● 摘要
磁场结合抗肿瘤药物对肿瘤生物效应的初步研究
王淑瑞
摘要 目的:研究磁场与抗肿瘤药物对肿瘤细胞的协同杀伤作用,并且建立B16黑色素移植瘤模型,研究磁场对在体B16黑色素瘤的影响。
方法:
1. 采用MTT法检测了抗肿瘤药物(紫杉醇)和磁场对K562细胞(人白血病细胞)的增殖的影响。2. 通过倒置显微镜、原子力显微镜、单细胞凝胶电泳方法及流式细胞仪分析检测技术进行磁场结合抗肿瘤药物对K562细胞协同杀伤效应的研究。3. 采用MTT法检测静磁场或/和阿霉素对B16黑色素瘤细胞的影响。4. B16黑色素瘤移植模型的重建,并调查了静磁场对在体B16黑色素瘤的影响。
结果:
1.(1)K562细胞以1×105cells/mL的细胞密度接种,MTT检测的结果表明,磁场结合紫杉醇处理K562细胞时,磁场同10ng/mL紫杉醇处理K562细胞24h后,可以增加紫杉醇的抗肿瘤效应。
2. 10ng/mL紫杉醇联合磁场处理K562细胞24h后,细胞形态改变,细胞膜不完整,细胞表面出现突起、孔洞;SCGE检测的结果表明,磁场与10ng/mL的紫杉醇联合作用K562细胞24h后可以增加细胞DNA的损伤程度,具有协同杀伤作用;检测细胞周期分布发现,紫杉醇结合磁场处理细胞24h后,大部分细胞被阻滞于S期与G2/M期,并且出现凋亡峰(亚二倍峰)。
3. B16细胞以5×104cells/mL的细胞密度接种,经静磁场处理,MTT检测的结果表明曝磁24h时细胞增殖即受到抑制(p0.05);在体肿瘤生长状况为低剂量组肿瘤出现时间最晚,但肿瘤生长速度最快,高剂量组肿瘤出现时间最早,但肿瘤生长速度最慢。解剖观察肿瘤的转移特性,发现各组荷瘤小鼠中都有肿瘤的肺、肾、肝等转移灶,且肿瘤优先发生肺转移。
5. 磁场对在体B16黑色素瘤影响的研究表明,磁场作用能减少肿瘤组织中的血管形成,肿瘤组织中可见大量的坏死区域,纤维组织增生;彗星电泳检测表明,磁场未对荷瘤小鼠造成遗传毒理损伤。
结论:稳恒磁场结合抗肿瘤药物(紫杉醇)在一定的条件下对K562细胞有协同杀伤效应,主要表现在细胞形态受损、细胞DNA损伤与细胞的周期分布改变。静磁场结合阿霉素可对B16细胞有协同杀伤效应。实验重建了B16黑色素移植瘤模型,磁场处理的结果表明在体B16黑色素瘤的肿瘤组织中血管减少,纤维组织增生,肿瘤组织中可见大量的坏死区域。
关键词:磁场 MTT法 原子力显微镜 单细胞凝胶电泳 细胞周期
紫杉醇 阿霉素 B16黑色素瘤