2018年安徽医科大学解放军113临床学院(解放军113医院,宁波)306西医综合之生物化学考研仿真模拟五套题
● 摘要
一、名词解释
1． 联合脱氨基作用（transcleamination ）。
【答案】联合脱氨基作用是转氨基作用和L-谷氨酸氧化脱氨基作用的联合反应。氨基酸与酮戊二酸经转氨作用生成or 酮酸和谷氨酸，后者经L-谷氨酸脱氢酶作用脱去氨基的过程。
2． 转座子（transposon ）。
【答案】转座子是指可以在同一 DNA 分子的不同位置或者不同DNA 分子之间发生转移的DNA 序列。
3．
【答案】
苷酸序列，并断开每条链的一个磷酸
酶
4． 抗毒素。
【答案】抗毒素是一类对毒素具有中和作用的特异性抗体。能中和相应外毒素的毒性作用，机体经产生外毒素而致病的病原菌感染后即能产生抗毒素。外毒素经甲醛处理后，可丧失毒性而保持免疫原性成为类毒素，应用类毒素进行免疫预防接种，使机体产生相应的抗毒素可以预防疾病。
5． 内源因子
【答案】内源因子是胃幽门黏膜分泌的一种糖蛋白，维生素只有与它结合才可能透过肠壁被吸收，且不被肠细菌破坏。缺乏内源因子可导致维生素的缺乏。
6． 小分子核内 RNA （small nuclear RNA, snRNA）。
【答案】小分子核内RNA 是指真核生物细胞核内一些序列高度保守的小分子RNA , 富含U ，与蛋白质构成复合 物snRNP , 参与mRNA 前体的拼接。
7． 双关酶。
【答案】双关酶能与膜可逆结合，通过膜结合型和可溶型的互变来调节酶的活性。双关酶大
第 2 页，共 32 页 （限制性内切酶）。 （限制性内切酶）时是指一类能识别双链DNA 中特定的核的DNA 内切酶，时细菌限制修饰系统的重要部分，可防止外源DNA 的入侵。目前发现了三类限制性内切酶，其中第二类酶是基因工程重要的工具
多是代谢途径的关键酶和调节酶，如糖酵解中的己糖激酶、磷酸果糖激酶、醛缩酶、3-磷酸甘油
醛脱氢酶；氨基酸代谢的Glu 脱氢酶、Tyr 氧化酶；参与共价修饰的蛋白激酶、蛋白磷酸酯酶等。
8． 转座重组（transposition recombination）。
【答案】转座重组是指DNA 上的核苷酸序列从一个位置转移到另外一个位置的现象。
二、问答题
9． 先用巯基乙醇处理胰岛素使其二硫键断开，再移除巯基乙醇让二硫键重新形成；如果A 、B 两条肽链可以经由一或两个二硫键连接，总共有多少种不同的连接方式？
【答案】A 、B 两链分别有4个和2个通过一个二硫键将两链连接会有4×2=8种；形成两个二硫键连接则有4×3=12种，故总共有8+12=20种不同的连接方式。
10．以葡萄糖经由糖酵解途径和柠檬酸循环氧化后可生成32个ATP 分子计算，当葡萄糖以糖原形式储存后再经由上述途径氧化，其能量损耗有多大？
【答案】葡萄糖分子的降解代谢在经由这种糖原合成及降解绕行时，其底物和产物均为葡萄糖-6-磷酸，即该绕行在UDP-葡萄糖焦磷酸化酶催化的反应中会消耗1个ATP 当量，故其能量损耗相当于1/32或约等于3%。
11．假定你决定从一种新的生物Streptococcus bartelium体内纯化核糖核酸酶，你选择盐析作为纯化的第一步，随着你JJnA 硫酸铵到细胞裂解物之中，进行分级分离。如果你添加的盐浓度是0.5mol/L、lmol/L、1.5mol/L、2mol/L、和2.5mol/L，你如何确定你要的蛋白质在哪一级分离沉淀之中？
如果你选择离子交换层析作为纯化核糖核酸酶的第二步，同样需要确定哪一部分含有目标蛋白。你会使用哪一种离子交换树脂? 为什么? 你如何从交换树脂中洗脱下你的目标蛋白？
你将纯化的蛋白质走SDS-PAGE ，在考马斯亮蓝染色以后，你看到一条单一的
种蛋白质是一种核糖体蛋白，于是你决定再进行一次蛋白质染色，这一次你发现了一条
小的条带。这一次染色方法是什么？为什么
会多显示出新的条带，你如何分离这两种蛋白质？
【答案】（1）在纯化蛋白质过程中，首先需要建立一种测定活性的方法。测定核糖核酸酶活性的方法是利用其将RNA 降解成单个核苷酸的活性。使用放射性标记的NTP ，可转录出带放射性标记的RNA 。以此作为核糖核酸酶的底物，将其与含有酶的部分保温，然后用TCA 沉淀，再使用特定的滤膜过滤，通过测定流过滤膜的带有同位素标记的核苷酸的放射性，可测定出纯化物中酶活性的高低。
（2）既然核糖核酸酶的底物是磷酸核糖骨架带负电荷的RNA , 核糖核酸酶本身很可能带正电荷。因此，可考虑阳离子交换树脂来纯化核糖核酸酶。在低盐浓度下上柱，以吸附核糖核酸酶，
第 3 页，共 32 页 大小的大条带。为了确定它是不是核糖核酸酶，你决定将条带切下，然后测序。然而，你吃惊的发现，这
然后用高盐缓冲液洗脱出核糖核酸酶。
（3）考马斯亮蓝染色的灵敏度仅能检测出含有大约lOOng 的条带，而银染的灵敏度达10ng 。所以使用考马斯亮蓝染色看不到的条带有可能通过银染看到。
为了将的核糖体蛋白与的核糖核酸酶分开，可使用凝胶过滤层析。的核糖核酸酶应该先流出来。
12．比较底物水平磷酸化、光合磷酸化与氧化磷酸化三者的异同。
【答案】（1）底物水平磷酸化是指底物氧化还原反应过程中，分子内部能量重新分布，使无机磷酸酯化，形成高能磷酸酯键，后者在酶的作用下将能量转给ADP ，生成ATP 。
（2）氧化磷酸化是指与生物氧化相偶联的磷酸化作用，发生在线粒体中，生物氧化过程中的电子传递在线粒体内膜两侧产生了浓度差，顺浓度差流动时推动了ATP 的生成，能量的最终来源是代谢过程中产生的还原型辅酶所含的化学能。
（3）光合磷酸化是指与光合作用相偶联的磷酸化作用，发生在叶绿体中，光照引起的电子传递在叶绿体类囊体膜两侧产生了浓度差，顺浓度差流动时推动了ATP 的生成，能量的最终来源是光能。
13．什么是黏性末端？它们在DNA 重组技术中有什么重要性？
【答案】黏性末端是特殊的限制酶切割双链DNA 后获得的DNA 片段中的、由双链DNA 末端伸出的单链DNA 短区域。在DNA 重组技术中由于不同来源的DNA 片段（如外源基因和质粒都含有黏性末端）靠黏性末端的碱基互补的氢键相互结合，再经连接酶催化形成DNA 共价连接，所以可重组DNA 。
14．根据结构与催化机制（而不是根据被驱动的离子类型），说出三类驱动离子的ATP 酶名称。
【答案】三类驱动离子的ATP 酶，即P 型荥、F 型栗和V 型泵。它们的基本功能是通过水解ATP 提供的能量转运离子，或是通过离子梯度合成ATP 。P 型栗或P 型ATPase ，运输时需要磷酸化，包括泵V 型栗或V 型ATPase , 主要位于小泡的膜上，泵；如溶酶体膜中的泵，运输时需A TP 供能，但不需要磷酸化；F 型泵或F 型ATPase , 这种泵主要存在于细菌质膜、线粒体膜和叶绿体膜中，它们在能量转换中起重要作用，是氧化磷酸化或光合磷酸化偶联因子。F 泵工作时不消耗ATP , 而是将ADP 转化成ATP , 但是它们在一定条件下也会具有A TPase 活性。
15．从热力学上考虑，一个多肽的片段在什么情况下容易形成a 螺旋，是完全暴露在水的环境中还是完全埋藏在蛋白质的非极性内部？为什么？
【答案】当多肽片段完全埋藏在蛋白质的非极性内部时，容易形成氢键，因为在水的环境中，肽键的C=0和N-H 基团能和水形成氢键，亦能彼此之间形成氢键，这两种情况在自由能上没有差别。因此相对地说，形成螺旋的可能性较小。而当多肽片段在蛋白质的非极性内部时，这些极性基团除了彼此之间形成氢键外，不再和其他基团形成氢键，因此有利于螺旋的形成。
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