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题目:虎奶菇菌核多糖分离纯化、结构表征和生物活性研究

关键词:虎奶菇菌核多糖,抗氧化,化学结构,分子构象

  摘要


虎奶菇是一种十分珍贵的食用和药用真菌,属担子菌亚门,虎奶菇多糖具有抗病毒、抗衰老、抗氧化、以及增强免疫力等多种生物活性,目前对虎奶菇的栽培条件研究较多,对其化学结构尚不清楚。本文以虎奶菇菌核为原料,进行提取,分离和纯化,得到虎奶菇菌核多糖,对其进行了抗氧化、化学结构、溶液行为等方面的研究。
1. 虎奶菇菌核多糖APPS1的提取、分离和纯化
采用热碱浸提法从虎奶菇菌核粉末中提取到虎奶菇粗多糖PPS,通过DEAE-52纤维素柱层析和Sephadex G-150凝胶柱层析纯化得到虎奶菇多糖APPS1,通过紫外光谱和高效液相色谱(HPLC)证明APPS1为均一多糖,平均分子量为5.96×105Da。
2. 虎奶菇菌核多糖的体外抗氧化活性
对虎奶菇菌核粗多糖PPS、盐洗虎奶菇多糖APPS、虎奶菇菌核多糖APPS1进行了总还原能力、体外清除羟自由基能力、清除超氧阴离子自由基能力、清除DPPH·的能力测定,实验结果证明,三种多糖均有一定的抗氧化能力,其中抗氧化能力与多糖的浓度呈现量效关系
在测定体外清除羟自由基以及超氧阴离子自由基的能力中发现,虎奶菇菌核粗多糖PPS的清除作用最强,这可能是因为粗多糖中含有多种组分,几种组分的协调作用强于一种组分。分离纯化得到的纯品APPS1在清除DPPH·的实验中,能力最强,这说明这种组分可能是虎奶菇菌核粗多糖中清除DPPH·的主要有效成分。
3. 虎奶菇菌核多糖APPS1的化学结构研究
经过高效液相色谱法、GC分析、红外色谱等方法对APPS1分析,得出APPS1中单糖组成只有葡萄糖,对APPS1进行高碘酸氧化和Smith降解,分析出APPS1中存在1→或者1→6连接的键型,1→2和1→4、1→3位连接的糖苷键,以及1→2,1→,1→6或者1→2,6糖苷键。红外色谱显示APPS1是以β-D-吡喃葡萄糖为单元连接的多糖。
4. 虎奶菇菌核多糖的溶液行为
从pH、温度、变性剂、多糖浓度以及金属离子等因素对虎奶菇多糖APPS1的比浓粘度进行了研究,每个因素的对其比浓粘度的影响各不相同。刚果红实验表明虎奶菇菌核多糖APPS1具有螺旋结构。