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一、名词解释

1． 等电聚焦电泳。

【答案】等电聚焦电泳（IFE , isoelectric focusing electrophoresis）是指利用一种特殊的缓冲液（两性电解质）

在聚丙烯酰胺凝胶内制造一个pH 梯度的电泳方法，电泳时每种蛋白质迀移到它的等电点（pI ）处，即梯度中的某一pH 时，由于表面静电荷为零而停止泳动。 2． 的二面角。

【答案】多肽链中，

用

. 表示；绕Ca-C

键轴旋转的角度常用表示，

它们被称为单位的相对位置。

3． 无规卷曲。

【答案】无规卷曲，又称卷曲（coil ），是指在蛋白质中，没有一定规则，结构比较松散的一些肽段的结构。

4． 增色效应（hyperchromiceffect ）。

【答案】增色效应（hyperchromice ffect）是指核酸变性时由于高级结构被破坏，碱基暴露程

度增加而使得的光吸收值升高的现象。

5． 蛋白质拼接（protein splicing ）。

【答案】蛋白质拼接是指将一条多肽链中的一段氨基酸序列切除、同时将两端的氨基酸序列连接在一起的翻译后加工方式。 6． （尿苷二磷酸葡萄糖）。

【答案】葡萄糖-1-

磷酸和

7．

溶原性细菌

在

（尿苷二磷酸葡萄糖）是指糖原生物合成葡萄糖基供体的活性形式，由葡萄糖焦磷酸化酶催化生成。

的二面角。

的二面角决定了由

连接的两个肽

和

都是单键，可以自由旋转。其中，

绕

键轴旋转的角度常

【答案】溶原性细菌是指温和噬菌体的基因与宿主菌染色体基因组整合，带有前噬菌体的细

菌。

8． Chargaff 定律。

【答案】Chargaff 定律是指通过纸层析对多种生物DNA 的碱基组成进行分析，发现DNA 中的腺嘌呤数目与胸腺嘧啶的数目相等（A=T），胞嘧啶和鸟嘌呤数目相等（C=G）的一种规则。

二、问答题

9． 从一种植物叶中得到了粗细胞提取液，每毫升含蛋白质32mg ，在提取条件下

，的催化反应速率为

，将饱和度取50ml 提取液，用硫酸铵盐析分析

测定其反应速度为

再溶于10ml 水中，此溶液的蛋白质浓度为50mg/ml, 从中取出

计算：

（1）提取过程中，酶的回收百分率； （2）酶的提纯倍数。

【答案】酶的提纯常包括两方面的工作，一是把酶制剂从很大体积缩到较小体积；二是把制剂中大量的杂质蛋白和其他大分子分离出去。本题采用的是盐析法。为了判断分离提纯的优劣，一般用两个指标来衡量：一是总活力的回收，二是比活力提高的倍数。

粗提取液：蛋白质浓度=32mg/ml，50ml 提取液含总蛋白质=50X32=1600mg。蛋白质的活力单位数

=

，现取

_

则所含蛋白质

则比活力：二活力单位数/

蛋白质

14/32U/mg

总活力

. 提取液

的沉淀物，

提纯液：蛋白质浓度=50mg/ml, 10ml 提纯液内含总蛋白质=50X10=500mg。蛋白质的活力单位数=0.65pmol/min, 现取10叫，则所含蛋

白质则比活力2=活力单位数/蛋

白质

=65/50U/mg

所以酶的回收百分率=总活力2/总活力产[（65/50）×500]/[（14/32）×1600]=93%。酶的

提纯倍数=比活力2/比活力产（65/50）/（14/32）=3（倍）。

10．对于表达载体有何要求？

【答案】

表达载体如

质粒，具有所有正常克隆载体的组成（如复制起始点，可供选择的

聚

标记，多克隆位点），而且它还具有使插入的DNA 被转录的能力。它具有RNA 聚合酶，如酶的细胞系一起使用。

11．尽管不同生物DNA

的应大的变化。这种现象如何解释？

【答案】由于一个氨基酸通常有多个密码子（简并性），可变的碱基出现在密码子的第三位。摆动位置上核苷酸 的变化改变了酸。所以

比例，但并不一定改变密码子所代表的氨基

的比例变化和蛋白质氨基酸比例的变化不存在对应关系。

合酶的启动子，以及终止序列。这些都位于多克隆位点附近，这些载体与可以产生T7RNA 聚合

比例变化很大，但是各种生物的氨基酸比例却没有相

12．请简述生物膜的流动镶嵌模型及其生物学意义。

【答案】流动镶嵌模型认为细胞膜由流动的脂双层和镶嵌在其中的蛋白质组成。磷脂分子以疏水性尾部相对，极性头部朝向水相组成生物膜骨架，蛋白质或嵌在脂双层表面，或嵌在其内部，或横跨整个脂双层，表现出分布的不对称性。

生物学意义：流动镶嵌模型强调质膜的流动性和膜蛋白质分子分布的不对称性，能够说明质膜的通透性以及各种膜结构的特殊性。

13．一种嘌呤和嘧啶生物合成的抑制剂往往可以用做抗癌药和（或）抗病毒药，为什么？

【答案】根据癌细胞或病毒在宿主体内生命活动的基本特点一一繁殖速度快来考虑，嘌呤和嘧啶核苷酸是遗传物质生物合成的基本原料，抑制了这些核苷酸的生物合成，则抑制了癌细胞或

病毒遗传物质（

或）的合成，降低其繁殖速度，从而减少它们的生存几率。

14．简述信号肽假说的基本内容。

【答案】蛋白质合成后的靶向输送原理，有几种不同的学说，信号肽假说是目前被普遍接受的学说之一。分泌性 蛋白质的初级产物N 端多有信号肽结构，信号肽一旦合成（蛋白质合成未SRP 与内质网膜内侧面的受体即停泊蛋白终止），即被胞浆的信号肽识别蛋白（SRP ）结合，（DP ）结合，组成一个输送系统，促使膜通道开放，信号肽带动合成中的蛋白质沿通道穿过膜，信号肽在沿通道折回时被膜上的信号肽酶切除，蛋白质在内质网和高尔 基体经进一步修饰（如糖基化）后，即可被分选到细胞的不同部位。

15．重组DNA 技术一般都需要哪些必要条件？

【答案】限制酶切割DNA ，DNA 连接酶连接DNA ，合适的载体用来接收外源DNA ，细胞系用于接收载体，以及筛选正确的转化体。

16．为什么说乙醛酸循环是三羧酸循环的支路？

【答案】乙醛酸循环是一个存在于植物和微生物的有机酸代谢环，五步反应中有三步与柠檬酸循环中的一样，另有两步不同的是:异柠檬酸不经脱羧而直接被其裂合酶裂解成琥珀酸和乙醛酸（因而得名），后者再与另一分子乙酰-CoA 经苹果酸合酶催化缩合成苹果酸。总反应式:2乙酰

-→琥珀酸

+2C0ASH+NADH+

表明，通过绕行柠檬酸循环中的两步脱羧反

应，每轮乙醛酸循环可由两分子乙酰-CoA 净得一分子琥珀酸或草酰乙酸，后者既可进入柠檬酸循环代谢，亦可经由糖异生途径转化为葡萄糖。

乙醛酸循环的意义：（1）乙酰CoA 经由该循环可以和柠檬酸循环相偶联以补充其中间产物的缺失；

（2）乙醛酸循环是微生物利用乙酸盐作为碳源的主要途径之一；

（3）乙醛酸循环是萌发种子和油料植物等将脂肪转变为糖和氨基酸的途径。