2018年北京协和医学院生物医学工程研究所(天津)306西医综合之生物化学考研核心题库
● 摘要
一、名词解释
1． 联合脱氨基作用（transcleamination ）。
【答案】联合脱氨基作用是转氨基作用和L-谷氨酸氧化脱氨基作用的联合反应。氨基酸与酮戊二酸经转氨作用生成or 酮酸和谷氨酸，后者经L-谷氨酸脱氢酶作用脱去氨基的过程。
2． 抑制剂。
【答案】抑制剂是指能使酶的某些必需基团或酶活性部位中的基团的化学性质改变，而降低酶的催化活性，甚至使酶的催化活性完全丧失的物质。
3． 泛肽途径。
【答案】泛肽途径又称碱性系统，是指生物体内广泛存在的细胞内的蛋白降解系统，主要降解短寿命蛋白质和反常蛋白。
4． 限制性内切酶
【答案】限制性内切酶是一种在特殊核苷酸序列处水解双链DNA 的内切酶。I 型限制性内切酶既能催化宿主DNA 的甲基化，又可催化非甲基化的DNA 的水解；而II 型限制性内切酶只催化非甲基化的DNA 的水解。
5． 别构酶
【答案】别构酶是指含有别构中心的酶。别构中心在结合别构效应物以后构象发生变化，从而影响到活性中心的构象，最后改变酶的活性。
6． 酶的非竞争性抑制。
【答案】酶的非竞争性抑制是指非竞争性抑制剂与酶活性中心以外的基团结合，形成解除。
7． 葡萄糖-丙氨酸循环。
【答案】葡萄糖-丙氨酸循环是一种氨的转运过程。在肌肉中，由酵解产生的丙酮酸在转氨酶的作用下，接受其他氨基酸的氨基形成丙氨酸，丙氨酸是中性无毒物质，通过血液到达肝脏，在谷丙转氨酶的作用下，将氮基移交or 酮戊二酸生成丙酮酸和谷氨酸。谷氨酸在谷氨酸脱氢酶的作
和复合物，从而不能进一步形成E 和P , 因此使酶反应速率降低的可逆作用不能通过増加底物的方法
用下脱去氨基，氮进入尿素合成途径，丙酮酸在肝细胞中异生为葡萄糖再运回至肌肉氧化供能。
8． 肉毒碱穿梭系统（carnitine shuttle system）
【答案】肉毒碱穿梭系统是指长链脂酰CoA 通过与极性肉碱结合成脂酸一肉碱的形式从胞质中转运到线粒体内的循环穿梭系统，从而使活化的脂酸在线粒体内进一步氧化。
二、问答题
9． 什么是拓扑异构酶？它们怎样参与DNA 的复制过程？
【答案】（1）拓扑异构酶（topoisomerase ）是指通过切断DNA 的一条或两条链中的磷酸二酯键，然后重新缠绕和封口来改变DNA 连环数的酶。
（2）生物体内DNA 分子通常处于超螺旋状态，而DNA 的许多生物功能需要解开双链才能进行。拓扑异构酶就是催化DNA 的拓扑连环数发生变化的酶，它可分为拓扑异构酶和拓扑异构酶型酶可使双链DNA 分子中的一条链发生断裂和再连接，反应不需要提供能量，它们主要集中在活性转录区，同转录有关。型酶能使DNA 两条链同时发生断裂和再连接，当它引入负超螺旋时需要由ATP 提供能量。它们主要分布在染色质骨架 蛋白和核基质部位，同复制有关。拓扑异构酶可减少负超螺旋；拓扑异构酶可引入负超螺旋，它们协同作用控制着DNA 的拓扑结构。拓扑异构酶在重组、修复和DNA 的其他转变方面起着重要的作用。
10．虽然组蛋白mRNA 前体的转录后加工方式既没有拼接、也没有加尾，但是却保留了加帽过程，为什么？
【答案】组蛋白的合成与DNA 的复制都集中在细胞周期的S 期，需要在较短的时间内合成大量的组蛋白。组蛋白mRNA 前体的后加工既没有拼接，也没有加尾，可以缩短转录后加工时间，便于在短时间内得到大量的成熟 mRNA 。但是加帽反应是一种共转录反应，它并不需要专门的时间来完成，因此组蛋白mRNA 前体的后加工保留了加帽反应。
11．怎样通过实验证实DNA 复制是双向复制还是单向复制？
【答案】通过放射自显影的方法确定。在复制开始时将E.
放在含低放射强度
培养基中生长，
数分钟后，移置含高放射性强度3H-脱氧胸苷的培养基中生长；经过一段时间后，进行放射自显影。在图像上可以看到，复制起始区的放射性标记密度低，感光还原的银颗粒密度低；继续的合成区放射性标记密度高，银颗粒 密度高。若中间密度低，两端密度高，则DNA 的复制为双向；如果起始部位既有高密度也有低密度，就表明 DNA 的复制为定点单向。研宄证明多数细胞的DNA 的复制为定点双向。但也有一些例外，如噬菌体
单向复制。
质粒和真核细胞的线粒体等DNA 为的
12．列出一个转座子插入到一个新位点所要求的步骤。
【答案】步骤包括：（1）首先，在靶位点处产生一个交错切口；（2）接着，转座子与靶位点连接；（3）最后，填补插入位点两侧的单链区。
13．虽然在柠檬酸循环中并没有的直接参与，为什么该循环的正常运行却必须在有氧条件下才能进行？
【答案】柠檬酸循环中总共有四次底物脱氢反应，可生成3分子NADH 和1分子
这些载氢体都必须经由呼吸链传递以最终将
体的缺乏，进而使循环速率降低 甚至完全停止。
14．在用定磷法测量核酸含量中，总磷如何测定？有机磷如何测定？
【答案】在定磷法实验中，核酸样品经硫酸水解，有机憐全部转变成无机磷，然后用钼酸铵法测定其含量，即确定样品的总磷含量。核酸样品不水解，直接用钼酸铵法测定磷含量，即确定样品的无机磷含量。总磷含量与无机磷含量的差值即为有机磷含量。
15．目的DNA 片段的获得主要有哪几种方法？
【答案】获得DNA 片段的主要方法有：（1）化学法直接合成基因；（2）从基因组文库中获取目的基因；（3） 从cDNA 文库中获取目的基因；（4）通过PCR 直接扩增出目的基因。
16．重组DNA 技术一般都需要哪些必要条件？
【答案】限制酶切割DNA ，DNA 连接酶连接DNA ，合适的载体用来接收外源DNA ，细胞系用于接收载体，以及筛选正确的转化体。
而与O 结合成水，否则将导致载氢体的堆积和电子受
三、论述题
17．下面有两个DNA 分子，先变性然后再复性，复性是在同一温度下发生的，问哪一个DNA 分子复性到原来的DNA 结构可能性更大些？为什么？
（1）ATATATATAT
（2）TAGCCGATGCTA T
【答案】DNA 的复性：指变性DNA 在适当条件下，两条互补链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象，它是变性的一种逆转过程。热变性DNA —般经缓慢冷却后即可复性，此过程称之为“退火”（annealing ）。DNA 的复性不仅受温度影响，还受DNA 自身特性等其他因素的影响。温度和时间。复性时温度下降必须是一缓慢过程，若在超过Tm 的温度下迅速冷却至低温（如4°C 以下），复性几乎是不可能的，核酸实验中经常以此方式保持DNA 的变性（单链）状态。这说明降温时间太短及温差大均不利于复性。
DNA 浓度。复性的第一步是两个单链分子间的相互作用“成核”。这一过程进行的速度与DNA 浓度的平方成正比，即溶液中DNA 分子越多，相互碰撞结合“成核”的机会越大。