2017年湖北师范学院生命科学学院618分子生物学考研题库
● 摘要
一、名词解释
1． Molecular Bescons
【答案】分子信标。分子信标是指一种具有自身配对区的DNA 寡核苷酸分子探针，利用荧光标记探针的碱基配对原理，通过观察探针荧光显示或淬灭的现象，确定目的基因的分子标记。
2． polysome
【答案】多核糖体。多核糖体是指蛋白质合成过程中结合在同一条mRNA 上的多个核糖体，能同时合成若干条蛋白质多肽链。
3． 核酸分子杂交（hybridization ）
【答案】核酸分子杂交是指应用核酸分子的变性和复性的性质，使来源不同的DNA （或RNA ）片段，按碱基互 补关系形成杂交双链分子的一项实验技术，杂交双链可以在DNA 与DNA 链之间，也可在RNA 与DNA 链之间 形成。
4． 拓扑异构酶（topoisomerase ）
【答案】拓扑异构酶是指能在闭环DNA 分子中改变两条链的环绕次数的酶，其作用机制是先切断DNA ，让DNA 绕过断裂点以后再封闭形成双螺旋或超螺旋DNA 。
5． 内含子（intron ）与外显子（exon ）
，只转录，在【答案】内含子（intron ）是指真核基因中的非编码序列，又称插入序列（IVS ）前体mRNA 加工时被剪切掉;
外显子（exon ）是指真核基因中的编码序列，是一个基因表达为多肤链的部分。
6． YAC
【答案】酵母人工染色体。酵母人工染色体是指一种能够克隆长达400Kb 的DNA 片段的载体，含有酵母细胞中 必需的端粒、着丝点和复制起始序列，可用于基因组大片段库构建。
7． Gene Family
【答案】基因家族。基因家族是指一组功能相似且核苷酸序列具有同源性的基因，可能由某一共同祖先基因（ancestral gene
）经重复
和突变产生。基因家族的成员可以串联排列
，如rRNA 、tRNA 在一起，形成基因族（gene cluster）或串联重复基因（tandemly repeated genes）
和组蛋白的基因；有些基因家族的成员也可位于不 同的染色体上，如珠蛋白基因；有些成员不产生功能产物，这种基因称为假基因（Pseudogene ）。
8． Blue-white screening
【答案】蓝白斑筛选。蓝白斑筛选是指基于半乳糖苷酶系统的一种重组子筛选方法。其基本原理是很多载体都
携带一段来自大肠杆菌的序列的宿主细胞。宿主经上述质粒转化后，整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补
活性蛋白质。由
互补而产生的
操纵子DNA 区段，
其中有半乳糖苷酶基因
的调控序列和前146个氨基酸的编码信息，这种载体适用于可编码半乳糖苷酶C 端部分
基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完，产生完整
细菌在诱导剂
的作用下，在生色底物
存在时
产生易于识别的蓝色菌落。而当外源DNA 插入到质粒的多克隆位点后，几乎不可避免地导致无互补能力的氨基端片段，使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。
二、简答题
9． 简述乳糖操纵子的调控模型。
【答案】（1）基本组成部分 依次排列着 ①启动子； ②阻遏基因； ③操纵基因；
④ 结构基因：依次编码半乳糖苷酶、半乳糖苷透性酶和（2）调控过程 ①乳糖的负控诱导
a. 乳糖不存在时，阻遏蛋白阻碍结合到操纵区，阻碍RNA 聚合酶与启动子P 的结合，下游结构基因无法转录。
b. 乳糖存在时，乳糖与阻遏蛋白的变构位点结合，阻遏蛋白失去活性而不与操纵区结合，下游基因能正常 转录，产生相应的酶，使大肠杆菌能利用乳糖。
②葡萄糖效应
当葡萄糖与乳糖同时存在，
葡萄糖的代谢产物能降低细胞内法被利用。
含量，
从而所形成的
复合物减少，影响其与启动基因结合，导致下游结构基因的转录无法进行使得乳糖无
硫半乳糖苷转乙酰基酶三种酶。
10．一单链DNA 样品按双脱氧链终止法测得如图结果，请按图读出被测DNA 样品的碱基顺序。
图 样品测得结果
【答案】被测DNA 样品的碱基顺序为：
可依次阅读合成片段的碱基排列顺序。
11．什么是封闭复合物、开放复合物以及二元复合物?
【答案】（1）封闭复合物是指RNA 聚合酶全酶与DNA 组成的复合物。此时DNA 仍处于双链状态，不能起始RNA 的合成。
（2）开放复合物是指RNA 聚合酶全酶所结合的DNA 序列中有一小段双链被解开，封闭复合物转变形成的复合物。此时的复合物形成转录泡，酶的构象也发生改变，β和β' 亚基牢固夹住DNA ，这种由启动子与RNA 聚合酶的复合物在这里能进行RNA 的起始合成。
（3）三元复合物是指由开放复合物与最初的两个NTP 相结合并在两个核苷酸之间形成磷酸二酷键后所形成的包括RNA 聚合酶、DNA 和新生RNA 的复合物。
12．简述双向电泳研究蛋白质组的优缺点。
【答案】（1）优点: ①双向电泳
技术，特别是固相pH 梯度等电聚焦为第一向的双向电泳技术是当前分辨
率最高，信息 量最大的电泳技术。目前，一次双向电泳最高可达11000个蛋白点的分辨率；
②双向电泳能将组织和细胞中成千上万种蛋白高分辨，高灵敏的分离以满足随后的质谱分析，结合质谱鉴定 技术可査明大型蛋白复合物各组分，与其他生物技术相结合，可以快速准确地发现和鉴定新的蛋白质。
（2）缺点:
①低拷贝蛋白质的鉴定受限； ②极酸或极碱蛋白的分离比较困难； ③分子质量极大
或极小
蛋白的分离较难；
④难溶蛋白的检测比较困难；
⑤由于蛋白多样性的存在，很难确定一张正常状态的图谱作为病理状态的对照； ⑥重复性仍然不理想；
⑦得到高质量的双向凝胶电泳需要精湛的技术。
根据片段端的双脱氧碱基，
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