2017年北京林业大学生物科学与技术学院705分子生物学考研强化模拟题
● 摘要
一、名词解释
1． RNA 编辑（RNA editing）
【答案】RNA 编辑是指某些RNA ，特别是mRNA 前体的一种加工方式，如插入、删除或取代一些核苷酸残基，导致DNA 所编码的遗传信息发生改变，因为经过编辑的mRNA 序列发生了不同于模板DNA 的变化。
2． 穿梭载体（shuttle vector）
【答案】穿梭载体是指具有多个复制子能在两个以上的不同宿主细胞复制和繁殖的载体。
3．
【答案】核开关。核开关是指一类通过结合小分子代谢物调控基因表达的mRNA 元件，它位于特定的mRNA 区域，可以不依赖于任何蛋白质因子而直接结合小分子代谢物，继而发生构象重排，影响mRNA 活性。
4． 单顺反子mRNA （monocistronic mRNA）和多顺反子mRNA （polycistronic mRNA）。
【答案】单顺反子mRNA 是指能翻译成一条肤链的信使核糖核酸（mRNA ）来自单顺反子;
，多顺反多顺反子mRNA 是指两个以上相关基因串在一起转录所得到的信使核糖核酸（mRNA ）
子mRNA 一般可同步翻译产生功能相关的多个蛋白质或酶。
5． 感受态细胞（competent cell）
【答案】感受态细胞是指受体细胞经过一些特殊方法（如CaCL 等化学试剂）的处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许外源DNA 的载体分子通过的细胞。
6． Transcriptome
【答案】转录组。转录组是指一个活细胞所能转录出的所有niRNA ，即基因组DNA 转录的基因总和。研究转录组的一个重要方法是利用DNA 芯片技术检测机体中基因组的表达。
7． 单核哲酸多态性（single nucleotide polymorphism, SNP）
【答案】单核苷酸多态性是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA 序列多态性。它是人类可遗传的变异中最常见的一种，占所有已知多态性的90%以上。SNP 所表现的多态性只涉及单个碱基的变异，这种变异一般由单个碱基的转换或颠换引起。
8． YAC
【答案】酵母人工染色体。酵母人工染色体是指一种能够克隆长达400Kb 的DNA 片段的载
体，含有酵母细胞中 必需的端粒、着丝点和复制起始序列，可用于基因组大片段库构建。
9． 无义突变（nonsensemutation ）
【答案】无义突变是指在DNA 序列中任何导致氨基酸的三联体密码子转变为终止密码子（UAG 、UGA 、U 从）的突变，它使蛋白质合成提前终止，合成无功能的或无意义的多肽。
10．蛋白质组（proteome ）
【答案】蛋白质组是指一种生物或一个细胞、组织所表达的全套蛋ft 质（protein ）, 即包括一种细胞乃至一种生 物所表达的全部蛋白质。
二、填空题
11．真核生物tRNA 的成熟过程中需要通过拼接去除内含子，这个过程需要a._____和b._____两种酶。
【答案】核酸内切酶; 连接酶
【解析】tRNA 前体的加工包括:
（1）在核酸内切酶RNaseP 作用下，从5' 末端切除多余的核苷酸;
（2）在核酸外切酶RNaseD 作用下，从3' 末端切除多余的核苷酸;
（3）由核苷酸转移酶催化，3' 末端加CC Α-OH ;
（4）核酸内切酶催化进行剪切反应，剪掉内含子，由连接酶连接外显子部分;
（5）化学修饰作用，如甲基化、脱氨基、还原反应等。
12．第一个被解析出晶体结构的蛋白是_____。
【答案】胰岛素
13．许多氨基酸都有多个密码子，除了_____只有一个密码子外，其余都有一个以上密码子。
【答案】色氨酸和甲硫氨酸
【解析】根据三个核苷酸组成一个密码子的原则，4种核苷酸可以组成64个密码子，其中UAA 、UAG 、UGA 为终止密码子，剩余61个代表20种氨基酸，除了色氨酸（UGG ）和甲硫氨酸（Met ）只有一个密码子以外，其余都有一个以上密码子。
14．在蛋白质序列测定中必须先用对蛋白质的多肽链进行部分水解成较小的肽段，才能进一步采用_____法进行肽段的序列测定。
【答案】蛋白酶或化学试剂；Edman 降解
15．SDS-PAGE 中，凝胶的单体为_____，_____是交联剂。蛋白质结合SDS 后均带_____电荷，肽链越长迁移速度越_____。
【答案】丙烯酰胺；甲叉双丙烯酰胺；负；慢
16．蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括_____、_____、_____。
【答案】成核；结构充实；最后重排
【解析】蛋白质折叠机制的首先成核理论的复性过如下：
（1）成核：最先形成α-螺旋及β-折叠片段，使变 性蛋白质从伸展、无活性状态（Us ）转变成部分折叠，产生一些二级结构但仍无活性的状态（II ）;
（2）结构充实：从II 进一步折叠，近于完全，并具有活性，但仍存在着不正确异构体等的状态（In ）;
（3）最后重排：产生天然蛋白质构象（N ）。
三、简答题
17．简述染色质免疫共沉淀（CHIP ）技术原理与基本过程。
【答案】（1）基本原理
在活细胞状态下固定蛋白质-DNA 复合物，并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段，然后通过免 疫学方法沉淀复合体，特异性地富集目的蛋白结合的DNA 片段，通过对目的片断的纯化与检测，获得该蛋白质 与DNA 相互作用的信息。
（2）基本过程
①首先用甲醛处理细胞，使DNA 和蛋白质固定在交联状态；
②接着用超声波法或酶法等处理处理细胞，获得一定长度范围内的染色质小片段；
③ 之后加入目的蛋白的抗体，使其与靶蛋白
④ 随后加入ProteinA , 结合抗体-祀蛋白
与DNA 相互作用的信息。
18．简述抗终止子的调控机制。
【答案】抗终止子是能够在特定位点阻止转录终止的一类蛋白质。依赖因子的终止子上游有抗终止信号，抗终
止蛋白、因子均能与RNA 聚合酶结合，但不能同时与之结合。在RNA 聚合酶到达终止子之前遇到抗终止序列， 抗终止蛋白与RNA 聚合酶结合，使得因子不能与RNA 聚合酶结合，从而不能终止RNA
的转录而形成抗终止效应。
19．蛋白质实验原理与主要步骤。
【答案】（1）实验原理
利用与GST 融合蛋白质探针蛋白质亲和结合，从可溶性蛋白质库中纯化一个未知蛋白质，再
通过GST 与谷 胱甘肽偶联的琼脂糖球珠的结合收集相互作用蛋白质，从而分离出蛋白质复合物。
（2）主要步骤
① GST 融合蛋白先与下列蛋白溶液之一孵育（a. 单一明确的重组蛋白；b. 细胞裂解蛋白混合
； 液；c. 体外 翻译cDNA 表达得到的未知蛋白）
复合物结合； 复合物，并沉淀，清洗沉淀下来的复合物； 片断进行PCR 检测与分析，获得蛋白质⑤ 得到富集复合物，解除交联，对纯化富集的
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