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题目:秦岭岩白菜和七叶鬼灯檠中几种多酚类化合物的HPLC分析

关键词:秦岭岩白菜;七叶鬼灯檠;熊果苷;没食子酸;岩白菜素;儿茶素;丹参素;高效液相色谱法

  摘要


秦岭岩白菜为民间常用中草药,最早载于清《分类草药性》,系虎耳草科岩白菜属(Bergenia Moench)植物;七叶鬼灯檠系虎耳草科鬼灯檠属(Rodgersia Gray)植物,它们具有治疗虚弱头晕,劳伤咳嗽的功能。关于这两种植物中多酚类化合物的测定有岩白菜素的报导,但未见岩白菜素、儿茶素、熊果苷和没食子酸同时分析测定的报导。
本论文包括综述和研究报告两部分内容
   第一部分:综述
   1. 秦岭岩白菜和七叶鬼灯檠的研究概况
包括秦岭岩白菜和七叶鬼灯檠的化学成分研究和药理研究现状两部分内容。这两种植物中有多酚类、黄酮类、蒽醌类、有机酸类和其他无机物质。它们的药理活性广泛。
2. 多酚的研究进展
包括多酚的药理和测定方法研究进展;岩白菜素、儿茶素、熊果苷和没食子酸的药理活性和高效液相色谱测定方法研究进展。
第二部分:研究报告
分两个部分:七叶鬼灯檠中多酚类化合物提取工艺及含量测定研究;建立虎耳草科的两种植物秦岭岩白菜和七叶鬼灯檠不同部位熊果苷、没食子酸、岩白菜素和儿茶素含量测定的高效液相色谱方法。
一、研究了七叶鬼灯檠中多酚类化合物提取工艺及含量测定。采用单因素轮换和L9(34)正交试验考察了提取溶剂、提取溶剂的浓度、提取溶剂的pH值、超声、超声时间、加热提取时间和提取次数等参数对多酚类化合物提取的影响,并对其总多酚含量进行了测定。确定的最佳提取工艺为:以料液比为1:10的60%的甲醇中性溶液,不加超声连续回流提取3次,每次30min。在此提取条件下,总多酚提取率可达98.34%,测得总多酚含量为28.32%。
二、建立虎耳草科植物秦岭岩白菜和七叶鬼灯檠不同部位熊果苷、没食子酸、岩白菜素和儿茶素含量测定方法。色谱柱Agilent C18 ( 250mm×4.6mm, ID=5µm );流动相:A:甲醇/乙腈=1/4  B:pH=3.5的磷酸缓冲盐溶液。梯度洗脱程序为:0-10min: A 8%;10-30min: A 8%-25%;30-50min: A 25 %。流速为0.5mL/min,230nm作为检测波长,色谱柱柱温30℃,选用丹参素作为内标。结果表明:熊果苷、没食子酸、岩白菜素和儿茶素的标准曲线都有比较好的线性关系(r2>0.9982),而且线性范围比较宽。这四种成分日内精密度的RSD值均小于1.4%,平均回收率在95.66-104.9%范围内。
在选定的色谱条件下测定,色谱峰形和分离度都比较满意,可用于同类化合物的测定。对不同部位的这四种成分都进行了测定,可用于这两种植物的质量控制。
本实验对七叶鬼灯檠中多酚类化合物的提取工艺进行了研究;建立了HPLC同时测定熊果苷、没食子酸、岩白菜素和儿茶素的方法,并应用于虎耳草科植物秦岭岩白菜和七叶鬼灯檠不同部位的这四种成分的含量测定。为进一步深入研究和开发应用秦岭岩白菜和七叶鬼灯檠奠定了基础。