● 摘要
众多研究表明H2O2、NO、Ca2+和PK/PP参与保卫细胞信号转导，但H2O2、NO、Ca2+和PK/PP在光/暗调控上、下表皮气孔运动中的作用是否相同尚不清楚，光/暗调控上、下表皮气孔运动中H2O2与Ca2+、PK/PP的关系以及NO与Ca2+、PK/PP的关系是否存在差异也需要研究。本文借助表皮条分析和激光扫描共聚焦显微镜技术，对上述问题进行了比较研究。本文的主要结果如下:
1. 光下上、下表皮气孔开度均显著高于暗中，表明上、下表皮气孔关闭均被暗诱导；光下上表皮气孔开度小于下表皮，暗中则大于下表皮，表明下表皮气孔运动对光更敏感。
2.光/暗调控上、下表皮气孔运动均与H2O2有关，上、下表皮保卫细胞H2O2水平均为光下低而暗中高；暗中下表皮气孔保卫细胞H2O2水平较上表皮为高。
3.光/暗调控上、下表皮气孔运动均与NO有关，上、下表皮保卫细胞NO
水平均为光下低而暗中高；暗中下表皮气孔保卫细胞NO水平较上表皮为高。
4.光/暗调控上、下表皮气孔运动均有Ca2+参与；暗中下表皮保卫细胞內源Ca2+水平高于上表皮保卫细胞。
5. 光/暗调控上、下表皮气孔运动均有PK/PP（包括MAPK、CDPK、PTP）参与；暗中上表皮保卫细胞MAPK活性较高，下表皮保卫细胞CDPK及PTP活性较高。
6.上、下表皮中，EGTA(Ca2+螯合剂)、LaCl3（质膜钙通道阻断剂）、RR（胞内钙通道阻断剂）显著抑制外源H2O2促进气孔关闭的效应，但CAT（H2O2清除剂）、Vc（清除H2O2的还原底物）及DPI（NADPH氧化酶的抑制剂）无显著抑制Ca2+促进气孔关闭的效应，暗示光/暗调控气孔运动中Ca2+在H2O2的下游起作用。內源H2O2检测结果显示，EGTA、LaCl3、RR能够抑制暗诱导的气孔关闭，但不降低暗诱导的保卫细胞H2O2水平升高；光下Ca2+诱导气孔关闭，但未诱导保卫细胞H2O2水平升高。上述结果证实，光/暗调控上、下表皮气孔运动中Ca2+在H2O2下游起作用。
7.上、下表皮中，EGTA、LaCl3、RR显著抑制SNP(NO供体)促进气孔关闭的效应，但c-PTIO（NO清除剂），L-NAME（NOS抑制剂）无显著抑制Ca2+促进气孔关闭的效应，暗示光/暗调控气孔运动中Ca2+在NO的下游起作用。內源NO检测结果显示，EGTA、LaCl3、RR能够抑制暗诱导气孔关闭，但不降低暗诱导保卫细胞NO水平升高；光下Ca2+诱导气孔关闭，但未诱导保卫细胞NO水平升高。上述结果证实，光/暗调控上、下表皮气孔运动中Ca2+在NO的下游起作用。
8.上、下表皮中，PD98059（MAPK抑制剂）、TFP（CDPK抑制剂）、PAO（PTP抑制剂）显著抑制暗和H2O2促进气孔关闭的效应。內源H2O2检测结果显示，PD98059、TFP、PAO抑制暗诱导和外源H2O2处理引起的保卫细胞H2O2水平升高。上述结果表明PK/PP通过调控H2O2水平调节气孔运动，但未排除PK/PP也可能在H2O2下游起作用。
9.上、下表皮中，PD98059、TFP、PAO能够显著抑制暗和SNP促进气孔关闭的效应。內源NO检测结果显示，PD98059、TFP、PAO抑制暗诱导和外源NO处理引起的保卫细胞NO水平升高。上述结果表明PK/PP通过调控NO水平调节气孔运动，但未排除PK/PP也可能在NO下游起作用。