2018年南通大学护理学院306西医综合之生物化学考研基础五套测试题
● 摘要
一、名词解释
1．
（年）外显子
【答案】
外显子
是既存在于最初的转录产物中，
也存在于成熟的
内含子的
中的区域。
分子中的核苷酸
序列。外显子也指编码相应
2． 双关酶。
【答案】双关酶能与膜可逆结合，通过膜结合型和可溶型的互变来调节酶的活性。双关酶大多是代谢途径的关键酶和调节酶，如糖酵解中的己糖激酶、磷酸果糖激酶、醛缩酶、3-磷酸甘油 醛脱氢酶；氨基酸代谢的Glu 脱氢酶、Tyr 氧化酶；参与共价修饰的蛋白激酶、蛋白磷酸酯酶等。
3． 可逆沉淀反应。
【答案】可逆沉淀反应，又称不变性沉淀，是指在发生沉淀反应时，蛋白质虽已析出，但是其分子内部结构未发生显著变化，沉淀因素去除后，能再溶于原来的溶剂中的沉淀反应，如盐析作用。
4． 抗维生素
【答案】抗维生素是指结构类似于维生素的结构，它们在体内与维生素竞争，而使维生素不能发挥作用的某些化合物。在研宄维生素缺乏病的过程中经常使用某些抗维生素来造成动物的维生素缺乏病。
5． 表达载体（expression vector）。
【答案】表达载体是指为使插入的外源DNA 序列可转录，进而翻译成多肽链而特意设计的克隆载体。
6． 岗崎片段（Okazaki fragment）。
【答案】岗崎片段是指DNA 的随后链的合成方向与复制叉的前进方向相反，只能断续地合成的多个短片段。它们随后连接成大片段。
7． 硝酸还原作用。
【答案】硝酸还原作用是指硝酸态氮在硝酸还原酶和亚硝酸还原酶催化下还原为氨的过程。
8． 维生素缺乏症
【答案】维生素缺乏症是指因缺乏某种维生素而引起机体不能正常生长，甚至引起的疾病。
维生素缺乏常见的原因是摄入量不足或缺乏、吸收障碍、需要量増加等。
二、问答题
9． 简述
的方法和意义。
标记的
【答案】将聚丙烯酰胺凝胶电泳的变性DNA 片段转移到硝酸纤维素薄膜上，再与变性DNA 探针进行杂交。
10．试比较糖原磷酸化酶在肝脏及肌肉细胞中的别构调节差异，有何生物学意义？
【答案】高活性的糖原磷酸化酶a 在肝细胞中可被葡萄糖抑制，而低活性的糖原磷酸化酶b 在肌细胞中可被AMP 激活。这类别构调节差异与各组织中糖原的代谢功能直接相关：肝脏利用糖原以稳定血糖浓度，而肌糖原降解则主要是为肌细胞收缩提供能量。
11．试述非离子型去垢剂增溶膜蛋白的机制。
【答案】非离子型去垢剂为两亲性分子，当它们与膜蛋白作用时，可以用非极性端与膜蛋白的疏水区作用，取代膜脂，极性端指向水中，使蛋白质成为水溶性，从而与膜分离。
12．DNA 分子什么样的结构特征为DNA 的生物合成提供了分子基础？
Watson 和Crick 当时提出DNA 双螺旋结构模型时就曾经指出，【答案】如果他们的双螺旋结构模型是正确的话， 那么DNA 的复制（即生物合成）应该是半保留的。由于构成DNA 双螺旋结构的两条多核苷酸链按照碱基互补 配对原则（即A 与T , G与C 互补配对），反向平行的结合在一起，当DNA 进行复制时，两条母链彼此分开，每一条链可以按照碱基互补配对的原则决定与它互补的新链的碱基顺序。于是，按照互补原则合成的子代DNA 双螺旋分子，一条来自亲代，另一条链是以亲链为模板合成的。所以，DNA 的复制是半保留的。
三、综合论述题
13．大肠杆菌含有2000种以上的蛋白质，为了分离它所表达的一个外源基因的产物并保持它的活性，常有很大困难。但为了某种目的，请根据下列要求写出具体的方法。
（1）利用溶解度差别进行分离。 （2）利用蛋白质分子大小进行分离。 （3）根据不同电荷进行分离。
（4）已制备有该产物的抗体进行分离。 （5）产物的浓缩。 （6）产物纯度的鉴定。
【答案】首先要有一种或几种检测或鉴定外源基因表达产物的方法，然后，在每一次分离纯化后，检测表达产物存在哪一个级分中。
（1）用硫酸铵或酒精分级沉淀，可根据蛋白质的溶解度的差别进行分离。
（2）SDS-PAGE 、凝胶过滤、超离心，以及超滤可对分子量不同的蛋白质进行分离。 （3）对带电行为不同的蛋白质可以用离子交换层析、等电聚焦、圆盘电泳、毛细管电泳等方法进行分离；但是在使用这一类型的方法时选择溶液的pH 至关重要，因为蛋白质的带电行为和溶液的pH 密切相关。
（4）如果具备表达产物的抗体，则可以使用亲和层析或免疫沉淀的方法简洁地分离所需要的表达产物。
（5）使用吸附量较大的离子交换层析和亲和层析，以及对饱和硫酸铵或聚乙二醇反透析，还有冷冻干燥等方法都可以达到浓缩样品的目的，然而这些方法使用时，都存在着脱盐或除去小分子化合物的问题。相比而言，选用合适截留分子量的超滤膜，进行超过滤，往往能同时达到浓缩样品和去盐（包括小分子）的目的。
（6）上述的（2）和（3）这两大类用于分离纯化产物的过程，实际上也是有样品纯度鉴定的作用。此外，末端分析、质谱和反相的HPLC 层析也都是有效的样品纯度鉴定的方法。但是应注意，样品的纯度是一个相对的概念。
14．从结构和功能两大方面比较大肠杆菌
【答案】460000，
它与而且可以利用别的
聚合酶的全酶由5
个亚基结合时约覆盖60
个核苷酸。在
的任何部位作模板合成
聚合酶和聚合酶。
原子，相对分子质量为
组成，还含有2个
合成起始之后，
因子便与全酶分离。不含加入因子后，
则具有选择起始部位的作用。
模板链上的起始信号。聚合酶活性。
聚
和三种亚基
就
和亚基组装
复制的保真性。核
因子的酶仍有催化活性，
称为核心酶。
亚基具有与启动子结合的功能。亚基催化效率很低，
因子可能与核心酶结合，改变其构象，
从而使它能特异地识别合酶III 极为复杂，目前已知它的全酶含有10
种
共22个亚基组成异源二聚体。其中
，
亚基具有
组成全酶的核心酶（称为
可以利用带有引物的长单链
心酶本身活力较低，
只作用于带缺口的双链
成复合体，进一步与核心酶结合，
成为
）。
亚基具有外切酶的校对功能，
提高
和亚基则与酶功能的持续性有关，
它们与
即“天然的”
聚合酶
加上亚基后成为二聚体，
称
它与亚基结合形成全酶。复制的起始部位，口亚基就被
亚基在复制起始中对引物的识别和结合有关，
一旦全酶结合到
释放出来。现在一般认为
，聚合酶III
是原核生物复制的主要聚合酶。
15．下面有两个DNA 分子，先变性然后再复性，复性是在同一温度下发生的，问哪一个DNA 分子复性到原来的DNA 结构可能性更大些？为什么？
（1）A TA TA TA TA T （2）TAGCCGA TGCTA T
【答案】DNA 的复性：指变性DNA 在适当条件下，两条互补链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象，它是变性的一种逆转过程。热变性DNA —般经缓慢冷却后即可复性，此过程称之为“退火”（annealing ）。DNA 的复性不仅受温度影响，还受DNA 自身特性等其他因素的影响。