖核酸酶,然后用高盐缓冲液洗脱出核糖核酸酶。
(3)考马斯亮蓝染色的灵敏度仅能检测出含有大约lOOng 的条带,而银染的灵敏度达10ng 。所以使用考马斯亮蓝染色看不到的条带有可能通过银染看到。
为了将
的核糖体蛋白与的核糖核酸酶分开,
可使用凝胶过滤层析。的核糖核酸酶应该先流出来。
大小的大条带。为了确定它是不是核糖核酸酶,你决定将条带切下,然后测序。然而,你吃惊的发现,这
11.什么激素可分为水溶性激素(如肾上腺素)和脂溶性激素(如固醇类激素)。大部分水溶性激素不进入靶细胞里,而是通过作用于细胞表面的受体发挥它的效应;脂溶性激素不仅能进入靶细胞,而且能在细胞核内发挥作用。两类激素作用的模式与它们的溶解性、受体位置有什么相关性?
【答案】水溶性激素不易穿过细胞膜,所以它与靶细胞表面的受体结合,激发细胞内的第二
信使(如)形成,通过第二信使发挥作用;脂溶性激素可以通过细胞膜进入细胞内,与细胞内受体结合,
作用于影响基因表达。
12.试述生物膜的两侧不对称性。
【答案】生物膜的两侧不对称性表现在以下几个方面。(1)磷脂组分在膜的两侧分布是不对称的。(2)膜上的糖基(糖蛋白或糖脂)在膜上的分布不对称,在哺乳动物中脂膜都位于膜的外表面。(3)膜蛋白在膜上有明确的拓扑学排列。(4)酶分布的具有不对称性。(5)受体分布具有不对称性。膜两侧不对称性保证了膜的方向性功能。
13.简述关于酶作用专一性的学说。
【答案】(1)“锁钥学说”认为底物分子或底物分子的一部分像钥匙那样,专一地契入到酶的活性中心部位,强调只有固定的底物才能契入与它互补的酶表面。
(2)“三点附着学说”认为立体对应的一对底物虽然基团相同,但空间排列不同,这就可能出现这些基团与酶分子活性中心的结合基团能否互补匹配的问题,只有三点都互补匹配时,酶才作用于此底物,否则酶不能作用于它。
(3)“诱导契合假说”认为当酶分子与底物分子接近时,酶蛋白受底物分子的诱导,其构象发生有利于与底物结合的变化,酶与底物在此基础上互补契合,进行反应。
14.(1)从上如何区分竞争性抑制与非竞争性抑制?
(2
)为什么竞争性抑制不改变
(3
)为什么非竞争性抑制不改变
的值会增加,
在非竞争性抑制的情况下的大小(4)从分子机制上说明竞争性与非竞争性抑制? 【答案】(1
)在竞争性抑制的情况下
不会改变。
(2)竞争性抑制只是阻碍了底物的结合并不影响催化。
(3)非竞争性抑制并不影响酶与底物的结合。
(4)竞争性抑制剂与酶的活性部位结合,从而阻止了底物与酶的结合。非竞争性抑制剂与非活性部位结合导致酶的构象发生变化,导致活性部位与底物的结合能力与转化底物的能力下降。
15.试描述DNA 克隆。
【答案】外源DNA 的一部分导入合适的载体,通常使用的是细菌的质粒,当细菌生长时产