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2017年大连海洋大学903分子生物学Ⅱ(同等学力加试)考研复试核心题库

  摘要

一、名词解释

1. polysome

【答案】多核糖体。多核糖体是指蛋白质合成过程中结合在同一条mRNA 上的多个核糖体,能同时合成若干条蛋白质多肽链。

2. tmRNA

【答案】转移—信使RNA 。tmRNA 是指细菌体内一种修复翻译水平上受阻的遗传信息表达过程的反式翻译机制的核心分子,它兼具tRNA 和mRNA 的特点,在SmpB 蛋白的帮助下特异性识别携带mRNA 缺失体的核糖体,在核糖体蛋白S1的传递作用下结合在A 位点上,一方面延续被中断的mRNA 上的遗传信息,一方面终止蛋白质的合成,释放被束缚的核糖体和tRNA 进入新的翻译过程。

3. 基因扩増

【答案】基因扩增是指某些基因的拷贝数专一性大量增加的现象,结果使得细胞在短期内产生大量的基因产物以满足生长发育的需要。

4. 无义突变(nonsensemutation )

【答案】无义突变是指在DNA 序列中任何导致氨基酸的三联体密码子转变为终止密码子(UAG 、UGA 、U 从)的突变,它使蛋白质合成提前终止,合成无功能的或无意义的多肽。

5. 阻遏蛋白

【答案】阻遏蛋白是指一类在转录水平对基因表达产生负控作用的蛋白质,在一定条件下与DNA 结合,一般具有诱导和阻遏两种类型。

二、简答题

6. 一单链DNA 样品按双脱氧链终止法测得如图结果,请按图读出被测DNA 样品的碱基顺序。

图 样品测得结果

【答案】被测DNA 样品的碱基顺序为:可依次阅读合成片段的碱基排列顺序。

7. 真核生物转录时mRNA 的Poly (A )尾巴是如何加上的?

【答案】多聚A 尾的生成是多聚A 聚合酶的催化下,由A TP 聚合而成。但多聚A 尾形成并不是简单地加入A , 而是先要在mRNA 前体的3' 末端11〜30核苷酸处有一段AAUAAA 保守序列,在U7-snRNP 的协助下识别, 由一种特异的核酸内切酶催化切除多余的核苷酸。随后,在多聚A 聚合酶催化下,发生聚合反应形成了:T 末端多聚A 尾。此过程中,RNA 为受体,A TP 为供体,需要Mg2+或Mna+及蛋白质参与作用。

8. 简述RNA 原位杂交的主要实验过程及应用。

【答案】(1)主要实验过程

①利用放射性或非放射性(如地高辛、生物素等)标记的特异性探针与被固定的组织切片反应;

②放射性标记检测或者酶促免疫显色,对基因的表达产物在细胞水平上做出定性定量分析。 (2)应用

①用于检测动植物组织中某种特定基因的mRNA 的分布状况,从而了解该基因的表达模式;

②在基因分析和诊断方面能够进行定性、定位和定量分析。

9. 简述全基因组鸟枪测序(whole genome shotgun sequencing)的基本步骤。

【答案】全基因组鸟枪测序法是在获得一定的遗传及物理图谱信息的基础上,将基因组DNA 分解成2kb 左右的数百万个DNA 小片段进行随机测序,辅以一定数量的10kb 的克隆和BAC 克隆的末端测序,利用超级计算机进行整合及序列组装。该方法是一种广泛使用的DNA 测序的方法,比传统的测序法快速,但精确度较差。其具体步骤为:

(4)建立高度随机、插入片段大小为2kb 左右的基因组文库。克隆数要达到一定数量,即经末端测序的克 隆片段的碱基总数应达到基因组5倍以上;

(5)高效、大规模的末端测序。对文库中每一个克隆,进行两端测序;

(6)序列集合。利用新的计算机软件,完善序列集合规则,最大限度地排除错误的连锁匹配;

(7)填补缺口。有两种待填补的缺口,一是没有相应模板DNA 的物理缺口,二是有模板DNA 但未测序的序列缺口。可以同时建立插入片段为15〜20kb 的文库以备缺口填补。

10.生物体存在大量的mRNA 前体的选择性剪切过程。什么是选择性剪接,有几种方式?

【答案】(1)选择性剪接是指在mRNA 前体的剪接过程中,参加剪接的外显子可以不按其线性次序剪接,内含子也可以不被切除而保留,即一个外显子或内含子是否出现在成熟mRNA 中是可以选择的一种剪接方式。此外,不同的启动子或不同的poly A加尾位点的选择,也可看作选择性剪接。

根据片段端的双脱氧碱基,

(2)选择性剪接的方式主要有4种:

①拼接产物缺失一个或几个外显子;

②拼接产物保留一个或几个内含子作为外显子的编码序列;

③外显子中存在5' 拼接点或3' 拼接点,从而部分缺失该外显子;

④内含子中存在5' 拼接点或3' 拼接点,从而使部分内含子变为编码序列。

11.简述原核基因转录后调控的不同方式。

【答案】(1) mRNA 自身结构元件对翻译起始的调控

①起始密码子的突变会大大降低翻译效率;

②AUG 上游的一段非翻译区上SD 区域与起始密码子见的距离影响翻译效率;

③mRNA 的二级结构影响核糖体与mRNA 的结合,从而影响了翻译的效率。

(2)mRNA 稳定性对转录水平的影响

mRNA 分子被降解的可能性取决于它们的二级结构,mRNA 被降解翻译效率自然下降。 (3)调节蛋白质的调控作用

有些mRNA 编码的蛋白质可激活靶基因的翻译,相反,mRNA 特异性抑制蛋白则通过与核糖体竞争结合 mRNA 分子来抑制翻译的起始。

(4)反义RNA 的调节作用

反义RNA 与特定的mRNA 互补配对来抑制mRNA 的翻译。

(5)稀有密码子对翻译的影响

由于细胞内稀有密码子的tRNA 较少,不易获得,因而延长了核糖体在mRNA 上行经的时间,从而降低了翻译的效率;

(6)重叠基因对翻译的影响

偶联翻译可能是保证两个基因产物在数量上相等的重要手段。

(7)翻译的阻遏

复制酶可以作为翻译阻遏物来调控蛋白质的合成。

(8)魔斑核苷酸水平对翻译的影响 魔斑核苷酸即分子,当细胞缺乏氨基酸时产生魔斑核苷酸,可在很大范围内做出如抑制核糖体和其他大分子合成的应急反应,活化某些氨基酸操纵子的转录表达,抑制与氨基酸转运无关的系统,活化蛋白水解酶等,以节省或开发能源,以渡过难关。

三、论述题

12.“人类免疫缺陷病毒

【答案】(1)形态结构:

慢病毒亚科。目前己发现

”的发现被授予2008年的诺贝尔生理学和医学奖,试述逆转录病毒是带有包膜的RNA 逆转录病毒,在分类上属逆转录病毒科中的型和型。成熟的病毒粒子直径为面体对称HIV 的 结构特征及其可能的致病机理。 结构、球形,电镜下可见一致密圆锥状核心,内有病毒RNA 分子和酶,后者包括逆转录酶、整合