2017年北京林业大学生物科学与技术学院705分子生物学考研题库
● 摘要
一、名词解释
1. 操纵子
【答案】操纵子是指原核生物基因中,多个功能上相关的结构基因串联排列在基因组序列中,构成信息区,连同上游启动区和操纵基因区及下游转录终止区一起构成的基因表达单位。
2. tmRNA
【答案】转移—信使RNA 。tmRNA 是指细菌体内一种修复翻译水平上受阻的遗传信息表达过程的反式翻译机制的核心分子,它兼具tRNA 和mRNA 的特点,在SmpB 蛋白的帮助下特异性识别携带mRNA 缺失体的核糖体,在核糖体蛋白S1的传递作用下结合在A 位点上,一方面延续被中断的mRNA 上的遗传信息,一方面终止蛋白质的合成,释放被束缚的核糖体和tRNA 进入新的翻译过程。
3. Edman 降解(Edman degradation)
【答案】Edman 降解是指由P . Edman于1950年首先提出来的,最初用于N 端氨基酸残基分析,现在用于肽端 氨基酸序列测定的实验技术,
其原理是异硫氰酸苯酯能与多肽或蛋白质的游离一末端氨基的反应,切下与之反应的那个氨基酸残基,这样蛋白质或多肽链就减少了一个残基,而且在它的N 端又暴露出一个新的游 离的α-末端氨基,又可参加第二轮反应,如此重复,就可以测出n 个残基的顺序。
4. 基因超家族
【答案】基因超家族是指一组由于序列的同源性通过序列比对可以彼此匹配而相关的基因。判定同源的主要标准是核苷酸残基的保守性,并参考功能的相似性。
5. 内含子(intron )与外显子(exon )
,只转录,在【答案】内含子(intron )是指真核基因中的非编码序列,又称插入序列(IVS )
前体mRNA 加工时被剪切掉;
外显子(exon )是指真核基因中的编码序列,是一个基因表达为多肤链的部分。
6. 单顺反子mRNA (monocistronic mRNA)和多顺反子mRNA (polycistronic mRNA)。
【答案】单顺反子mRNA 是指能翻译成一条肤链的信使核糖核酸(mRNA )来自单顺反子;
,多顺反多顺反子mRNA 是指两个以上相关基因串在一起转录所得到的信使核糖核酸(mRNA )
子mRNA 一般可同步翻译产生功能相关的多个蛋白质或酶。
7. Intein
【答案】内含肽。内含肽是指存在于某些蛋白质前体肽链内部的一些肽段在转变为成熟蛋白质时,通过非酶促的转肽反应被切除,与其对应的是保留于成熟蛋白质中的外显肽。这些肽段具有核酸酶活性。
8. 穿梭载体(shuttle vector)
【答案】穿梭载体是指具有多个复制子能在两个以上的不同宿主细胞复制和繁殖的载体。
9. YAC
【答案】酵母人工染色体。酵母人工染色体是指一种能够克隆长达400Kb 的DNA 片段的载体,含有酵母细胞中 必需的端粒、着丝点和复制起始序列,可用于基因组大片段库构建。
10.核酸分子杂交(hybridization )
【答案】核酸分子杂交是指应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA (或RNA )片段,按碱基互 补关系形成杂交双链分子的一项实验技术,杂交双链可以在DNA 与DNA 链之间,也可在RNA 与DNA 链之间 形成。
二、填空题
11.常见的转录活化域的特征性结构包括:带负电荷的螺旋结构,富含_____的结构和富含_____的结构。
【答案】谷氨酰胺;脯氨酸
【解析】转录激活域是由30〜100个氨基酸残基组成的。根据氨基酸组成特点,转录激活域又有酸性激活域、 谷氨酰胺富含区域及脯氨酸富含区域。
12.DNA 序列分析常用的方法有_____和_____。
【答案】Sanger 双脱氧链终止法;化学修饰法
【解析】测定DNA 的核苷酸序列是分析基因结构与功能关系的前提。从小片段重叠法到加减法、双脱氧链 终止法、化学降解法、自动测序,DNA 测序技术发展很快。目前在实验室手工测序常用Sanger 双脱氧链终止法、 Maxam-Giibert 化学修饰法、DNA 杂交测序法等。
13.SOS 应答系统是DNA 损伤修复的一个重要途径,蛋白在这里的主要功能是通过引起_____蛋白的降解,从而解除它对_____相关基因转录的抑制。
【答案】LexA 阻遏;DNA 损伤修复
【解析】当细菌DNA 遭到破坏时,细菌会启动一个被称为SOS 的诱导型DNA 修复系统,但由于参与SOS DNA修复系统的许多基因分散在染色体的各个部位,都同时受到LexA 阻遏蛋白的抑制,平时表达水平很低; 而一般情况下
,
基因表达并不完全受阻遏蛋白的阻遏,
recA 基因的表达产物RecA 蛋白在这里的主要功能是通可以参与细菌中的SOS 体系的诱导表达,
过引起LexA 阻遏蛋白的降解,从而解除它对DNA 损伤修复 相关基因转录的抑制。
14.原核生物DNA 聚合酶III 中β亚基二聚体的一个主要功能是_____。
【答案】提高酶的持续合成能力
【解析】大肠杆菌的DNA 聚合酶III 包含有10个亚基,生物活性为二聚体。其中β亚基的功能犹如夹子,两个β亚基夹住模板与引物双链向前滑行,使聚合酶在完成复制前不再脱离DNA ,从而提高酶的持续合成能力。
15.在蛋白质序列测定中必须先用对蛋白质的多肽链进行部分水解成较小的肽段,才能进一步采用_____法进行肽段的序列测定。
【答案】蛋白酶或化学试剂;Edman 降解
16.PCR 反应主要有_____、_____和_____三个步骤。
【答案】变性;退火;延伸
【解析】PCR 反应是模仿生物体内DNA 的复制过程,典型的PCR 反应包括以下三个过程: (1)变性:双链DNA 在高温条件下(90〜95°C )变成两条单链,作为DNA 复制的模板; (2)退火:单链DNA 在较低温度下(37〜60°C )与引物互补结合,形成杂交双链结构; (3)延伸:升温至70〜75°C , 结合模板上的引物在耐热DNA 聚合酶的催化下按5' —3' 方向延伸,合成 模板DNA 的互补链。
重复以上过程经过多次循环就得到所需要的目的DNA 片段。
三、简答题
17.真核生物如何进行翻译后水平的调节?
【答案】真核生物基因翻译的最初产物是一个大的蛋白质分子。有时,必须经酶切成更小的分子才能有生物活性。 加工过程包括:
(1)除去起始的Met 或随后的几个残基;
(2)切除分泌蛋白或膜蛋白
(3)形成分子内的二硫键;
(4)肽键断裂或切除部分肽段;
(5)氨基酸修饰;
(6)加上糖基、脂类分子或配基。
此外需在分子伴侣帮助下进行折叠,并正确定位,这种后加工过程在基因表达调控上起主要作用。
18.简述原核生物与真核生物mRNA 的主要差别。
【答案】(1)真核生物5’一端有帽子结构,大部分成熟的mRNA 还同时具有3’一多聚A 尾巴,原核一般没有;
末端的信号序列;