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一、名词解释

1．

【答案】核开关。核开关是指一类通过结合小分子代谢物调控基因表达的mRNA 元件，它位于特定的mRNA 区域，可以不依赖于任何蛋白质因子而直接结合小分子代谢物，继而发生构象重排，影响mRNA 活性。

2． 等电聚焦

【答案】

等电聚焦 是指利用蛋白质分子或其他两性分子的等电点的不同，在一个稳定的、连续的、线性pH 梯度中进行蛋白质的分离和分析的技术。

3． Blue-white screening

【答案】蓝白斑筛选。蓝白斑筛选是指基于半乳糖苷酶系统的一种重组子筛选方法。其基本原理是很多载体都

携带一段来自大肠杆菌的

序列的宿主细胞。宿主经上述质粒转化后，

整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补

活性蛋白质。由

互补而产生的操纵子DNA 区段，

其中有半乳糖苷酶基因的调控序列和前146个氨基酸的编码信息，这种载体适用于可编码半乳糖苷酶C 端部分 基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完，产生完整 细菌在诱导剂的作用下，在生色底物存在时产生易于识别的蓝色菌落。而当外源DNA 插入到质粒的多克隆位点后，几乎不可避免地导致无互补能力的氨基端片段，使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。

4． 基因扩増

【答案】基因扩增是指某些基因的拷贝数专一性大量增加的现象，结果使得细胞在短期内产生大量的基因产物以满足生长发育的需要。

5． polysome

【答案】多核糖体。多核糖体是指蛋白质合成过程中结合在同一条mRNA 上的多个核糖体，能同时合成若干条蛋白质多肽链。

6． DNA 的甲基化（DNAmethylation ）

【答案】DNA 的甲基化是指一种表观遗传修饰，它是由DNA 甲基转移酶催化s-腺苷甲硫氨酸作为甲基的供体，将胞嘧啶转变为甲基胞嘧啶的一种过程。

7． 聚合酶链式反应（polymerase chain reaction）

【答案】聚合酶链式反应，简写作PCR , 是指根据天然DNA 的复制机制在体外通过酶促反应

有选择地大量扩增 （包括分离）一段目的基因的技术。利用两种寡核苷酸引物分别与特异性DNA 区段的正链和负链末端互补，经过模板DNA 变性，模板DN Α-引物的配对，在DNA 聚合酶作用下发生引物延伸反应，三个反应阶段后生成新的子代DNA 双链，经多次循环后得到大量目标DNA 片。

8．

【答案】泛素（遍在蛋白）。泛素是指一种存在于大多数真核细胞中，主要功能是标记需要分解掉的蛋白质，使其被水解的小蛋白。

9． 突变

【答案】突变是指由自身或环境因素导致的DNA —级机构的改变，主要包括碱基的增添、缺失或改变等，染色体结构的畸变也会导致DNA 的突变。

10．双向电泳

【答案】双向电泳是指将样品进行电泳后，在它的直角方向再进行一次电泳，为了不同的目的而采用不同的组合 方式的分离方法，目前双向电泳大多是指第一向为等电聚焦，平衡后，第二向为SDS 电泳。

二、填空题

11．用于基因克隆载体的质粒都具有_____、_____和_____三种必需条件。

【答案】复制区；选择标记；多克隆位点

12．真核基因表达的调控可以在五种水平上进行，这五个水平是：a._____、b._____ 、c._____、d._____和e._____ ，其中最终决定蛋白质寿命的主要调节途径是f._____ 。

【答案】转录前表达调控；转录水平的调节；转录后水平的调节；翻译水平的调节；翻译后水平的调节；翻译后水平的调节

【解析】基因表达是指遗传信息的转录和翻译过程，它受到不同水平的调节。由于真核生物基因不组成操纵 子，不形成多顺反子mRNA , 所以，真核生物的基因表达受到多级调控系统的调节。

（1）转录前水平的调节主要指染色体DNA 的断裂、删除、扩増、重排、修饰和异染色质化等改变基因结 构和活性的过程。

（2）转录水平的调节包括染色质的活化和基因的活化，增强子通过改变染色质DNA 的结构而促进转录„

（3）转录后水平的调节包括转录产物的加工和转运的调节；通过+同方式的拼接可产生不同的mRNA 。

（4）翻译水平的调节主要是控制mRNA 的稳定性和有选择地进行翻译。

（5）翻译后水平的调节主要控制多肽链的加工和折叠，通过不同方式的加工可产生不同的活

性多肽；细胞蛋白质的寿命与其成熟蛋白质N 端的氨基酸有关。

13．真核生物tRNA 的成熟过程中需要通过拼接去除内含子，这个过程需要a._____和b._____两种酶。

【答案】核酸内切酶; 连接酶

【解析】tRNA 前体的加工包括:

（1）在核酸内切酶RNaseP 作用下，从5' 末端切除多余的核苷酸;

（2）在核酸外切酶RNaseD 作用下，从3' 末端切除多余的核苷酸;

（3）由核苷酸转移酶催化，3' 末端加CC Α-OH ;

（4）核酸内切酶催化进行剪切反应，剪掉内含子，由连接酶连接外显子部分;

（5）化学修饰作用，如甲基化、脱氨基、还原反应等。

14．在分子生物学发展史上，两次获得诺贝尔奖的科学家是英国著名的_____，他的两项贡献分别是_____和_____。

【答案】Sanger ; 蛋白质序列分析; DNA 序列分析法

【解析】Sanger 利用纸电泳及层析技术首次阐明胰岛素的一级结构，开创了蛋白质序列分析的先河，获1958年诺贝尔化学奖; 1980年，Sanger 和Gilbert （英）设计出一种测定DNA 分子内核苷酸序列的方法，而获得诺贝尔化学奖。

15．致癌病毒有_____病毒和_____病毒两大类。

【答案】DNA 介导；RNA 介导

【解析】病毒癌基因主要由DNA 病毒和RNA 病毒编码。

（1） DNA 病毒包括乙型肝炎病毒、SV40和乳头瘤病毒、腺病毒、疱疹病毒等；

（2） RNA 病毒主要是反转录病毒。

16．第一个被解析出晶体结构的蛋白是_____。

【答案】胰岛素

17．蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括_____、_____、_____。

【答案】成核；结构充实；最后重排

【解析】蛋白质折叠机制的首先成核理论的复性过如下：

（1）成核：最先形成α-螺旋及β-折叠片段，使变 性蛋白质从伸展、无活性状态（Us ）转变成部分折叠，产生一些二级结构但仍无活性的状态（II ）;

（2）结构充实：从II 进一步折叠，近于完全，并具有活性，但仍存在着不正确异构体等的状态（In ）;

（3）最后重排：产生天然蛋白质构象（N ）。