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2017年河南科技学院现代分子生物学(同等学力加试)复试仿真模拟三套题

  摘要

一、名词解释

1. 蛋白质印迹法(Western blotting)

【答案】蛋白质印迹法是指将经过凝胶电泳分离的蛋白质转移到膜(如硝酸纤维素膜、尼龙膜等)上,再对转移 膜上的蛋白质进行检测的技术。转移可用电泳法等,检测常用与特定蛋ft 结合的标记抗体或配体,由此可判断特 定蛋白质的存在与否和分子质量大小等。

2. CpG 岛

CpG 岛是指在人类基因组中分布很不均一的CpG 双核苷酸在基因上成串出现所形成【答案】

的区段。CpG 岛经 常出现在真核生物的管家基因(house-keeping gene)基因的调控区,在其它地方出现时会由于CpG 中胞嘧啶甲基化引发碱基转换,引发遗传信息紊乱。

3. 等电聚焦

【答案】

等电聚焦是指利用蛋白质分子或其他两性分子的等电点的不同,在一个稳定的、连续的、线性pH 梯度中进行蛋白质的分离和分析的技术。

4. DNA 解链温度(melting temperature, T m )

【答案】DNA 解链温度是指DNA 变性过程中单链达到一半时的温度或DNA 变性过程中紫外吸收达到最大增值一半时的温度。

5. 聚合酶链式反应(polymerase chain reaction)

【答案】聚合酶链式反应,简写作PCR , 是指根据天然DNA 的复制机制在体外通过酶促反应有选择地大量扩增 (包括分离)一段目的基因的技术。利用两种寡核苷酸引物分别与特异性DNA 区段的正链和负链末端互补,经过模板DNA 变性,模板DN Α-引物的配对,在DNA 聚合酶作用下发生引物延伸反应,三个反应阶段后生成新的子代DNA 双链,经多次循环后得到大量目标DNA 片。

二、简答题

6. 增强子的作用有哪些?

【答案】(1)增强效应十分明显。

(2)增强效应与位置和取向无关。

(3)大多为重复序列。

(4)增强效应一般具有组织或细胞特异性。

(5)没有基因专一性。

(6)许多增强子还受外部信号的调控。

7. 某些动物的部分器官切除后可再生,如蝾螈的前肢。你认为再生的过程中包括了哪些细胞生物学事件?

【答案】再生是生物界普遍存在的现象,广义的再生包括分子水平、细胞水平、组织与器官水平、整体水平的再生,但一般再生是指生物体缺失部分后重建的过程。在蝾螈前肢再生的过程中,包括细胞凋亡、细胞去分化、再分化等一系列的生物学事件。例如,蝾螈前肢的伤口处部分细胞凋亡,多数细胞经去分化形成间充质或纤维细胞 样的细胞团,再由这些细胞再分化形成以有序方式排列的从肱骨直到指骨的完整肢体,该过程由同源异型基因的表达模式调控。

8. 什么是操纵子学说?

【答案】(1)提出人 Jacob 和 Monod

(2)提出时间 1961 年

(3)基本内容

①②

该基因的产物由同一条多顺反子的分子的启动区(P )位于阻遏基因分子所编码。 与操纵区(0)之间,不能单独起始半乳糖苷酶和透过酶基因的高效表达。

③操纵区是DNA 上的一小段序列(仅为26bp ), 是阻遏物的结合位点。

④当阻遏物与操纵区相结合时,

的合成。

这就是说,有诱导物存在时,操纵区没有被阻遏物占据,所以启动子能够顺利起始

转录。

9. 什么是蛋白质组学?什么是转录组学?简述这两个领域里最主要的研究手段。

【答案】(1)蛋白质组学是指在蛋白质组水平上研究蛋白质的特征,包括蛋白质的表达水平、翻译与修饰、蛋白质与蛋白质的相互作用等,由此获得关于疾病发生、发展及细胞代谢等过程整体认识的学科。目前常用的蛋白质组学研究手段有:

①质谱分析技术(MS );

②蛋白质芯片技术。

(2)转录组学是指研究生物细胞中转录组的发生和变化规律的科学。目前用于转录组数的研究方法主要有:

①基于杂交技术的芯片技术,包括CDNA 芯片和寡聚核苷酸芯片;

②基于序列分析的基因表达系列分析SAGE ;

③大规模平行信号测序系统MPSS 。

的转录起始受到抑制。 ⑤ 诱导物通过与阻遏物结合,改变它的三维构象,使之不能与操纵区相结合,

从而激发的

10.假如你猜测某个基因涉及果蝇的眼睛发育(已知该基因的序列),请试设计实验证实你的设想。

【答案】实验方案如下:

(1)选取眼睛还处在发育阶段的果蝇,设试验组和对照组;

(2)根据目标基因已知的序列,利用基因同源重组或RNA 干扰等方法敲除实验组的目标基因;

(3)两组均正常词喂,观察比较两组果蝇眼睛发育过程中的变化。若实验组果蝇眼睛发育异常,则说明该 基因涉及果蝇眼睛发育。

11.什么是转录因子?如果你找到了一个转录因子,设计一个实验来证明该转录因子与某一顺式作用元件间的互作关系。

【答案】(1)转录因子(transcription factor)是指转录起始过程中,RNA 聚合酶所需要的辅助因子,是参与正调控的反式作用因子,通常识别位于基因上游启动子附近的顺式作用元件。

(2)可以使用Dnase I足迹实验来证明转录因子与顺式作用元件的互作关系。DNase 工足迹实验的原理为: 蛋白质结合在DNA 片段上,保护结合部位不被Dnase I 破坏,这样,蛋白质在DNA 片段上留下“足迹”。在电 泳凝胶的放射性自显影图片上,相应于蛋内质结合的部位没有放射性标记条带。足迹试验特异性好,定位精确,使用广泛。其技术流程为:

① 待检双链DNA 分子用作末端标记,通常只标记一端;

②蛋白质与DNA 混合,等二者结合后,加入适量的DNaseI , 消化DNA 分子,控制酶的用量,使之达到每个DNA 分子只发生一次磷酸二酯键断裂,同时设未加蛋白质的对照;

③从DNA 上除去蛋白质,将变性的DNA 加样在测序凝胶中做电泳和放射性自显影,与对照组相比后解读出足迹部位的核苷酸序列。

三、论述题

12.何谓外显子,内含子及其结构特点和可变调控?

【答案】(1)定义

①外显子是指真核基因中能够编码蛋白质的序列;

rRNA 或tRNA ②内含子则是指存在于原始转录物或基因组DNA 中,但不存在于成熟mRNA 、

中的那部分 核苷酸序列。

(2)结构特点

①在大多数真核基因都是由外显子和内含子两部分交替排列而成的;

②外显子-内含子连接区有高度保守性和特异性碱基序列,几乎每个内含子端起始的两个碱基都是GT , 而3’端最后两个碱基总是AG , 被称为

(3)外显子与内含子的可变调控

①剪接的多样性

剪接方式主要有组成型剪接和选择性剪接两种,真核基因的原始转录产物可通过不同的剪接

法则,即