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一、名词解释

1． 拓扑异构酶（topoisomerase ）。

【答案】拓扑异构酶是指通过切断DNA 的一条或两条链中的磷酸二酯键，然后重新缠绕和封口来改变DNA 连环数的酶。拓扑异构酶I 通过切断DNA 中的一条链减少负超螺旋，增加一个连环数。某些拓扑异构酶II 也称为DNA 促旋酶。

2． 脂肪酸的α-氧化。

【答案】脂肪酸的α-氧化是直接以游离的脂肪酸为底物，在α-C 上氧化，每进行一次氧化产

生少一个C 的脂肪酸和

3． 酰基载体蛋白（acyl carrier protein, ACP）。

【答案】酰基载体蛋白是一种小分子蛋白质，为脂酸合酶复合物的组成成分，但不具催化活性，在脂酸合成中作为酰基的载体。

4． 结合蛋白质。

【答案】结合蛋白质是指除含有氨基酸外还含有其他化学成分（如糖、脂肪、核酸、磷酸及色素等），保证蛋白质的正常生物学活性的蛋白质分子。例如：核蛋白、糖蛋白、脂蛋白、金属蛋白、黄素酶、磷蛋白等。

5． 生糖氨基酸。

【答案】生糖氨基酸是指在氨基酸分解过程中，凡能转变为丙酮酸、a-酮戊二酸、琥珀酸、延胡索酸和草酰乙酸的氨基酸，因为这些三羧酸循环中间物和丙酮酸都可转变为葡萄糖。

6． 分子杂交（hybridization ）。

【答案】杂交分子是指当两条不同来源的DNA （或RNA ）链或DNA 链与RNA 链之间存在互补顺序时，在一定条件下可以发生互补配对形成的双螺旋分子，形成杂交分子的过程称为分子杂交。

7． 抗体酶（abzyme ）。

【答案】抗体酶即催化性抗体，是抗体的高度特异性与酶的高效催化性巧妙结合的产物，其本质上是一类在可变区赋予了酶活性的免疫球蛋白。

8． 冈崎片段

【答案】冈崎片段合成的一组新的短

为 是指在不连续复制过程中，沿着后随从链的模板链个核苷酸残基。这些新的短片段片段。其长度在真核与原核生物当中存在差别，真核生物的閃崎片段长度

复制的科恩伯格机理提供了依据。个核苷酸残基，

而原核生物的长度为

随后又被连接酶连接形成较长的片段。冈崎片段的发现为

二、问答题

9． 为何耐热性的DNA 聚合酶在聚合酶链反应中具有很重要的地位？

【答案】聚合酶链反应的步骤需要使用较高的温度，使用耐热的RNA 聚合酶可以避免每一轮扩增时都补充新的聚合酶。如果聚合酶不耐热，补充新酶将是不可避免的。

10．真核生物的mRNA 前体加工过程包括哪几个步骤？

【答案】在原核生物中转录翻译相随进行，多基因的mRNA 生成后，绝大部分直接作为模板去翻译各个基因所 编码的蛋白质，不再需要加工。但真核生物里转录和翻译的时间和空间都不相同，需要进行加工。真核细胞hnRNA 的加工包括4个步骤：（l ）hnRNA 被剪接（splicing ）, 除去由内含子转录来的序列，将外显子的转录序列连接起 来。（2）在末端连接上一段

末

个腺苷酸的多聚腺苷酸（polyA ）的“尾巴”结构。不同mRNA 的长度有很大差异。（3）在端连接上一个“帽子”结构（4）在内部少数腺苷酸的腺嘌呤6位氨基发生甲基化

11．简要说明固氮酶的结构和功能，固氮酶对氮素固定作用的生化反应？

【答案】（1）固氮酶是一个多聚蛋白，由组分和组分组成。组分和两个乒乓亚基形成

该组分中含有4个结构，的相对分子质量为白由两个相对分子质量约

连接桥，一次连接桥和两个铁-钼辅助因子，所以常被称为铁钼蛋白。组分II 由两个两个亚基之间有一个完全相同的亚基组成，其相对分子质量约 为

（2）在固氮酶系统中，铁蛋白以只可传递一个电子，所以是生物固氮反应中的限速因素。该组分常被称为铁蛋白。 个分子与1分子铁-钼蛋白结合。在固氮过程中，铁蛋

的还原反应主白提供高还原能电子，所以又称还原酶，钼-铁蛋白是固氮酶系统中的固氮中心，

NADPH 是固氮酶系统中的还原辅因子，NADPH 要在钼-铁蛋白上进行。提供固氮反应所需电子，

需先将电子转移到一种铁氧还蛋白，再经还原 型铁氧还蛋白供给固氮酶系统所需之电子，固氮反应由ATP 提供能量，反应如下：

12．简述的方法和意义。

标记的【答案】将聚丙烯酰胺凝胶电泳的变性DNA 片段转移到硝酸纤维素薄膜上，再与

变性DNA 探针进行杂交。

13．现有600mg 分子量为132000的寡聚蛋白质，在弱碱性下进行2，4，-二硝基氟苯反应，反应完全后进行完全水解，发现含有5.5mg 的DNP-异亮氨酸（C11H1606N3）。问该蛋白质有多少条肽链？

【答案】DNP-异亮氨酸的分子量约为286。

（1）水解获得的DNP-异亮氨酸的毫摩尔数为5.5/286。由于2, 4-二硝基氟苯只与游离氨基端反应，所以600mg 的该寡聚蛋白质的肽链的毫摩尔数为5.5/286。

（2）该寡聚蛋白质的毫摩尔数为600/132000, 所以蛋白质所含的肽链的数目

为

4

14．测定丙氨酸转氨酶活性的反应系统包括过量而纯净的乳酸脱氢酶和NADH 。在该系统中，丙氨酸消失的速度与分光光度法测定的NADH 消失的速度是相等的。该系统是如何运行的? 请予以说明。

【答案】丙氨酸转氨酶活性测定的这个方法是一种偶联反应试验的例子。在偶联反应中，缓

慢的转氨作用的产物丙酮酸很快地被后续反应消耗掉。因此，乳酸脱氢酶催化一种可指示的反应。

由于每使1分子的丙氨酸转氨就要使1分子的NADH 消失，因此，丙氨酸消失的速度与NADH 消失的速度相等。NADH 的消失可通过用分光光度法于340nm 观察NADH 的消失来监测。两个反应过程如图所示。

图 丙氨酸代谢途径

15．RNA 酶为什么只能水解RNA , 不能水解DNA?

【答案】RNA 酶是在一个碱性的微环境中发挥作用的酶，RNA 的磷酸酯易于被碱水解，这是因为RNA 的核糖上有

产生核苷糖无

RNA

酶的

以便于从核糖在碱的作用下形成磷酸三酯，而磷酸三酯极不稳定，随即水解，核苷酸和核苷酸。DNA 的脱氧核作为碱，

环磷酸酯。该环磷酸酯继续水解产生不能形成碱水解的中间产物，故对碱有一定的抗性。 是通过广义酸碱进行催化作用。第一步生成环磷酸酯上除去一个质子，

与磷酸形成

环磷酸酯然后作为一种酸