2018年南京中医药大学苏州附院(苏州市中医医院)306西医综合之生物化学考研基础五套测试题
● 摘要
一、名词解释
1. 酶的比活力。
【答案】酶的比活力是指每毫克酶蛋白具有的酶活力单位,
一般用
2. DNA 损伤(DNAdamage )。
【答案】DNA 损伤是指发生在DNA 分子上的任何化学改变。
3. SH2
结构域 蛋白表示。
【答案】SH2结构域是指位于RTK 系统中的接头蛋白分子上与Src 同源的结构域,它能够与磷酸化的Tyr 残基结合。
4. 自发突变(spontaneous mutation)。
【答案】自发突变是指由生物体内在因素引起的突变。
5. 岗崎片段(Okazaki fragment)。
【答案】岗崎片段是指DNA 的随后链的合成方向与复制叉的前进方向相反,只能断续地合成的多个短片段。它们随后连接成大片段。
6. 细胞水平调控。
【答案】细胞水平调控又称酶水平的调控或分子水平的调控,是一种最原始、最基础的调控机制,它主要是通过细胞内的酶来实现的。单细胞生物能通过细胞内代谢物及其他调节物质浓度的改变来影响各代谢途径中某些酶的 活性或酶的含量,以维持细胞的代谢及生长、繁殖等活动的正常进行;高等生物细胞中除了这些方式外,还可通 过酶和代谢物的区域化分布等方式对代谢进行调控,使代谢途径既不相互干扰又能相互配合地进行。
7. 转录空泡(transcription bubble)。
【答案】转录空泡是指由RNA-pol 局部解开的DNA
双链及转录产物
DNA 模板链而组成的转录延长过程的复合物。
8. 维生素
【答案】维生素是机体所需要的微量有机化合物,机体不能合成或合成不足。因而需要从膳食中获取,维生素通过衍生为辅酶和激素实现对代谢的调节。
第 2 页,共 29 页 端一小段依附于
二、问答题
9. 计算【答案】
经呼吸链氧化成
氧化成的以及耦联氧化磷酸化的能量转化率。
总反应
代入公式
从
化率为:
10.试述谷氨酸作为氨基的转换站在氨基酸生物合成中的作用。
【答案】在氨基酸的生物合成中,许多氨基酸都可以作为氨基的供体,其中最重要的是谷氨酸,
它可由酮戊二酸与氨合成,然后,
再通过转氨基作用转给其他酮酸合成相应的氨基酸。这样谷氨酸便作为氨基的转换站。如图所示为谷氨酸与其他氨基酸合成的关系。
生成则得
耦联2.5
分子合成,水解的故能量转的两个半反应为
图
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11.嘌呤霉素和四环素都能抑制原核细胞蛋白质的生物合成,但嘌呤霉素的抑制效果低于同剂量的四环素,为什么?
【答案】抑制蛋白质的合成的作用点很多。
(1)抑制氨基酸的活化。例如,吲哚霉素是色氨酸的类似物。
(2)抑制蛋白质合成的起始,如氨基环醇类抗生素,链霉素与小亚基结合。
(3)抑制肽链的延伸。例如,四环素封闭小亚基的氨酰位点,氯霉素主要是与细菌核糖体的50S 亚基结合而抑制肽酰基转移反应。
(4)使翻译提前终止,如嘌呤霉素。
所以嘌呤霉素的抑制效果低于同剂量的四环素,嘌呤霉素可以合成蛋白质,但是四环素则不可以。
12.假定你决定从一种新的生物Streptococcus bartelium体内纯化核糖核酸酶,你选择盐析作为纯化的第一步,随着你JJnA 硫酸铵到细胞裂解物之中,进行分级分离。如果你添加的盐浓度是0.5mol/L、lmol/L、1.5mol/L、2mol/L、和2.5mol/L,你如何确定你要的蛋白质在哪一级分离沉淀之中?
如果你选择离子交换层析作为纯化核糖核酸酶的第二步,同样需要确定哪一部分含有目标蛋白。你会使用哪一种离子交换树脂? 为什么? 你如何从交换树脂中洗脱下你的目标蛋白?
你将纯化的蛋白质走SDS-PAGE ,在考马斯亮蓝染色以后,你看到一条单一的
种蛋白质是一种核糖体蛋白,于是你决定再进行一次蛋白质染色,这一次你发现了一条
小的条带。这一次染色方法是什么?为什么
会多显示出新的条带,你如何分离这两种蛋白质?
【答案】(1)在纯化蛋白质过程中,首先需要建立一种测定活性的方法。测定核糖核酸酶活性的方法是利用其将RNA 降解成单个核苷酸的活性。使用放射性标记的NTP ,可转录出带放射性标记的RNA 。以此作为核糖核酸酶的底物,将其与含有酶的部分保温,然后用TCA 沉淀,再使用特定的滤膜过滤,通过测定流过滤膜的带有同位素标记的核苷酸的放射性,可测定出纯化物中酶活性的高低。
(2)既然核糖核酸酶的底物是磷酸核糖骨架带负电荷的RNA , 核糖核酸酶本身很可能带正电荷。因此,可考虑阳离子交换树脂来纯化核糖核酸酶。在低盐浓度下上柱,以吸附核糖核酸酶,然后用高盐缓冲液洗脱出核糖核酸酶。
(3)考马斯亮蓝染色的灵敏度仅能检测出含有大约lOOng 的条带,而银染的灵敏度达10ng 。所以使用考马斯亮蓝染色看不到的条带有可能通过银染看到。
为了将
的核糖体蛋白与的核糖核酸酶分开,
可使用凝胶过滤层析。的核糖核酸酶应该先流出来。
第 4 页,共 29 页 大小的大条带。为了确定它是不是核糖核酸酶,你决定将条带切下,然后测序。然而,你吃惊的发现,这
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