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2017年西南林业大学生命科学学院727分子生物学考研导师圈点必考题汇编

  摘要

一、名词解释

1. Intein

【答案】内含肽。内含肽是指存在于某些蛋白质前体肽链内部的一些肽段在转变为成熟蛋白质时,通过非酶促的转肽反应被切除,与其对应的是保留于成熟蛋白质中的外显肽。这些肽段具有核酸酶活性。

2. 密码子偏爱性(codon preference)

【答案】密码子偏爱性是指不同种属的生物对简并密码具有不同的使用频率的现象。

3. Molecular Bescons

【答案】分子信标。分子信标是指一种具有自身配对区的DNA 寡核苷酸分子探针,利用荧光标记探针的碱基配对原理,通过观察探针荧光显示或淬灭的现象,确定目的基因的分子标记。

4. 阻遏蛋白

【答案】阻遏蛋白是指一类在转录水平对基因表达产生负控作用的蛋白质,在一定条件下与DNA 结合,一般具有诱导和阻遏两种类型。

5. DNA 的甲基化(DNAmethylation )

【答案】DNA 的甲基化是指一种表观遗传修饰,它是由DNA 甲基转移酶催化s-腺苷甲硫氨酸作为甲基的供体,将胞嘧啶转变为

6. CpG 岛 甲基胞嘧啶的一种过程。

CpG 岛是指在人类基因组中分布很不均一的CpG 双核苷酸在基因上成串出现所形成【答案】

的区段。CpG 岛经 常出现在真核生物的管家基因(house-keeping gene)基因的调控区,在其它地方出现时会由于CpG 中胞嘧啶甲基化引发碱基转换,引发遗传信息紊乱。

7. Attenuator

【答案】弱化子。弱化子是指当操纵子被阻遏时,RNA 合成终止,起终止转录信号作用的核苷酸序列。弱化子 对于基因活性的影响是通过影响前导序列mRNA 的结构而发挥作用的,其调节作用的是某种对应氨酰-tRNA 的浓度,典型例子是细菌中的色氨酸操纵子。

8.

【答案】泛素(遍在蛋白)。泛素是指一种存在于大多数真核细胞中,主要功能是标记需要分解掉的蛋白质,使其被水解的小蛋白。

二、简答题

9. 假如你得到一个据说通过改造并适合作为基因治疗载体的病毒,你将如何分析这种可行性?主要在哪些 方面做改造?你将如何测试改造后的病毒载体的效率和安全性?

【答案】(1)作为基因治疗载体的病毒的基本要求:

①能够感染多种生物的多种类型不同的细胞;

②易于改造并易于插入外源基因,能装配成病毒颗粒;

③能使外源基因完全整合到宿主细胞中,并且外源基因要有较高的表达水平;

④对人体安全。

(2)改造包括:

①改造病毒壳粒蛋白的抗原表位;

②减少病毒DNA 中非必需基因的表达;

③减少病毒载体的免疫反应及对细胞的毒性;

④改造所选择的目标基因的插入位点,便于目的基因的装载。

(3)测试病毒载体的效率与安全性:

①病毒载体的有效性表现在能够尽量多地将目的基因导入靶细胞并整合到宿主染色体上,因此可通过检测目的基因的含量来衡量。

②病毒载体的安全性表现在载体对细胞正常代谢的影响。因为病毒载体中可能产生有传染性、野型或辅助型 病毒,随机整合于宿主基因组中,活化癌基因或抑制癌基因失活;也有可能病毒载体自身编码的基因产物过度表达,引起细胞及机体不适的反应。

10.什么是操纵子学说?

【答案】(1)提出人 Jacob 和 Monod

(2)提出时间 1961 年

(3)基本内容

①②

该基因的产物由同一条多顺反子的分子的启动区(P )位于阻遏基因分子所编码。 与操纵区(0)之间,不能单独起始半乳糖苷酶和透过酶基因的高效表达。

③操纵区是DNA 上的一小段序列(仅为26bp ), 是阻遏物的结合位点。

④当阻遏物与操纵区相结合时,

的合成。

这就是说,有诱导物存在时,操纵区没有被阻遏物占据,所以启动子能够顺利起始

转录。

的的转录起始受到抑制。 ⑤ 诱导物通过与阻遏物结合,改变它的三维构象,使之不能与操纵区相结合,

从而激发

11.简述技术进行转录组学分析的原理。

定义

是指利用高通量测序技术对转录组进行测序分析,对测序得到的大量原始读长进行【答案】(1)

过滤、组装及 生物信息学分析的过程。

(2)进行转录组分析的原理

对于有参考基因组序列的物种,需要根据参考序列进行组装,对于没有参考序列的,需要进行从头组装,利 用大量读长之间重叠覆盖和成对读长的相对位置关系,组装得到尽可能完整的转录本,并以单位长度转录本上覆 盖的读长数目作为衡量基因表达水平的标准。

12.简述可诱导和可阻遏的基因调控方式的区别。

【答案】(1)可诱导调节是指一些基因在特殊的代谢物或化合物的作用下,由原来关闭的状态转变为工作状态,即在某些物质的诱导下使基因活化的机制。

在可诱导的系统中,操纵子只有在诱导物存在时才开放。存在诱导物时,它与阻遏物结合,使之变构不再与操纵子结合,从而开启操纵子。没有诱导物时,阻遏物结合在操纵子上阻止结构基因的转录。酶的诱导是分解途 径所特有的,诱导物就是酶的底物或者底物类似物。

(2)可阻遏调节是指一些基因平时都是开启的,处在产生蛋白质或酶的工作过程中,由于一些特殊代谢物 或化合物的积累而将其关闭,阻遏了基因的表达的机制。

在可阻遏系统中,操纵子被终产物所关闭。存在终产物时,它结合到阻遏物上,改变后者的构象,使其能结合到操纵子上,关闭操纵子。不存在终产物时,阻遏物不能结合到操纵子上,因此操纵子开放。酶的阻遏是合成代谢的特点。

13.什么是FISH 技术?如何利用它来构建基因组的物理图谱?

【答案】(1)技术定义

技术即荧光原位杂交技术,是指用特殊的荧光素标记DNA 探针,然后在染色体、细胞

或组织切片标本 上进行DNA 杂交,来检测细胞内DNA 或RNA 特定序列是否存在的一种非放射性原位杂交方法。

(2)利用FISH 技术构建基因组物理图谱的方法

HSH 技术和RFLE 结合,可以精确地描述染色体核型,染色体长、短臂等结构的改变以及染色体复杂片段 的性质,在基因图谱绘制中,HSH 和结合起来,能较精确地确定具有高度多形态的基因位点。

14.假如某个基因突变长出两个尾巴的异常果蝇,但你不知道该表型涉及一个基因还是多个基因,你将如何 设计实验解决这一问题?请提出实验方案找到涉及这个性状的突变基因。

【答案】实验方案如下:

(1)选取尾巴发育正常的果蝇为对照组,选取尾巴发育异常的果蝇为实验组;

(2)分别提取两组果蝇的总RNA 构建cDNA 文库,然后进行序列比对,找出突变基因序列;