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一、名词解释

1． 增色效应（hyperchromiceffect ）。

【答案】增色效应（hyperchromice ffect）是指核酸变性时由于高级结构被破坏，碱基暴露程度增加而使得

2． 终止子

3． 基因。

【答案】基因是指编码蛋白质或RNA 等具有特定功能产物的遗传信息基本单位，其化学本质

，主要包括编码序列、间隔序列和调控序列。 为DNA （对于RNA 病毒则是RNA ）

4． 蛋白质的一级结构（primary structure）。

【答案】蛋白质的一级结构是指肽链中的氨基酸排序。维持一级结构的化学键为共价键，主要为肽键。

5． 表达载体（expression vector）。

【答案】表达载体是指为使插入的外源DNA 序列可转录，进而翻译成多肽链而特意设计的克隆载体。

6． 促进扩散。

【答案】促进扩散是指不需要消耗代谢能量，小分子物质利用膜两侧的电化学势梯度而通过膜上的载体蛋白或离子通道进行转运的方式。

7． 密码子的兼并性（degenerate ）。

【答案】密码子的兼并性是指大多数氨基酸都有两种以上的密码子，不同密码子编码同一种氨基酸的这种性质。

8． 亲和层析。

【答案】亲和层析是指利用蛋白质分子对其配体分子特有的识别和结合能力建立起来的分离纯化技术。把待纯化蛋白质的特异配体共价连接到载体上，将此载体装入层析柱，对蛋白质混合物进行柱层析时，待纯化的蛋白质与 配体特异结合，吸附在层析柱上，而其他的蛋白质不能被吸附，通过洗脱可以除去，最后用含游离配体的溶液或 用改变了 pH 或离子强度的溶液将与配体结

第 2 页，共 22 页 的光吸收值升高的现象。 是分子中终止转录的核苷酸序列。 【答案】终止子

合的蛋白质洗脱下来

9． Chargaff 定律。

【答案】Chargaff 定律是指通过纸层析对多种生物DNA 的碱基组成进行分析，发现DNA 中

，胞嘧啶和鸟嘌呤数目相等（C=G）的一种规则。 的腺嘌呤数目与胸腺嘧啶的数目相等（A=T）

10．肽（peptide ）。

【答案】肽是氨基酸的线性聚合物，常称肽链（peptidechain ）。蛋白质是由一条或多条具有特定氨基酸序列的多肽链构成的大分子。

二、问答题

11．作为克隆载体的基本要求是什么？

【答案】（1）具有自主复制的能力；

（2）携带易于筛选的选择标记

（3）含有多种限制酶的单一识别序列，以供外源基因插入；

（4）载体应尽量小，便于导入细胞和进行繁殖；

（5）使用安全。

12．一条单链DNA 与一条单链RNA 分子量相同，你至少可以用几种方法将它们分开？并简述其原理。

【答案】（1）用专一性的RNA 酶与DNA 酶分别对两者进行水解。

（2）用碱水解。RNA 能够被水解，而DNA 不被水解。

（3）进行颜色反应，二苯胺试剂可以使DNA 变成蓝色，苔黑酚（地衣酚〉试剂能使RNA 变成绿色。

，含有U 的是RNA , 含有T 的是（4）用酸水解后，进行单核苷酸的分析（层析法或电泳法）

DNA 。

DNA 和RNA 除了在组成上具有差异外，其物理化学性质也有所差异，利用这些差异，我们可以达到鉴定它们的目的。

13．概述B 族维生素在糖代谢中的重要作用。

【答案】B 族维生素主要以辅酶形式参与糖代谢的酶促反应过程，当其缺乏时会导致糖代谢障碍。

（1）糖酵解途径，甘油醛-3-磷酸脱氢生成1，3-二磷酸甘油酸时需要维生素PP 参与； （2）糖有氧氧化，丙酮酸及旷酮戊二酸氧化脱羧需要维生素和硫辛酸参与；异柠檬酸氧化脱羧需要维生素参与； 维生素维生素PP 、泛酸

（3）磷酸戊糖途径，Glc-6-P 及6-磷酸葡萄糖酸脱氢需要维生素PP 参与；

（4）糖异生途径中需要维生素PP 及生物素参与。

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14．G 蛋白作为许多激素受体和效应器之间的中间接受体在细胞信息传导中发挥着极其重要的作用，试设计一个实验确定植物细胞中也含有这种蛋白质或类似的蛋白质。

【答案】（1）使用重组DNA 技术，制备编码G 蛋白a 亚基或者编码与GTP 结合的结构域的核苷酸序列，以此作为探针与目标植物的DNA 杂交，确定有无同源的序列。

（2）制备哺乳动物G 蛋白的单克隆抗体，与目标植物细胞的抽取物保温，检测有无其交叉反应的植物蛋白。如果有，将其分离纯化，在体外进一步研究它的性质，如能不能结合GTP 。

（3）将目标植物细胞的抽取物与百日咳毒素或霍乱毒素一起保温，寻找有无被ADP-核糖基修饰的蛋白质。

15．什么是生物膜？研宄生物膜有何重要意义？

【答案】（1）生物膜是细胞质膜和细胞内膜系统的总称，生物膜是由极性脂和蛋白质组成的超分子复合物，厚约6〜10nm ，是构成细胞结构最基本的组分之一。

（2）真核细胞除了有把原生质与环境隔开的质膜外，还拥有复杂的细胞内膜系统，如核膜、内质网、高尔基体，线粒体膜、质体膜等。这些膜系统不仅是维持细胞内环境相对稳定的有高度选择性的半透性屏障，而且直接参与物质转运、能量转换、信息传递、细胞识别等重要的生命活动。细胞的形态发生、分化、生长、分裂以及细胞免疫、代谢调节、神经传导、药物和毒物的作用、生物体对环境的反应等，都与生物膜有密切的关系。因此，生物膜已经成为当前分子生物学，细胞生物学中最活跃的高科技研宄领域之一。

16．参与IMP 合成的第一个酶利用Gin 作为氨基的供体而不是直接使用氨，这个现象在其他地方也能发现。为什么自然利用一个更耗能的过程（Gin 作为氨基供体需要消耗ATP ）?

【答案】参与IMP 合成的第一个酶实际上催化的是一种转氨基反应，该反应的机理是含有孤对电子的N 原子进行亲核进攻。然而在生理pH 下，氨被质子化，形成孤对电子不再存在，从而使转氨基反应无法进行。利用Gin 作为氨基的供体就可以避免上述现象发生。

17．Matthew Meselson和Franklin Stahl为了验证DNA 复制的半保留复制，设计了一个非常巧妙的实验：将大肠杆菌先放到含有

子几乎都是的培养基中连续培养15代，以使细胞内的DNA 上的N 原的培养基上继续培养数代。分别分离各代细胞的DNA ，

的培养基中培养的大然后将大肠杆菌改放在再使用CsCl 密度梯度离心方法分析各代DNA ，并比较各代细胞DNA 在离心管中的相对位置。最终确定了DNA 复制的确遵循半保留规则。如果修改 验方案：将本来在

肠杆菌细胞，直接改放在的培养基中继续培养数代，同样抽取各代细胞中的DNA ，通过密度

，梯度法离心分析各代DNA 在离心管中的相对位置那么实验结果能否证明DNA 的 半保留复制？

【答案】不能。因为DNA 母链是高度甲基化的，而新生链甲基化程度较低，或者还没有来得及甲基化，如果直 接将大肠杆菌从为培养基改放在的培养基上培养，则子链的DNA 会因的参入，浮力密度会提高，但原来的母链因为甲基化，其相对密度会比未甲基化的DNA 高，

第 4 页，共 22 页 两种因素作用正好抵消，使得不同代数的DNA 不容易分开。