● 摘要
摘 要
链格孢霉是一种存在于饲料和食物的真菌之一。这种真菌能够浸染田间农作物以及多种蔬菜和水果。由于链格孢霉在低温下易繁殖生长，所以会引起冷藏的水果以及蔬菜的霉变。链格孢霉可以产生多种代谢物即链格孢霉毒素，主要的链格孢霉毒素有链格孢毒素(ALT)、链格孢酚(AOH)、链格孢酚甲醚(AME)、腾毒素(Tentoxin)以及丙三羧酸酯类化合物(AAL类)毒素等。这些代谢产物有些对动植物具有毒性，有些具有细胞毒性，致畸性和胚胎毒性等危害。食用被链格孢霉毒素污染的食物，将会对人体健康造成危害，但未见对水果中多种链格孢霉毒素含量同时检测方法的报道。本论文通过对水果中链格孢霉毒素的提取方法、样品净化以及检测方法的优化，建立了检测水果中链格孢霉毒素含量的高效液相色谱-荧光检测法以及超高效液相色谱串联质谱，并用于实际样品的检测，结果表明建立的方法灵敏度、准确度均能满足实际需要。
本论文主要内容包括：
第一章：绪论部分，主要对食品安全问题、真菌毒素以及链格孢霉毒素对人体的危害以及链格孢霉毒素的研究现状进行了比较全面的综述。
第二章：建立了同时检测水果中链格孢毒素(ALT)、链格孢酚(AOH)、链格孢酚甲醚(AME)的高效液相色谱-荧光检测法。通过对水果中链格孢霉毒素的提取和样品净化条件的优化，最终确定以乙腈作为样品提取试剂，HLB固相萃取小柱串联NH2固相萃取小柱对样品进行净化处理；以Chromolith Performance RP-18e整体柱为分离柱，乙腈水作为流动相采用梯度洗脱，荧光检测器检测。实验结果表明，加标回收率在78.2%~110.2%范围内，相对标准偏差为5.9%~8.6%。方法稳定性、重现性好，适用于水果中3种链格孢霉毒素的检测。
第三章：建立了同时检测水果中ALT、AOH、 AME、Tentoxin以及AAL毒素的超高效液相色谱串联质谱法，实验中对水果样品经乙腈震荡提取，HLB固相萃取小柱净化处理。以ACQUITY UPLC BEH C18柱(2.1×50 mm，1.7 µm)为色谱分离柱，乙腈水作为流动相梯度洗脱，在最终优化的质谱检测条件下进行加标回收实验。结果表明，加标回收率在76.9%~113.4%范围内，相对标准偏差为2.6%~5.5%。方法简单、快速，定性、定量准确，适应于水果中6种链格孢霉毒素的同时检测。并用建立的超高效液相色谱串联质谱法对霉变水果中的霉变部分以及未霉变部分进行检测，结果表明未霉变部分也含有链格孢霉毒素，提示我们食用霉变水果中的未发霉部分也会对健康产生影响。
关键词：链格孢霉毒素，高效液相色谱，超高效液相色谱-串联质谱，水果
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