野生型的M13不适合用作基因工程载体，主要原因是（）和（）。
根据噬菌体的包装能力，将野生型λ噬菌体的基因组 DNA 改造成插入型载体，该载体的最小分子大小约为（）kb，插入的外源片段最大不超过（）kb。
λ噬菌体的基因组 DNA为（）kb，有（）多个基因。在体内，它有两种复制方式，扩增时（早期复制）按（）复制，成熟包装（晚期复制）则是按（）复制。它有一个复制起点，进行（）向复制。丸噬菌体的 DNA既可以以线性存在又可以环状形式存在，并且能够自然成环。其原因主要是在久噬菌体线性 DNA分子的两端各有一个（）个碱基组成的天然黏性末端。这种黏性末端可以自然成环。成环后的黏性末端部位就叫做（）位点。
在质粒中如何增减酶切点？
质粒改造的发展过程如何？
YAC 克隆载体常出现哪些问题？
