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一、名词解释

1． 核酶。

【答案】核酶是指一些具有催化功能，可以催化自我拼接等反应，具有催化作用的RNA 。

2． 解偶联剂。

【答案】解偶联剂是指氧化磷酸化的一类抑制剂，使氧化与磷酸化脱离，氧化仍可以进行，而磷酸化不能进行。解偶联剂为离子载体或通道，能増大线粒体内膜对

梯度，因而无

酚

3． 密码子（codon ）。

【答案】密码子又称三联体密码子，是由mRNA 上每三个相邻的核苷酸构成的密码子，每一个密码子决定一个 氨基酸。

4． 阻遏蛋白。

【答案】阻遏蛋白是指一种依赖于钙的蛋白激酶，酶蛋白与钙结合引起酶分子构象变化，调节酶的活性。如磷酸化酶激酶是一种依赖于钙的蛋白激酶。

5． 亲和层析、离子交换层析。

【答案】亲和层析是指利用共价连接有特异配体的层析介质分离蛋白质混合物中能特异结合配体的目的蛋白或其他分子的层析技术。

离子交换层析是指使用带有固定的带电基团的聚合树脂或凝胶层析柱分离离子化合物的层析方法。

6． 两性离子。

【答案】两性离子是指同一分子上带有等量正负电荷时，分子所处的状态。

7． 丝氨酸蛋白酶。

【答案】丝氨酸蛋白酶是指活性部位含有在催化期间起着亲核体作用的丝氨酸残基的蛋白酶。

8．

【答案】

（非必需氨基酸）是指人体生命活动需要、自身可以合成的

第 2 页，共 30 页 的通透性，消除浓度生成，同时使氧化释放出来的能量全部以热的形式散发。例如，2，4-二硝基苯

氨基酸，包括丙氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、丝氨酸、精氨酸、半胱氨酸、

酷氨酸、甘氨酸和脯氨酸。非必需氨基酸合成途径一般比较简单，通过转氨、氨同化或由必需氨基酸直接转变。

二、问答题

9． DNA 复制需要RNA 引物的证据有哪些？

【答案】首先，所有研宄过的DNA 聚合酶都只有链延伸活性，而没有起始链合成的功能。相反，RNA 聚合酶却具有起始链合成和链延伸活性。另外，一系列实验提供了有关的证据。例如在体外实验中，噬菌体单链环状DNA 在加入一段RNA 引物之后，DNA 聚合酶才能把单链环状DNA 变成双链环状DNA 。同时发现如果加入RNA 聚合酶抑制剂利福平，也可以抑制的复制，如果加入RNA 引物再加利福平，DNA 的合成不被抑制；

还发现新合成的DNA 片段端共价连接着RNA 片段，如多瘤病毒在体外系统合成的冈崎片 段端有长约10个残基的以

10．鸟氨酸循环中的产物尿素中的两个氮原子分别来自于哪几种分子，为什么？

【答案】在鸟氨酸循环的过程中，尿素中的两个氮原子分别来自谷氨酸和天冬氨酸。整个过程需要消耗4个高能磷酸键。

11．试说明丙氨酸的成糖过程。

【答案】丙氨酸成糖是体内很重要的糖异生的过程，要先脱掉其氨基并绕过“能障”及“膜障”：丙氨酸经转回胞液，转变回草酰乙酸后再转变成磷酸烯醇式丙酮酸，后者即可沿糖酵解途径逆行成糖。

12．外源基因导入动物细胞有哪些常用方法？

【答案】常用的方法有：（1）磷酸钙共沉淀法，用沉淀磷酸离子和DNA , 沉积在细胞质膜上的DNA 被细胞吸收，可能是通过吞嗤作用；（2） DEAD 葡聚糖（DE-AE-dextron ）或聚阳离子（polycation ）法，它能结合DNA 并促使细胞吸收；（3）脂质体（liposome ）法，利用类脂经超声波、机械搅拌等处理，形成双脂层小囊泡， 将DNA 溶液包裹在内，它通过与细胞质膜融合而使DNA 进入细胞；（4）脂质转染法，用人工合成的阳离子类 脂与DNA 形成复合性，借助类脂穿过质膜而将DNA 导入细胞内；（5）电穿孔法，在脉冲高压电场作用下质膜 瞬间被击穿，DNA 得以进入细胞，细胞膜随即修复正常；（6）显微注射法，对哺乳动物受精卵等较大的细胞，导入外源DNA 可以用显微注射法，即在显微镜下，用极细的玻璃注射器针头

枪射击动物的表皮、肌肉和 乳房等获得成功的例子也有报道。

在以上诸方法中，磷酸钙共沉淀法成本低、操作方便，但效率低；脂质转染法和电穿孑1法，前者需要昂贵的试剂，后者需要特殊的仪器，但效率高，现在较常用。显微注射法效率极高，还可直接将DNA 送入核内，但 需要昂贵仪器，且技术复杂不易掌握。

第 3 页，共 30 页 插入细胞内并注入DNA 溶液；（7）基因枪（genegun ）法，在动物转基因中使用相对较少，用基因

13．怎样通过实验证实DNA 复制是双向复制还是单向复制？

【答案】通过放射自显影的方法确定。在复制开始时将E.

放在含低放射强度

培养基中生长，

数分钟后，移置含高放射性强度3H-脱氧胸苷的培养基中生长；经过一段时间后，进行放射自显影。在图像上可以看到，复制起始区的放射性标记密度低，感光还原的银颗粒密度低；继续的合成区放射性标记密度高，银颗粒 密度高。若中间密度低，两端密度高，则DNA 的复制为双向；如果起始部位既有高密度也有低密度，就表明 DNA 的复制为定点单向。研宄证明多数细胞的DNA 的复制为定点双向。但也有一些例外，如噬菌体质粒和真核细胞的线粒体等DNA 为单向复制。

14．凝胶过滤和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳这两种分离蛋白质的方法均建筑在分子大小的基础上，而且两种方法均采用交联的多聚物作为支持介质，为什么在凝胶过滤时，相对分子质量小的蛋白质有较长的保留时间，而在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳时，它又“跑”得最快？

【答案】凝胶过滤常用的是葡聚糖凝胶（Sephadex ），这凝胶颗粒的交联介质排阻相对分子质量较大的蛋白质，仅允许相对分子质量较小的蛋白质进入颗粒内部，所以相对分子质量较大的蛋白质只能在凝胶颗粒之间的空隙中通过。这意味着它通过柱的体积为床体积减去凝胶颗粒本身所占的体积。而相对分子质量小的蛋白质必须通过所有的床体积才能流出，所以，相对分子质量小的蛋白质比相对分子质量大的蛋白质有较长的保留时间。而SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳时，其凝胶介质并不存在像Sephadex 那样的颗粒之间的空隙。所以，所有的蛋白质分子必须全部通过这交链介质而移动。蛋白质的相对分子质量越小，通过这介质就越快，移动得越迅速。

15．铁硫蛋白和细胞色素传递电子的方式是否相同? 为什么？

【答案】铁硫蛋白和细胞色素传递电子的方式是相同的，都是通过铁的价变即的互变来进行电子的传递。它们的差别在于细胞色素的铁是血红素铁，铁与血红素分子紧密结合；而铁硫蛋白的铁是非血红素铁，与蛋白质中Cys 的硫和无机磷原子结合在一起，形成一个铁硫中心。

16．为什么在聚合酶链反应中控温非常重要？

【答案】聚合酶链反应依靠DNA 链的反复循环分离再与引物结合。第一步需要的温度比第二步高，因此需要严格控制反应温度。

的

三、论述题

17．写出20种氨基酸的3字母和1字母的缩写，根据R 基团的极性、电荷及苯环氨基酸可以分成哪五大类？ 哪些是人体的必需氨基酸和非必需氨基酸？

【答案】（1）丝氨酸SerS , 苏氨酸ThrT ，天冬酰胺AsnN ，谷氨酰胺GlnQ , 酿氨酸TyrY , 半

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