2017年河北大学分子生物学考研复试核心题库
● 摘要
一、名词解释
1． DNA 复性（DNA renaturation）
【答案】DNA 复性是指DNA 双螺旋变性后的两条互补单链重新恢复成双螺旋结构的过程。
2． 分子伴侣（molecular chaperone）
【答案】分子伴侣是指一类序列上没有相关性但有共同功能的保守性蛋白质，它们在细胞内能帮助其他多肽进行正确的折叠、组装、运转和降解，如热休克蛋白。
3．
【答案】，是指一种利用非放射即荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization）
性的劳光信号对原位杂交样本进行检测的技术。它将荧光信号的高灵敏度、安全性，荧光信号的直观性和原位杂交的高准确性结合
起来，通过荧光标记的DNA 探针与待测样本的DNA 进行原位杂交，在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数，从而对染色体或基因异常的细胞、组织样本进行检测和诊断，为各种基因相关疾病的分型、预前和预后提供准确的依据。
4． MissenseMutation
【答案】错义突变。错义突变是指DNA 分子中碱基对的取代，使得mRNA 的某一密码子发生变化，由它所编码的氨基酸基变成另一种的氨基酸，使得多肽链中的氨基酸序列也相应的发生改变的突变。
5． 拓扑异构酶（topoisomerase ）
【答案】拓扑异构酶是指能在闭环DNA 分子中改变两条链的环绕次数的酶，其作用机制是先切断DNA ，让DNA 绕过断裂点以后再封闭形成双螺旋或超螺旋DNA 。
二、简答题
6． 什么是CpG 岛？ CpG 岛高度甲基化所表示的含义是什么？
【答案】在真核生物中，5-甲基胞嘧啶主要出现在CpG 序列、CpXpG 、CCA/TGG和GA TC 中。因为高等生物CpG 二核苷酸序列中的C 通常是甲基化的，极易自发脱氨，生成胸腺嘧啶，所以，CpG 二核苷酸序列出现的频 率远远低于按核苷酸组成计算出的频率。由于这些CpG 二核苷酸通常成串出现在DNA 上，这段序列往往被称为 CpG 岛。
DNA 甲基化导致某些区域DNA 构象变化，从而影响了蛋白质与DNA 的相互作用，抑制了转录因子与启动 区DNA 的结合效率。甲基胞嘧啶在DNA 上并不是随机分布的，基因的5’端
和3’端往往富含甲基化位点， 而启动区DNA 分子上的甲基化密度与基因转录受抑制程度密切相关。甲基化CpG 的密度和启动子强度之间的平 衡决定了启动子是否具有转录活性。此外，由于CpG 高度甲基化也增加了胞嘧啶残基突变的可能性，所以
调节基因表达。
7． 简述激活蛋白（CAP ）对转录的正调控作用。
【答案】CAMP 与CRP 结合后形成复合物激活蛋白CAP 。在缺乏葡萄糖时，CAP 合成量增加，提高酶与启动子 结合常数，CAP
起到取代区功能的作用；CAP 还能抑制RNA 聚合酶与DNA 中其他位点的结合，提高与其特定启动子结合的概率。
8． 简述真核生物核基因mRNA 前体的剪接机制。
【答案】GT-AG 内含子的剪接机制:
（1）U1snRNP 识别外显子的5' 末端剪接序列，并与其互补而结合。U2辅助因子（U2AF ）随后结合在分支点下游嘧啶区。某些剪接和调节因子将U1 snRNP 和U2AF 连在一起，组成E 复合物。
（2）U2snRNA 含有与分支点互补的序列，在其辅助因子帮助下结合其上，E 复合物转变为A 复合物。
（3）U4与U6和U5 snRNP 三聚体进入A 复合物后形成B1复合物，组成剪接体。
（4）U1 snRNP随即被释放，腾出空间，使U5 snRNP得以从外显子转到内含子，U6结合到5' 剪接点上，构成B2复合物。
（5）A TP 水解供给能量，U4与U6解离，U4 snRNP释放，U6随即与U2碱基配对，并自身折回形成发夹结构的C1复合物，U6/U2催化内含子序列中分支部位中腺苷酸残基（A ）的2'-OH 攻击内含子5' 末端与外显子1连接的磷酸二酯键，剪下了外显子1，而腺苷酸原来己有以3' ，5'-磷酸二酯键相连的两个相邻的核苷酸残基，加上此2' ，5'-磷酸二酯键的连接后，形成了“套索”中间产物。
（6）U5 snRNP 与3' 剪接点结合，在U6/U2的催化下，已被剪切下的外显子1的3' 末端-OH 攻击内含子3，末端与外显子2之间的3' ，5'-磷酸二酯键，链断裂，内含子以套索形式被剪切下来，同时外显子1与外显子2连接起来。
A T-AC 内含子的剪接机制:与上述机制相似，但参与这类内含子剪接体的成分有所不同，除保留U5 snRNP外，以U11 snRNP和U12 snRNP取代U1和U2，分别识别内含子5' 剪接点和分支点，以作用于A T-AC 内含子U4atac 和U6atac 取代U4和U6催化转酯反应。
9． 分子克隆的基本步骤。
【答案】（1）分离制备待克隆的DNA 片段；
（2）克隆基因载体的选择与构建；
（3）重组DNA 分子的构建；
也作为内源性诱变剂或致癌因子
（4）重组DNA 分子导入受体细胞和重组克隆的筛选；
（5）特定重组克隆的鉴别。
10．简述原核生物与真核生物mRNA 的主要差别。
【答案】（1）真核生物5’一端有帽子结构，大部分成熟的mRNA 还同时具有3’一多聚A 尾巴，原核一般没有;
（2）原核的mRNA 可以编码几个多肤，真核只能编码一个，原核生物以多顺反子的形式存在，真核以单顺反子形式存在;
（3）原核生物以AUG 作为起始密码，有时以GUG ，UUG 作为起始密码，真核几乎永远以AUG 作为起始密码;
（4）原核生物mRNA 半衰期短，真核生物的mRNA 半衰期长。
11．简述叶绿体蛋白质的跨膜运转机制。
【答案】叶绿体定位信号肽一般有两部分：第一部分决定该蛋白质能否进人叶绿体基质，第二部分决定该蛋白质能否进人类囊体。叶绿体蛋白质的跨膜运转机制：
（1）胞质中游离核糖体上合成的叶绿体多肽。
（2）叶绿体多肽在脱离核糖体后折叠成具有三级结构的蛋白质分子。
（3）多肽上某些特定位点结合于只有叶绿体膜上才有的特异受体位点，产生跨膜通道，进入叶绿体基质。
（4）在位于叶绿体基质内的可溶性活性蛋白水解酶的作用下，叶绿体多肽的第一部分跨膜信号肽切除，并 在第二部分信号肽的引导下，跨过类囊体膜，进入类囊体。
（5）切除第二部分信号肽，成为成熟的叶绿体蛋白质。
三、论述题
12．请你描述两个经典实验来证明遗传物质是DNA 而不是蛋白质。
【答案】（1）艾弗里和格里菲斯等人所做的肺炎双球菌转化实验。
艾弗里和同事证明烧煮灭活的S 型菌与活的R 型菌混合感染小鼠将导致小鼠患病死亡，死细菌中可能存在某种因子可将无致病能力的R 型转化为致病S 型。格里菲斯等人在艾弗里的实验基础上，提取分离了S 型菌多糖、蛋白质和DNA 等成分分别转化R 型菌，发现只有DNA 、才能完成转化，证明了转化因子是DNA 。
（2）赫尔希和蔡斯的T 4噬菌体侵染实验。
将细菌分别在含有S 标记的氨基酸和P 标记核苷酸的培养基中培养，细菌中的子代噬菌体就相应含有353532S 标记的蛋白质和32P 争标记的核酸。分别用这些噬菌体侵染未标记的细菌，经过
351~2个噬菌体复制周期后离心检测细菌裂解释放的子代噬菌体放射性（此时噬菌体初期侵染的蛋，结果发现子代噬菌体中几乎不含有白质外壳在上清中，而含有子代噬菌体的菌体在沉淀中）
32S 标记的蛋白质，但有30%以上的P 标记。T 4噬菌体中仅含有DNA 和蛋白质，本实验证明噬菌体
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