2017年赣南师范学院脐橙学院(生命与环境科学学院)828分子生物学考研强化模拟题
● 摘要
一、名词解释
1. DNA 复性(DNA renaturation)
【答案】DNA 复性是指DNA 双螺旋变性后的两条互补单链重新恢复成双螺旋结构的过程。
2. 感受态细胞(competent cell)
【答案】感受态细胞是指受体细胞经过一些特殊方法(如CaCL 等化学试剂)的处理后,细胞膜的通透性发生变化,成为能容许外源DNA 的载体分子通过的细胞。
3. Gene Family
【答案】基因家族。基因家族是指一组功能相似且核苷酸序列具有同源性的基因,可能由某一共同祖先基因(ancestral gene
)经重复和突变产生。基因家族的成员可以串联排列
,如rRNA 、tRNA 在一起,形成基因族(gene cluster)或串联重复基因(tandemly repeated genes)
和组蛋白的基因;有些基因家族的成员也可位于不 同的染色体上,如珠蛋白基因;有些成员不产生功能产物,这种基因称为假基因(Pseudogene )。
4. Edman 降解(Edman degradation)
【答案】Edman 降解是指由P . Edman于1950年首先提出来的,最初用于N 端氨基酸残基分析,现在用于肽端 氨基酸序列测定的实验技术,
其原理是异硫氰酸苯酯能与多肽或蛋白质的游离一末端氨基的反应,切下与之反应的那个氨基酸残基,这样蛋白质或多肽链就减少了一个残基,而且在它的N 端又暴露出一个新的游 离的α-末端氨基,又可参加第二轮反应,如此重复,就可以测出n 个残基的顺序。
5. SDS 电泳(SDS-PAGE )
【答案】SDS 电泳(SDS-PAGE )是指根据SDS 和还原试剂将蛋白质分子解聚后亚基的大小,在恒定pH (碱性) 缓冲系统中分离的方法,主要用于测定蛋白质亚基分子质量。
6. 阻遏蛋白
【答案】阻遏蛋白是指一类在转录水平对基因表达产生负控作用的蛋白质,在一定条件下与DNA 结合,一般具有诱导和阻遏两种类型。
7. Blue-white screening
【答案】蓝白斑筛选。蓝白斑筛选是指基于半乳糖苷酶系统的一种重组子筛选方法。其基本原理是很多载体都
携带一段来自大肠杆菌的操纵子DNA 区段,其中有半乳糖苷酶基因
的调控序列和前146个氨基酸的编码信息,这种载体适用于可编码半乳糖苷酶C 端部分序列的宿主细胞。宿主经上述质粒转化后,
整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补
活性蛋白质。由
互补而产生的 基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完,产生完整 细菌在诱导剂的作用下,在生色底物存在时产生易于识别的蓝色菌落。而当外源DNA 插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地导致无互补能力的氨基端片段,使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。
8. Non-Watson-Crickbasepairing
【答案】非沃森-克里克式碱基配对。非沃森-克里克式碱基配对是指不完全依照Α-T/U,C-G 配对的一些碱基配对现象,如U-G 配对。
二、简答题
9. 简述原核生物与真核生物mRNA 的主要差别。
【答案】(1)真核生物5’一端有帽子结构,大部分成熟的mRNA 还同时具有3’一多聚A 尾巴,原核一般没有;
(2)原核的mRNA 可以编码几个多肤,真核只能编码一个,原核生物以多顺反子的形式存在,真核以单顺反子形式存在;
(3)原核生物以AUG 作为起始密码,有时以GUG ,UUG 作为起始密码,真核几乎永远以AUG 作为起始密码;
(4)原核生物mRNA 半衰期短,真核生物的mRNA 半衰期长。
10.简述真核生物转录前水平的调控机制。
【答案】真核生物转录前水平的基因调节方式主要有如下几种:
(1)染色质丢失。某些低等真核生物,如蛔虫,在其发育早期卵裂阶段,所有分裂的细胞除一个之外,均 将异染色质部分删除掉,从而使染色质减少约一半,而保持完整基因组的细胞则成下一代的生殖细胞,在此加工 过程中DNA 发生了切除并重新连接。
(2)基因扩增。基因扩增是细胞短期内大量产生出某一基因拷贝从而适应特殊需要的一种手段,通过改变 基因数量而调节基因表达产物的水平。某些脊椎动物的昆虫的卵母细胞,为贮备大量核糖体以供卵细胞受精后发 育的重要,通常都要专一性地增加编码核糖体RNA 的基因。
(3)基因重排。基因组序列发生改变,较常见的是失去一段特殊序列,或是一段序列从一个
位点转移到另 一个位点。重排可使表达的基因发生切换,由表达一种基因转为表达另一种基因。
DNA 的碱基可被甲基化,(4)染色体DNA 的修饰。主要形成5-甲基胞嘧啶甲基腺嘌呤
DNA 稳定性以及与蛋白
质相互作用方式的改变,从而控制基因的表达。
(5)异染色质化。凝缩状态的染色质称为异染色质,为非活性转录区。真核生物通过异染色
和少量DNA 甲基化作用能引起染色质结构、DNA 构象、在生物发育和分化过程中,
质化而关闭某 些基因的表达,如雌性晡乳动物细胞有两个X 染色体,其中一个高度异染色质化而永久性失去活性,通常染色 质的活性转录区没有或很少甲基化,非活性区则甲基化程度高。
11.什么是封闭复合物、开放复合物以及二元复合物?
【答案】(1)封闭复合物是指RNA 聚合酶全酶与DNA 组成的复合物。此时DNA 仍处于双链状态,不能起始RNA 的合成。
(2)开放复合物是指RNA 聚合酶全酶所结合的DNA 序列中有一小段双链被解开,封闭复合物转变形成的复合物。此时的复合物形成转录泡,酶的构象也发生改变,β和β' 亚基牢固夹住DNA ,这种由启动子与RNA 聚合酶的复合物在这里能进行RNA 的起始合成。
(3)三元复合物是指由开放复合物与最初的两个NTP 相结合并在两个核苷酸之间形成磷酸二酷键后所形成的包括RNA 聚合酶、DNA 和新生RNA 的复合物。
12.如果你是一家生物技术公司的CEO 或者负责技术的高层人员,有人向你推荐一种治疗癌症的特效药,寻 求与你们公司合作。你将在哪些方面对这种药物进行评价?
【答案】(1)安全性:需考察药物所用原材料、表达系统以及药品本身的安全性,必须做毒性实验和临床检验来 进一步确定其安全性;
(2)有效性:检测该药物靶向性是否够好,能否顺利的到达病灶,对癌细胞具有高效的特异性而对正常细 胞无毒害作用,疗效是否确切;
(3)稳定性:考察药物加工过程的稳定性、贮藏稳定性以及治疗效果稳定性;
(4)适用性:是否适用于不同生理状态和体质的人群。
13.什么是出核信号序列?其序列组成有哪些特点?主要功能是什么?
【答案】⑴出核信号序列(NES )是指进出细胞核的蛋白质上能被相应的核转运蛋白所识别,指导该蛋白质出 核的氨基酸序列。
(2)序列组成特点
经典的NES 序列是由疏水性氨基酸尤其是亮氨酸和异亮氨酸富集的区域构成,其保守性氨基酸排序为其中,代表疏水性氨基酸L 、I 、F 或M , 而X 代表任意氨基酸。
(3)NES 主要功能是被出核因子识别并结合,从而携带自身蛋白出核。
14.类固醇激素对个体基因表达的调节存在组织特异性,在不同的组织中激活不同基因的表达,请分析出现 这种现象的可能原因是什么?
【答案】许多类固醇激素以及一般代谢性激素的调控作用都是通过起始基因转录而实现的。靶细胞具有专一的细胞质受体,可与激素形成复合物,导致三维结构甚至化学性质的变化。经修饰的受体与激素复合物通过核膜进入 细胞核内,并与染色质的特定区域相结合,导致基因转录的起始或关闭。类固醇激素在不同的组织中有不同的类 固醇激素受体,不同的受体所识别的HRE (激素应答因子)也因而不同,所以能够表达不同的基因,即在不同 的组织中类固醇激素受体的表达也有组成特异性。