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一、名词解释

1． 磷酸单酯键。

【答案】磷酸单酯键是单核苷酸分子中，核苷的戊糖与磷酸的羟基之间形成的磷酸酯键。

2． 别构酶

【答案】别构酶是指含有别构中心的酶。别构中心在结合别构效应物以后构象发生变化，从而影响到活性中心的构象，最后改变酶的活性。

3． DNA 损伤（DNAdamage ）。

【答案】DNA 损伤是指发生在DNA 分子上的任何化学改变。

4． 核酸的变性与复性。

【答案】核酸的变性是指核酸双螺旋的氢键断裂，变成单链，并不涉及共价键的断裂的过程。

核酸的复性是指变性DNA 在适当条件下，可使两条彼此分开的链重新缔合成为双螺旋结构的过程。

5． 一碳基团。

【答案】一碳基团是指在代谢过程中，某些化合物可以分解产生的具有一个碳原子的基团。在一碳基团转移过程中起辅酶作用的是四氢叶酸。许多氨基酸的代谢过程与一碳基团的代谢有关，嘌呤与胸腺嘧啶的生物合成也与其密切相关。

6． 暗反应（dark reaction）。

【答案】暗反应是光合作用不需要光的反应，实际上是C 固定的反应，由卡尔文循环组成。

7． 沉默子（silencer ）。

【答案】沉默子是某些基因含有的一种负性调节元件，当其结合特异蛋白因子时，对基因转录起阻遏作用。

8． 终止子

【答案】终止子 是分子中终止转录的核苷酸序列。

二、问答题

9． 简述核酸分离纯化的原则和大致步骤。

【答案】（1）核酸分离纯化最重要的原则有两个：①保持核酸分子一级结构的完整性；②防止核酸分子的生物降解。

（2）核酸分离的大致步骤是：①破碎细胞；②有机溶剂（如苯酚、酚氯仿、异戊醇以及SDS ）变性蛋白，反复抽提，获得核酸制品；③密度梯度离心进一步分离不同构象的核酸；④柱层析分离变性核酸与天然核酸。

此外，还有一些特殊方法用于提纯特定的核酸。例如，

纯化，用纯的RNase 处理除去DNA 中混杂的少量RNA 。

10．怎样通过实验证实DNA 复制是双向复制还是单向复制？

【答案】通过放射自显影的方法确定。在复制开始时将E.

放在含低放射强度

培养基中生长，

数分钟后，移置含高放射性强度3H-脱氧胸苷的培养基中生长；经过一段时间后，进行放射自显影。在图像上可以看到，复制起始区的放射性标记密度低，感光还原的银颗粒密度低；继续的合成区放射性标记密度高，银颗粒 密度高。若中间密度低，两端密度高，则DNA 的复制为双向；如果起始部位既有高密度也有低密度，就表明 DNA 的复制为定点单向。研宄证明多数细胞的DNA 的复制为定点双向。但也有一些例外，如噬菌体质粒和真核细胞的线粒体等DNA 为单向复制。

11．假定你制备了一种含有丙酮酸脱氢酶系和TCA 循环所有酶的缓冲溶液，这种缓冲溶液中没有循环中的任意一种代谢中间物。

（1）如果你向缓冲溶液中加入丙酮酸、辅酶A 、

少还有其他什么产物？

（2）如果再向缓冲溶液中添加每一种循环的中间物各低？为什么？

（4）如果在（2）系统中添加重新氧化NADH 的电子受体，那么

定GDP 和 Pi 过量）。

【答案】⑴的其他的产物包括乙酰CoA 和NADH 。由于没有TCA 循环中的中间物，故GDP 和Pi 的浓度维持不变。

（2）当加入TCA 循环的每一种中间物以后，乙酰CoA 将进入三羧酸循环，先是与草酰乙酸缩合成柠檬酸，然后柠檬酸异构化成异柠檬酸，然后由于最初加入的

化，故异柠檬酸脱氢酶无法催化异柠檬酸的氧化脱羧，故检测不到

（3）没有影响，因为丙酮酸脱氢酶催化的是不可逆反应。

（4）一旦添加异柠檬酸脱氢酶将开始催化异柠檬酸的氧化脱羧，TEA 循环的抑制被

于是的产生增多，GDP

可以用亲和层析和免疫法分离的GDP 和Pi 各自预计能产生多 那么又能产生多少（3）如果在（1）系统中添加重新氧化的NADH 的电子受体，那么的产生是提高还是降的产生又有什么变化（假已被丙酮酸脱氢酶系消的释放。 解除，异柠檬酸氧化脱羧产生的-酮戊二酸还可以氧化脱羧产生

和Pi 将转变成GTP 。

12．泛肽怎样标记选择降解的蛋白质？

【答案】

泛肽标记选择降解的蛋白质是一个依赖

细胞内源蛋白。其具体过程是：

（1）泛肽羧基末端以硫酯键偶联泛素活化酶（2）泛肽转接到泛肽载体蛋白（3）泛肽-蛋白连接酶

（异肽键）；

（4）泛肽标记的靶蛋白与复合物分离。于是，靶蛋白以异肽键结合了1分子泛肽。重复以上步骤，待降解蛋白被泛肽标记，该标记蛋白进入蛋白酶体被降解。

13．生物体彻底氧化1分子软脂酸能产生多少分子ATP?

【答案】软脂酸

脂酸每经一轮

一轮氧化，产生1分子是十六烷酸，经过七轮和1分子氧化，产生8分子乙酰CoA ，1分子通过呼吸链氧乙酰CoA 然后进入三羧酸循环彻底氧化。 化磷酸化产生1.5分子ATP , 1分子通过呼吸链氧化磷酸化产生2.5分子ATP , 所以每经但因反应开始软脂酸被活化并释放 该反应需要供能； 的蛋白水解过程，主要针对半寿期短的催化泛素从E2转移，并与待降解蛋白的赖氨酸氨基形成酰胺键氧化可产生4分子A TP 。又因每分子乙酰CoA 进入三羧酸环彻底氧化产生10分子ATP 。所以每分子软脂酸彻底氧化产生ATP 的分子数为

时，用去2个高能磷酸键。所以实际上每分子软脂酸彻底氧化净产生ATP 的分子数为

14．葡萄糖的第二位碳用标记，在有氧情况下进行彻底降解。问经过几轮三羧酸循环，该同位素碳可作为C02释放？

【答案】葡萄糖的第2位用

两种可能的异构体：标记，产生经第一轮循环中生成的草酰乙酸有在第二轮循环中，两种异构体中的都可以作为释放。

15．有一个lO.Og 的糖原样品，经过甲基化和水解后能产生6mmol 的2，

（1）出现在分支点上的葡萄糖残基的百分数。

（2）每个支链上葡萄糖残基的平均数。

（3）产生了多少毫摩尔的2, 3, 6-三-0-甲基葡萄糖？

（4）如果此糖原的相对分子质量是

【答案】（1）2，甲基葡萄糖即它所含葡萄糖残基数是多少？ 甲基葡萄糖。求：分支点上的葡萄糖。lO.Og 糖原样品中

分支点上的葡萄糖残基的质量为162X6=972（mg ）, 出现在

（2）因为分支点上葡萄糖残基的百分数为

分支点上葡萄糖残基的百分数为9.72%，也就是说100个葡萄糖残基中有9.72