2018年第三军医大学卫生毒理学617西医综合之生物化学考研仿真模拟五套题
● 摘要
一、名词解释
1． 米氏方程。
【答案】米氏方程是指表示一个酶促反应的起始速度（V ）与底物浓度（[S]）关系的动力学
方程
2． 谷胱甘肽。 它是在稳态理论基础上推导得出的。
【答案】谷胱甘肽是存在于动植物和微生物肽键，由谷氨酸的竣基与半胱氨酸的氨基缩合而成。显然这与蛋白质分子中的肽键不同。由于GSH 中含有一个活泼的疏基，很容易氧化，二分子GSH 脱氢以二硫键相连形成 氧化型的谷胱甘肽（GSSG ）。
3． two-dimensional electrophoresis。
【答案】two-dimensional electrophoresis （双向电泳）是指唯一能同时分辨上千个蛋白质点的技术。其原理是根据 蛋白质的两个一级属性，即等电点和相对分子质量的特异性，将蛋白质混合物在电荷（等电聚焦，IEF ）和相对分子质量（变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，SDS-PAGE ）两个水平上进行分离。
4． 最适pH 。
【答案】酶的最适pH 是指酶促反应过程中，当
促反应速度减慢。
5． 启动子（promoter ）。
【答案】启动子是指与转录起始有关的一段DNA 序列，一般位于结构基因端，通过与RNA 聚合酶的相互作
用起始转录。
6． 脂肪动员（fatty mobilization）
【答案】脂肪动员是指脂库中的储存脂肪，在脂肪酶的作用下，逐步水解为脂酸和甘油，以供其他组织利用的过程。
7． 胆汁盐。
【答案】胆汁盐（胆汁酸）是胆固醇主要排泄形式，胆固醇先转化为活化的中间体胆酰CoA ，然后再与甘氨酸（或牛磺酸）结合成甘氨（牛磺）胆酸，它们分泌到肠中，有助于脂质的消化和吸收。
时的环境pH 值，高于和低于此值，酶
8． ACP 。
【答案】ACP 即酰基载体蛋白，是一种低相对分子质量的蛋白质，组成脂肪酸合成酶复合体的一部分，并且在脂肪酸生物合成时作为酰基的载体，酰基以硫酯的形式结合在4-磷酸泛酰疏基乙胺的巯基上，后者的磷酸基团又与酰基载体蛋白的丝氨酸残基酯化。
二、问答题
9． 丙二酸是琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制剂，试分析加入草酰乙酸为什么能解除该抑制作用？
【答案】竞争性抑制（如本例中的琥珀酸）可经由增加底物浓度而解除，草酰乙酸（或该循环中的其他中间代谢物）可通过梓檬酸循环转化为琥珀酸，故可解除丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制作用。
10．同一种生物的不同个体可以测定DNA 碱基有差异，但合成的蛋白质序列无变化，说明原因。
【答案】差异可能为非编码区或内含子；编码区差异可能由于密码子简并性。
11．新鲜的鸡蛋为什么能在冰箱中保持数周？如除去蛋清只留蛋黄在冰箱中能保持数周不坏吗？为什么？
【答案】新鲜鸡蛋在冰箱中可保存比较长的时间，但除去蛋清只剩蛋黄的鸡蛋即使在冰箱中也不能保存数天不坏，这是因为蛋清中含有抗生物素因子和溶菌酶，可阻止细菌生长。
12．重组DNA 技术一般都需要哪些必要条件？
【答案】限制酶切割DNA ，DNA 连接酶连接DNA ，合适的载体用来接收外源DNA ，细胞系用于接收载体，以及筛选正确的转化体。
13．列出一个转座子插入到一个新位点所要求的步骤。
【答案】步骤包括：（1）首先，在靶位点处产生一个交错切口；（2）接着，转座子与靶位点连接；（3）最后，填补插入位点两侧的单链区。
14．试分析为什么厌氧微生物会含有某些柠檬酸循环途径中的酶但却没有完整的柠檬酸循环？
【答案】因为该循环的某些中间代谢物，
如柠檬酸和琥珀酰
终需要被再氧化的还原性辅酶。
15．在大量的丙二酸存在的情况下，将甲基C 为
发现肝细胞内的异柠檬酸的和等是其他生物分子的合成前体，即便是厌氧微生物也必须具备合成这些中间代谢物的能力，而完整的柠檬酸循环则会产生最的丙酮酸给离体的肝细胞，经过一段时间后，带有同位素标记。为什么？
和被标记的异柠檬酸，是因为被标记的丙酮酸在丙酮酸羧【答案】丙二酸是玻珀酸脱氢酶的竞争性抑制，如果它大量存在，可以认为它将完全阻断三羧酸循环。肝细胞内之所以发现有化酶的催化下，转变成草酰乙酸，这种带有同位素标记的草酰乙酸与原来带有标记的丙酮酸依次
在柠檬酸合酶和顺乌头酸酶的催化下，形成
16．简述酶的诱导契合学说的要点。 和被标记的异柠檬酸。
【答案】酶分子活性部位的结构原来并非和底物的结构互相吻合，但酶的活性部位不是刚性的结构，它具有一定的柔性。当底物与酶相遇时，可诱导酶蛋白的构象发生相应的变化，使酶活性部位上有关的各个基团达到正确的 排列和定向，因而使酶和底物契合而结合成中问产物，并引起底物发生反应。
三、论述题
17．何谓复制体? 试述其主要成分的功能。
【答案】DNA 复制过程中，在复制叉上分布着各种与复制有关的酶和蛋白质因子，它们在DNA 链上形成离散的复合物，彼此配合进行精确的复制，这个结构叫做复制体。
复制体主要的成分功能：
（1）解螺旋酶或称解链酶：使复制叉前方的两条DNA 母链解开；
（2）单链结合蛋白（SSB ）:稳定DNA 解开的单链，阻止复制和保护单链部分免被核酸酶降解；
（3）拓扑异构酶或称DNA 螺旋酶：有效削弱螺旋状DNA 结构解旋后产生的拓扑应力； （4）引物合成酶：以DNA 为模板合成RNA 引物；
（5）DNA 聚合酶全酶二聚体的一个亚基与前导链模板结合，另一个亚基与形成一个环的后随链模板结合，发挥催化作用促使DNA 新链合成；
（6）DNA 聚合酶I :切除RNA 引物，填补缺口；
（7）DNA 连接酶：连接相邻DNA 片段的断口。形成两条连续的新链。
18．蛋白质分离纯化技术中哪些与它的等电点有关? 试述这些技术分离纯化的原理。
【答案】蛋白质分离纯化技术中主要有等电点选择性沉淀和等电聚焦电泳两项技术与蛋白质的等电点有关。
等电点选择性沉淀：蛋白质分子属于两性离子，所带电荷因溶液pH 不同而变化，当所带正负电荷相等时，溶液的pH 即为该两性离子的等电点。在等电点时，蛋白质分子以双极离子存在，总净电荷为零，颗粒无电荷问的排斥作用，易凝集成大颗粒，因而最不稳定，溶解度最小，易沉淀析出。不同等电点的蛋白质可以通过调整溶液pH 依次沉淀，并且沉淀出来的蛋白质可保持天然构象，能再溶解于水中并具有生物活性。等电聚焦电泳：蛋白质在等电点时，总净电荷为零，在外电场作用下，既不向正极移动，也不向负极移动。各种蛋白的等电点不同，在同一pH 时所带电荷不同，在同一电场作用下移动的方向和速度也不同，可用电泳来分离提纯蛋白质。等电聚焦电泳利用聚丙烯酰胺凝胶内的缓冲液在电场作用下在凝胶内沿电场方向制造一个pH 梯度。所用的缓冲液是低分子质量的有机酸和碱的混合物，该混合物称之为两性电解质（ampholytes ）。当蛋白质样品在这样的凝胶上电泳时，每种蛋白质都将迁移至与它的pI 相一致的pH 处，具有不同
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