题目：壬基酚对中国林蛙蝌蚪的急性毒性和雌激素效应

随着工农业生产的快速发展，环境化学污染日益严重。烷基酚聚氧乙烯醚（alkylphenol polyethenoxy ethers, APEs）类物质，是一类在工业生产和日常生活中广泛应用有机化合物，其降解产物壬基酚（nonylphenol NP）和辛基酚（octylphenol OP）具有环境雌激素活性，对动物的个体生存和种系繁衍构成了极大的威胁。本研究以壬基酚水体染毒的方式，对中国林蛙蝌蚪分别进行急性和慢性染毒实验，旨在揭示壬基酚对中国林蛙蝌蚪的急性毒性、对生长发育的影响、对性腺分化的效应及其机制。实验的主要结果及结论如下：
1. 在水温21±1℃条件下，通过急性毒性实验，测得中国林蛙蝌蚪暴露在NP中24、48、72、96h的蝌蚪死亡几率与NP浓度对数的回归方程分别为y=8.4087x+10.202、y=9.5104x+11.745、y=10.284x+12.498、y=10.619x+13.095；半数致死浓度（LC50）分别为0.24、0.20、0.19、0.17 mgL－1。安全浓度（SC）为0.017 mgL－1；96h的零致死浓度（LC0）为0.14 mgL－1。
2.将26期林蛙蝌蚪暴露在100，60，30，10gL－1 NP中连续养殖直至完全变态，并以3、0.3gL－1雌二醇（E2）作为阳性对照，分别统计林蛙蝌蚪暴露于NP和E2中20天、40天以及完成变态后幼蛙的体重、全长以及从26期到完全变态所需的时间。结果表明，在96h零致死浓度下，NP不影响林蛙蝌蚪的死亡率。100、10gL－1NP与3gL－1E2的效应相似，可降低蝌蚪完全变态后幼蛙体重，滞后蝌蚪变态时间，但对死亡率没有影响。说明在100gL－1以下，NP不是通过直接损伤机体、而是通过干扰内分泌活动影响林蛙幼体生长发育。
3.通过统计比较野生蝌蚪染毒NP的幼蛙和母体染毒NP后子代幼蛙的性别比例，研究NP对性腺分化的影响，结果表明：（1）NP浓度在100gL－1和30gL－1之间时，将诱导野生林蛙蝌蚪的雌性比例上升。并且，雌性比例与NP浓度呈正相关，说明NP可导致野生蝌蚪雌性化。30gL－1 NP与0.3gL－1E2效应相似，表明NP的雌激素效应浓度是E2的100倍。（2）NP仅通过雌性亲代染毒对其子代性腺分化产生隔代效应，而不通过雄性亲代产生隔代效应。（3）通过对母体染毒的子代蝌蚪再次染毒，幼蛙雌性比例可进一步上升，雌性比例最高可达到85.2%，比野生雌性比例高出40%。这些结果说明，水域中非致死剂量的NP会影响到两栖动物幼体性腺的正常发育，进而影响雌雄比例失衡。
4.采用免疫组织化学方法检测NP对野生林蛙蝌蚪变态后幼蛙性腺中睾酮（testosterone T）、雄激素受体（androgen recepter AR）、芳香化酶 (aromatase ARO)、雌激素受体（estrogen receptor ER）免疫阳性反应的影响，结果表明：（1）NP可降低幼蛙性腺中T的水平；（2）NP与E2效应相似，可提高芳香化酶的水平；（3）NP与E2效应相似，可降低性腺中AR的含量；（4）NP的浓度仅为100gL－1时，上调雄性精巢中ER的含量，其他浓度对ER没有明显效应。（5）NP对精巢和卵巢中T、AR、ARO、ER的影响规律基本一致。推测NP通过提高ARO活性将T转化为E2，从而使E2含量相对升高，E2可抑制AR的表达，使T和AR结合的能力减弱，最终诱导性腺向雌性分化。所以，NP显示出与E2相似的效应。