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2017年四川省培养单位成都生物研究所610分子生物学考研题库

  摘要

一、名词解释

1. Edman 降解(Edman degradation)

【答案】Edman 降解是指由P . Edman于1950年首先提出来的,最初用于N 端氨基酸残基分析,现在用于肽端 氨基酸序列测定的实验技术,

其原理是异硫氰酸苯酯能与多肽或蛋白质的游离一末端氨基的反应,切下与之反应的那个氨基酸残基,这样蛋白质或多肽链就减少了一个残基,而且在它的N 端又暴露出一个新的游 离的α-末端氨基,又可参加第二轮反应,如此重复,就可以测出n 个残基的顺序。

2.

【答案】核开关。核开关是指一类通过结合小分子代谢物调控基因表达的mRNA 元件,它位于特定的mRNA 区域,可以不依赖于任何蛋白质因子而直接结合小分子代谢物,继而发生构象重排,影响mRNA 活性。

3. 感受态细胞(competent cell)

【答案】感受态细胞是指受体细胞经过一些特殊方法(如CaCL 等化学试剂)的处理后,细胞膜的通透性发生变化,成为能容许外源DNA 的载体分子通过的细胞。

4. 断裂基因

【答案】断裂基因是指在真核生物结构基因中,编码某一个蛋白质不同区域的各个外显子并不连续排列在一起, 而常常被长度不等的内含子所隔离,形成镶嵌排列的断裂方式。所以,真核基因常被称为断裂基因。

5. 等电聚焦

【答案】

等电聚焦 是指利用蛋白质分子或其他两性分子的等电点的不同,在一个稳定的、连续的、线性pH 梯度中进行蛋白质的分离和分析的技术。

6. 突变

【答案】突变是指由自身或环境因素导致的DNA —级机构的改变,主要包括碱基的增添、缺失或改变等,染色体结构的畸变也会导致DNA 的突变。

7.

【答案】泛素(遍在蛋白)。泛素是指一种存在于大多数真核细胞中,主要功能是标记需要分解掉的蛋白质,使其被水解的小蛋白。

8. Non-Watson-Crickbasepairing

【答案】非沃森-克里克式碱基配对。非沃森-克里克式碱基配对是指不完全依照Α-T/U,C-G 配对的一些碱基配对现象,如U-G 配对。

9. TATA 框

【答案】TATA 框是指位于基因转录起始点上游-30p~-25bp(真核)或-10bp (原核)的一段保守性较高的序列,控制转录起始的准确性和频率,因共有序列为TATAAAA 而得名。

10.Nonsence mutation

【答案】无义突变。无义突变是指由于结构基因中某个碱基的替换,使得原来编码某一氨基酸的密码子突变为终 止密码子UAA 、UGA 、UAG 中的一种,致使肽链的合成提前终止,肽链缩短,产生无活性的多肽片段的突变。

二、填空题

11.研究蛋白质相互作用可以采用_____、_____、_____等方法。

【答案】酵母双杂交;免疫共沉淀;噬菌体展示

12.RNA 聚合酶在链延伸前会合成几段小于10个碱基的RNA 短链,这一现象称为_____。

【答案】流产起始

【解析】转录起始后直到形成9个核苷酸短链的过程是通过启动子阶段,此时RNA 聚合酶一直处于启动子区,新生的RNA 链与模板DNA 链的结合小牢固,很容易从DNA 链上掉下来并导致重新转录,这种现象称为流产起始。

13.DNA 物理图谱是DNA 分子的_____片段的排列顺序。

【答案】限制性内切酶酶解

,以【解析】物理图是指以已知核苷酸序列的DNA 片段(序列标签位点,STS )为“路标”

碱基对作为基 本测量单位(图距)的基因组图。物理图的主要内容是建立相互重叠连接的酶切

,并用PCR 方法予以证实。 “DNA 片段群”

14.原核生物同源重组时,RecBCD 蛋白具有_____、_____、_____的活性。

【答案】核酸外切酶; 解旋酶; A TP 酶的活性。

RecB 、RecC 和RecD 三者构成在原核生物同源重组中的功能单位RecBCD 蛋白复合【解析】

物,它是一个多功能的酶系,具有依赖于A TP 的单链和双链DNA 外切酶的性质,因此又称为外切核酸酶V 能利用水解A TP 释放的能量使线型DNA 解旋,此外还呈现序列特异性的DNA 单链内切酶活性。

15.核苷酸通过_____键连接形成核酸分子,核苷酸中的碱基使核苷酸与核酸在_____附近具有最大的紫外吸收值。

【答案】磷酸二酯:260nm

16.大肠杆菌表达质粒除质粒复制起点外,通常还包括下列组成部分:a._____ 、b._____ 、c._____ 、d. _____和e._____ 。

【答案】具有抗菌素抗性基因;多克隆位点;启动子;前导序列;加尾信号

【解析】一种理想的用作克隆载体的质粒必须满足如下几个方面的条件:(1)具有复制起点;(2)具有抗菌 素抗性基因;(3)具若干限制酶单一识别位点;(4)具有较小的相对分子质量;(5)较高的拷贝数;(6)还应具 备与宿主细胞相适应的启动子、前导顺序、増强子、加尾信号等DNA 调控元件。

17.PCR 反应主要有_____、_____和_____三个步骤。

【答案】变性;退火;延伸

【解析】PCR 反应是模仿生物体内DNA 的复制过程,典型的PCR 反应包括以下三个过程: (1)变性:双链DNA 在高温条件下(90〜95°C )变成两条单链,作为DNA 复制的模板; (2)退火:单链DNA 在较低温度下(37〜60°C )与引物互补结合,形成杂交双链结构; (3)延伸:升温至70〜75°C , 结合模板上的引物在耐热DNA 聚合酶的催化下按5' —3' 方向延伸,合成 模板DNA 的互补链。

重复以上过程经过多次循环就得到所需要的目的DNA 片段。

18.在蛋白质序列测定中必须先用对蛋白质的多肽链进行部分水解成较小的肽段,才能进一步采用_____法进行肽段的序列测定。

【答案】蛋白酶或化学试剂;Edman 降解

三、判断题

19.DNA 修复系统进行错配修复时,根据子链DNA 甲基化而母链未甲基化来判断子链和母链,从而修复错配的碱基。( )

【答案】错

【解析】在错配修复中,一旦复制叉通过复制起点,母链就会在开始DNA 合成前几秒至几分钟内,被甲基化,而子链未来得及甲基化,只要两条DNA 链上碱基配对出现错误,错配修复系统就会以“保留母链,修复子链”的原则,找出错误碱基所在的DNA 链,并在对应于母链甲

’基化腺昔酸上游鸟苷酸5位置切开子链,启动修复途径,合成新的子链片段。

20.核糖体不仅存在于细胞质中,也存在于线粒体和叶绿体中。( )

【答案】对