2017年华中科技大学生命科学与技术学院821生化与分子生物学之现代分子生物学考研导师圈点必考题汇编
● 摘要
一、名词解释
1． Intein
【答案】内含肽。内含肽是指存在于某些蛋白质前体肽链内部的一些肽段在转变为成熟蛋白质时，通过非酶促的转肽反应被切除，与其对应的是保留于成熟蛋白质中的外显肽。这些肽段具有核酸酶活性。
2．
【答案】核开关。核开关是指一类通过结合小分子代谢物调控基因表达的mRNA 元件，它位于特定的mRNA 区域，可以不依赖于任何蛋白质因子而直接结合小分子代谢物，继而发生构象重排，影响mRNA 活性。
3． 蛋白质印迹法（Western blotting）
【答案】蛋白质印迹法是指将经过凝胶电泳分离的蛋白质转移到膜（如硝酸纤维素膜、尼龙膜等）上，再对转移 膜上的蛋白质进行检测的技术。转移可用电泳法等，检测常用与特定蛋ft 结合的标记抗体或配体，由此可判断特 定蛋白质的存在与否和分子质量大小等。
4． DNA 复性（DNA renaturation）
【答案】DNA 复性是指DNA 双螺旋变性后的两条互补单链重新恢复成双螺旋结构的过程。
5．
【答案】，是指一种利用非放射即荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization）
性的劳光信号对原位杂交样本进行检测的技术。它将荧光信号的高灵敏度、安全性，荧光信号的直观性和原位杂交的高准确性结合
起来，通过荧光标记的DNA 探针与待测样本的DNA 进行原位杂交，在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数，从而对染色体或基因异常的细胞、组织样本进行检测和诊断，为各种基因相关疾病的分型、预前和预后提供准确的依据。
6． 聚合酶链式反应（polymerase chain reaction）
【答案】聚合酶链式反应，简写作PCR , 是指根据天然DNA 的复制机制在体外通过酶促反应有选择地大量扩增 （包括分离）一段目的基因的技术。利用两种寡核苷酸引物分别与特异性DNA 区段的正链和负链末端互补，经过模板DNA 变性，模板DN Α-引物的配对，在DNA 聚合酶作用下发生引物延伸反应，三个反应阶段后生成新的子代DNA 双链，经多次循环后得到大量目标DNA
片。
7． 单核哲酸多态性（single nucleotide polymorphism, SNP）
【答案】单核苷酸多态性是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA 序列多态性。它是人类可遗传的变异中最常见的一种，占所有已知多态性的90%以上。SNP 所表现的多态性只涉及单个碱基的变异，这种变异一般由单个碱基的转换或颠换引起。
8． 转录单位（transcription unit）
【答案】转录单位是指从转录起始位点到转录终正位点所对应的、作为RNA 聚合酶模板的基因序列范围，可以是单一基因，也可以是多个基因。一个转录单位就是从启动子到终止子的一段序列，是一段以一条单链RNA 分子为表达产物的DNA 片段，这是转录单位的重要特征。
9． 分子伴侣（molecular chaperone）
【答案】分子伴侣是指一类序列上没有相关性但有共同功能的保守性蛋白质，它们在细胞内能帮助其他多肽进行正确的折叠、组装、运转和降解，如热休克蛋白。
10．基因超家族
【答案】基因超家族是指一组由于序列的同源性通过序列比对可以彼此匹配而相关的基因。判定同源的主要标准是核苷酸残基的保守性，并参考功能的相似性。
二、简答题
11．简述DNA 结合结构域分类及碱性亮氨酸拉链结构的特点。
【答案】（1）蛋白质与DNA 结合区域存在一些特殊的基序（motif ）结构，主要有：
①螺旋一转角一螺旋（HTH ）基序。两段螺旋被一短的转角结构分开，其中一段螺旋为DNA 识别螺旋。 ②锌指基序。由肽链的保守序列中的一对组氨酸加一对半胱氨酸
与一个锌离子形成配位键，这些氨基酸对之间的多肽链成环状突出并折迭成指形结构，多个指结构常串联重复。 锌指族转录因子以二聚体形式同DNA 上的顺式调控元件结合。含锌指基序的转录因子，与GC 盒结合的SP1、 类固醇激素受体家族，抑癌蛋内
1^11都位于螺
等。 ③亮氨酸拉链基序。由一段每隔6个aa 就有一个Leu 的伸展肽链组成，这些周期性出现的 旋的同一侧面，因此两条均含Leu 拉链基序的蛋白质通过亮氨酸侧链的相互作
用形成二聚体。具有亮氨酸拉链基 序的转录因子，如原癌基因
基因产物 及其结合蛋白Max 。 或2
对半胱氨酸④螺旋一环一螺旋（HLHt ）基序。由2个a 螺旋间隔一个非螺旋的环（loop ）组成，如原癌⑤同源域（ho-meodomain ）蛋白。来自控制躯体发育的基因，长约60个氨基酸，其中的DNA 结合区与螺旋 一转角一螺旋相似，主要与DNA 大沟相结合。
（2）碱性亮氨酸拉链结构的特点：
①两个蛋白质分子近处C 端肽段各自形成两性a 螺旋, ot 螺旋的肽段每7个氨基酸残基出现一个亮氨酸残基， 两个a 螺旋的疏水面互相靠拢，两排亮氨酸残基疏水侧链排列成拉链状，形成疏水键使蛋白质结合成二聚体；
②亮氨酸拉链区并不能直接结合DNA , 只有肽链氨基端20~30个富含碱性氨基酸结构域与DNA 结合。
12．什么是葡萄糖效应？
【答案】葡萄糖效应即降解物阻遏，是指在培养基中葡萄糖和乳糖（其他糖类类似）同时存在时，葡萄糖的代谢 产物阻遏了其他糖类操纵子激活复合物的形成，从而使得对应结构基因无法转录，最终影响乳糖的利用的现象。
13．TBP 在真核生物三类RNA 聚合酶的转录起始中有怎样的作用和功能?
【答案】TBP 是一种转录因子，其作用如下:
（1）在RNApol I的转录起始过程中，TBP 是SL1的组分，起定位RNApol I的作用;
（2）RNApol II的转录起始由TBP 识别TATA 枢;
（3）在RNApol III的转录起始过程中，TBP 起定位RNApol III的作用。
14．核糖体有哪些活性中心？
【答案】核糖体至少有5个活性中心：
（1）mRNA 结合位点
位于核糖体小亚基上，在肽基转移位点附近，其功能是结合mRNA 和IF 因子。
（2）A Α-tRNA 结合位点（A 位点）：
即氨酰基位点，即受位，主要位于大亚基，是接受氨酰-tRNA 的部位。
（3）肽基转移部位（P 位点）
即供位，或肽酰基位点，主要位于大亚基，是与延伸中的肽酰tRNA 结合位点。
（4）去氨酰-tRNA 释放位点（E 位点）
位于大亚基，是延伸过程中去氨酰-tRNA 的释放位点。
（5）转肽酶活性中心
位于P 位和A 位的连接处，是形成肽键的部位。
15．碍？
【答案】暂时不能。主要存在的技术障碍有：
（1）体外培养T4淋巴细胞困难：T4淋巴细胞在体内的不同组织环境中分别形成和成熟，于骨髓中生成，在胸腺内分化成熟，然后移居于周围淋巴组织中，而体外很难模拟其所处的环境。
是通过攻击人体内淋巴细胞，使人体的免疫系统遭到破坏而致病的。能不能对艾滋病淋巴细胞而延长生命？主要存在哪些技术上的障患者进行定时输入，通过基因工程生产的特定